| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5g |
|
||
| 10g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Triacylglycerol (TG) lipases hydrolyze triacylglycerol to diacylglycerol and free fatty acids. The major TG lipases in murine white adipose tissue (WAT) are adipose triglyceride lipase (ATGL) and hormone-sensitive lipase (HSL). The HSL-specific inhibitor 76-0079 (NNC 0076-0000-0079) was used to differentiate between these activities. [1]
In rat liver, alkaline triacylglycerol lipase activity (pH 7.5) is associated with the plasma membrane and released by heparin. [2] In yeast, Tgl4 is a major TG lipase and a functional ortholog of murine ATGL, activated by cyclin-dependent kinase 1 (Cdk1/Cdc28)-dependent phosphorylation at threonine 675 and serine 890. [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在小鼠 WAT 的胞质制备物中，HSL 特异性抑制剂 76-0079 (5 μM) 降低了野生型和 ATGL 敲除 WAT 中的 TG 水解酶活性，但对 HSL 敲除 WAT 无影响，证明其对 HSL 具有特异性。联合抑制 ATGL 和 HSL（使用 ATGL-ko 胞质加 76-0079）导致 TG 水解酶活性降低 >95%。 [1]
ATGL 的共激活剂 CGI-58 使野生型和 HSL-ko WAT 胞质制备物中的 TG 水解酶活性分别提高了 1.7 倍和 2.1 倍，但在 ATGL-ko WAT 中没有效果，表明 ATGL 是 CGI-58 的唯一靶点。 [1] 在大鼠肝匀浆中，碱性 TG 脂肪酶活性在 pH 7.5 时最佳，在底物浓度 >3 mM 时，线性保持约 20 分钟。未检测到明显的二或单[1-¹⁴C]油酰甘油积累，表明甘油三酯的降解速率受第一个酯键水解的限制。 [2] 在酵母中，Tgl4 脂肪酶活性受 Cdk1/Cdc28 依赖性磷酸化的刺激。将磷酸化位点（苏氨酸 675 和丝氨酸 890）突变为丙氨酸，体内脂肪分解活性降低高达 90%；而突变为谷氨酸（模拟组成型磷酸化）则产生高脂肪分解活性，且对 Cdk1 抑制具有抗性。 [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠 WAT 器官培养中，与野生型相比，HSL-ko 和 ATGL-ko WAT 中 forskolin 刺激的 FFA 释放分别减少了 38% 和 70%。HSL 抑制剂 76-0079 (25 μM) 使野生型和 ATGL-ko WAT 中 forskolin 刺激的 FFA 释放分别减少了 68% 和 94%。在 HSL-ko WAT 中，76-0079 没有效果。 [1]
在大鼠中，链脲佐菌素诱导的糖尿病使肝脏碱性 TG 脂肪酶比活性在 24 小时降至正常的 39%，并在 72 小时和 7 天时保持较低水平。慢性胰岛素治疗使正常大鼠的总脂肪酶活性增加了 40%，使糖尿病大鼠的总脂肪酶活性增加至正常的 155%。停用胰岛素 32 小时使活性降至正常的 65%。禁食 24 小时也显著降低了脂肪酶活性（对照的 35%）。急性胰岛素或胰高血糖素给药对肝脏碱性脂肪酶活性没有影响。 [2] 在酵母中，Tgl4 磷酸化和脂肪分解在细胞周期的 G1 晚期最为活跃，与芽体形成同时发生。缺乏 TG 脂肪分解的 tgl3 tgl4 双突变体显示出延迟的芽体形成和延迟进入 S 期。在存在浅蓝菌素的情况下，tgl3 tgl4 突变体中的芽体形成被阻断，但在野生型细胞中则没有。 [3] |
| 酶活实验 |
TG 水解酶实验（小鼠）： 含有三油精和[9,10-³H]三油精的底物用磷脂酰胆碱/磷脂酰肌醇乳化。将胞质组分与底物在 37°C 下孵育 60 分钟。用甲醇/氯仿/庚烷和碳酸钾/硼酸缓冲液终止反应。通过液体闪烁计数测定上相中的放射性。 [1]
脂肪酶实验（大鼠肝脏）： 将三[1-¹⁴C]油酰甘油用 5% 阿拉伯胶乳化。测定混合物含有 10 mg 低脂肪酸牛血清白蛋白、3.2 μmol 三油精（含 0.08 μCi 三[1-¹⁴C]油酰甘油）和肝蛋白，溶于 0.10 M 磷酸钾、1 mM EDTA，pH 7.5。在 37°C 下孵育 10-40 分钟。通过液体闪烁光谱法测定[¹⁴C]油酸的释放。 [2] |
| 细胞实验 |
小鼠 WAT 器官培养： 将性腺脂肪垫与含或不含 10 μM forskolin 和/或 HSL 抑制剂 76-0079 的 DMEM 在 37°C 下预孵育 1 小时。然后将组织转移到新鲜培养基中再孵育 60 分钟。分析培养基等分试样的 FFA 和甘油含量。 [1]
酵母细胞培养与分析： 将酵母细胞培养至稳定期，并通过 RediGrad 梯度离心或 α 因子阻滞进行同步化。对于脂肪分解分析，将细胞在含有 40 μg/mL 浅蓝菌素的新鲜培养基中孵育以抑制脂肪酸从头合成。通过脂质提取和 TLC 分析 TG 含量。对于细胞周期分析，通过显微镜评估芽体形成，通过 FACS 评估 DNA 含量。通过蛋白沉淀后在 6% SDS-PAGE 凝胶上进行免疫印迹评估 Tgl4 磷酸化。 [3] |
| 动物实验 |
大鼠糖尿病研究： 成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠经心内注射 100 mg/kg 链脲佐菌素。对于慢性胰岛素治疗，大鼠每 16 小时皮下注射 10 U/kg 鱼精蛋白锌胰岛素，共 4 次，并在最后一次注射后 16-18 小时处死。对于急性胰岛素治疗，在处死前 90 分钟腹腔注射普通胰岛素。对于胰高血糖素治疗，在处死前 30 分钟心内注射 1 mg/kg。取出肝脏，匀浆，并测定碱性 TG 脂肪酶活性。测量血浆葡萄糖、脂肪酸和甘油三酯。 [2]
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
ATGL 和 HSL 是小鼠白色脂肪组织中的主要 TG 脂肪酶，共同占 TG 水解酶活性的 >95%。ATGL 优先进行 TG 的初始水解以生成 DG，而 HSL 有效地将 DG 降解为 MG 和 FFA。 [1]
在大鼠肝脏中，碱性 TG 脂肪酶活性在糖尿病和禁食时降低，并通过慢性胰岛素治疗升高，但对胰岛素或胰高血糖素没有急性反应。该活性似乎与血浆游离脂肪酸浓度呈负相关。 [2] 在酵母中，Tgl4 脂肪酶活性在细胞周期中受 Cdk1/Cdc28 依赖性磷酸化的调节，为芽体形成期间的膜合成提供脂肪酸和脂质前体。这代表了细胞周期调节激酶与 TG 降解之间的直接联系。 [3] |
| CAS号 |
9001-62-1
|
|---|---|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~3.33 mg/mL
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
