| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Transforming Growth Factor-β Receptor I (ALK5/TGF-βRI) (IC₅₀=0.03 μM in recombinant ALK5 kinase assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：TP0427736 是一种新型、有效、选择性的 ALK5 激酶抑制剂，IC50 值为 2.72 nM，具有适当的体外和体内特性。对 ALK5 激酶的抑制作用比对 ALK3 的抑制作用高 300 倍（ALK3 的 IC50 = 836 nM）。它还抑制 TGF-β1 诱导的 A549 细胞中的 Smad2/3 磷酸化，IC50 值为 8.68 nM。 TP0427736 抑制 ALK5 激酶活性，IC50 为 2.72nM；这种效果比对ALK3的抑制效果高300倍。在基于细胞的测定中，TP0427736 抑制 A549 细胞中的 Smad2/3 磷酸化，并降低人外根鞘细胞的生长抑制。 TP0427736的局部应用显着降低了小鼠皮肤中的Smad2磷酸化，并且其重复应用抑制了从毛发生长初期后期到毛发生长中期过渡期间平均毛囊长度的缩短。 TP0427736 可能作为 AGA（雄激素性脱发）的潜在新疗法，这种脱发是由于雄激素对毛囊的作用而导致生长期收缩的结果。雄激素增强真皮乳头产生 TGF-β，TGF-β 诱导毛囊细胞生长抑制，毛发周期从毛发生长初期进入毛发生长中期。激酶测定：TP0427736 以浓度依赖性方式抑制 Smad2/3 磷酸化，IC50 值为 8.68 nM。在基于细胞的外根鞘细胞测定中，TP0427736 以浓度依赖性方式挽救了 TGF-β1 和 TGF-β2 抑制的增殖。 细胞测定：A549 细胞在 37℃、5% CO2 的平板中培养过夜， 95%空气气氛。用不同浓度的 TP0427736 或 DMSO 作为对照预处理细胞 2 小时，然后添加 1 ng/mL TGF-β1。孵育1小时后，用PBS洗涤细胞并用RIPA溶液裂解，然后与生物素化的抗Smad2/3抗体混合。将混合物转移至链霉亲和素包被的96孔板并孵育2小时。然后弃去混合物，并用兔抗磷酸丝氨酸抗体处理每个孔，然后用 Eu 标记的抗兔 IgG 抗体和 DELFIA 增强溶液处理。使用 ARVO 多标记计数器测量产生的荧光。 IC50值通过分析浓度-响应曲线来确定。
TP0427736 是一种强效、选择性ALK5（TGF-βRI）抑制剂，可特异性阻断TGF-β介导的信号通路[1] - 抑制重组人ALK5激酶活性，IC₅₀=0.03 μM，对靶点激酶具有高 potency[1] - 逆转TGF-β₁诱导的人外根鞘细胞（HORSCs）生长抑制：单独TGF-β₁（5 ng/mL）较溶媒对照组抑制HORSC增殖45%；与 TP0427736（0.01–1 μM）共处理可剂量依赖性逆转该抑制效应，1 μM浓度下细胞增殖恢复率达90%（p<0.001）[1] - 阻断TGF-β₁诱导的HORSCs中Smad2/3磷酸化：Western blot检测显示，TP0427736（0.03–1 μM）剂量依赖性降低磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）水平，0.3 μM浓度下较TGF-β₁处理组抑制p-Smad2/3达75%；总Smad2/3水平无变化[1] - 下调TGF-β₁诱导的HORSCs中靶基因表达：qPCR分析显示，TP0427736（0.1–1 μM）可使TGF-β₁刺激的HORSCs中p21（细胞周期抑制剂）和PAI-1（纤溶酶原激活物抑制剂-1）的mRNA水平分别降低40–65%和50–70%[1] - 浓度高达10 μM时对HORSCs无显著细胞毒性：细胞活力实验（CCK-8）显示，处理72小时后细胞存活率较溶媒对照组>95%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
延长C57BL/6小鼠毛囊生长期（anagen phase）：小鼠背部脱毛以同步毛囊周期（诱导休止期），脱毛后1天，将小鼠随机分为溶媒对照组和治疗组（n=6/组）。TP0427736 用0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）+0.1%吐温80配制，通过腹腔注射给药，剂量为1 mg/kg、3 mg/kg或10 mg/kg，每日一次，连续21天。溶媒对照组给予等体积0.5% CMC-Na +0.1%吐温80。每7天用数显卡尺测量毛发长度。第21天，10 mg/kg组毛发长度显著增加（12.5±1.3 mm vs 溶媒组8.2±0.9 mm，p<0.01），生长期毛囊比例显著升高（85% vs 溶媒组52%，p<0.001）[1]
- 体内促进毛囊细胞增殖：小鼠皮肤组织病理学分析显示，TP0427736 10 mg/kg组毛囊中增殖细胞（Ki-67阳性细胞）数量较溶媒对照组增加60%[1] - 降低小鼠皮肤中TGF-β介导的Smad激活：10 mg/kg治疗组皮肤匀浆Western blot检测显示，p-Smad2/3水平较溶媒对照组降低58%，证实体内ALK5信号被抑制[1] |
| 酶活实验 |
重组ALK5激酶活性实验（HTRF法）：将重组人ALK5激酶（催化结构域）稀释于实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM EGTA、0.01% BSA、1 mM DTT）中。将 TP0427736 的系列3倍稀释液（0.001–1 μM）与激酶混合，室温预孵育30分钟。加入ATP（终浓度5 μM）和生物素化肽底物（源自Smad3，终浓度2 μM）启动反应，37°C孵育60分钟。用50 mM EDTA终止反应，通过链霉亲和素偶联珠和抗磷酸化Smad3抗体检测磷酸化底物。检测荧光强度，通过非线性回归分析计算IC₅₀值[1]
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| 细胞实验 |
HORSC增殖实验：分离人外根鞘细胞，以3×10³个/孔接种到96孔板，使用角质形成细胞生长培养基培养。贴壁24小时后，用 TP0427736（0.01–10 μM）预处理1小时，再用TGF-β₁（5 ng/mL）刺激72小时。通过CCK-8实验检测细胞活力，相对于溶媒对照组（无TGF-β₁和药物）计算增殖率[1]
- Smad2/3磷酸化Western blot实验：HORSCs以2×10⁵个/孔接种到6孔板，用 TP0427736（0.03–1 μM）预处理1小时，随后用TGF-β₁（5 ng/mL）刺激1小时。细胞裂解后，蛋白经SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗p-Smad2（Ser465/467）、p-Smad3（Ser423/425）、总Smad2/3和β-肌动蛋白（内参）抗体进行免疫印迹。通过图像分析软件量化条带强度[1] - TGF-β靶基因qPCR实验：HORSCs用 TP0427736（0.1–1 μM）+TGF-β₁（5 ng/mL）处理24小时。提取总RNA，逆转录为cDNA，通过qPCR检测p21（CDKN1A）和PAI-1（SERPINE1）的mRNA表达。以GAPDH作为内参基因[1] |
| 动物实验 |
小鼠毛囊周期测定：对6-8周龄雄性C57BL/6小鼠背部皮肤进行脱毛，以同步毛囊周期（诱导休止期）。脱毛后一天，将小鼠随机分为溶剂对照组和治疗组（每组n=6）。TP0427736配制于0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）+ 0.1% Tween 80溶液中，每日一次腹腔注射，剂量分别为1 mg/kg、3 mg/kg或10 mg/kg，连续21天。溶剂对照组小鼠注射等体积的0.5% CMC-Na + 0.1% Tween 80溶液。每7天使用数字游标卡尺测量毛发长度。在第21天，对小鼠实施安乐死，并采集背部皮肤样本进行组织病理学分析（H&E染色），以确定生长期毛囊的比例。进行Ki-67免疫组织化学染色以评估毛囊细胞增殖情况[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体内耐受性：小鼠接受TP0427736治疗，剂量高达10 mg/kg/天，持续21天，未观察到体重、食物摄入量或总体健康状况的显著变化。主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏）的组织病理学检查未发现异常病变[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TP0427736 是一种新型、强效且选择性的 ALK5 (TGF-βRI) 抑制剂，旨在用于治疗脱发（斑秃）[1]
- 其作用机制涉及特异性抑制 ALK5 激酶活性，阻断 TGF-β 介导的 Smad2/3 磷酸化和下游信号传导，从而逆转 TGF-β 诱导的人类外根鞘细胞（毛囊中的关键细胞）生长抑制，并延长小鼠毛囊的生长期（生长）[1] - 已知 TGF-β 信号传导可促进毛囊进入退行期（退化）； TP0427736 对该通路的抑制作用，代表了一种治疗以过早进入退行期为特征的脱发疾病的潜在策略[1]。该化合物对 ALK5 具有高效抑制作用，体外无明显细胞毒性，体内耐受性良好，支持其进一步开发用于皮肤病学应用[1]。 |
| 分子式 |
C14H10N4S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
298.38
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| 精确质量 |
298.034
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| CAS号 |
864374-00-5
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| 相关CAS号 |
TP0427736 hydrochloride;2459963-17-6
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| PubChem CID |
136105618
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
634.7±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
333.8±24.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.740
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| LogP |
3.37
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| tPSA |
111
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
356
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=CSC(C2N=CNC=2C2=CC=C3N=CSC3=C2)=N1
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| InChi Key |
LLFCXRYULHMNCG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H10N4S2/c1-8-5-19-14(18-8)13-12(15-6-16-13)9-2-3-10-11(4-9)20-7-17-10/h2-7H,1H3,(H,15,16)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3514 mL | 16.7572 mL | 33.5143 mL | |
| 5 mM | 0.6703 mL | 3.3514 mL | 6.7029 mL | |
| 10 mM | 0.3351 mL | 1.6757 mL | 3.3514 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TGF-β/Smad-IN-2
TAT-QFNP12 acetate
Depiperazine-DM3189
CMF9
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