| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 50mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
GLUK5-containing kainate receptor
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| 体外研究 (In Vitro) |
为了制备含红藻氨酸受体的GLUK5选择性拮抗剂，合成了带有酸性基团的N3苄基取代基的威拉定衍生物。UBP296被发现是脊髓中含有红藻氨酸受体的天然GLUK5的强效选择性拮抗剂，其活性存在于S对映体（UBP302）中。在表达人红藻氨酸受体亚基的细胞中，UBP296选择性地抑制了含有同源或异源形式GLUK5的细胞中谷氨酸诱导的钙内流。在放射性配体置换结合研究中，维拉替丁类似物在大鼠GLUK6、GLUK2或GLUK6/GLUK2上置换了[3H]红藻氨酸结合，IC50值>100微M。使用GLUK5和GLUK6拮抗剂结合形式的同源模型解释了UBP296的GLUK5选择性[1]。
使用钙内流研究表征人红藻氨酸受体上的UBP296 UBP296抑制了稳定表达含红藻氨酸受体的重组人GLUK5的HEK293细胞中谷氨酸诱导的钙内流。谷氨酸诱导表达GLUK5、GLUK5/GLUK6和GLUK5/GLUK2的细胞中钙内流，EC50值分别为22±5、27±9和35±41μM，这被UBP296抑制，IC50值分别为3.5±1.5、4.0±0.7和7.0±5.1μM（n=3，平均值±s.e.M.）。使用Cheng-Prusoff方程，分别计算出UBP296对表达GLUK5、GLUK5/GLUK6和GLUK5/GLUK2的细胞中谷氨酸诱导的钙内流的拮抗作用的Kb值为0.6±0.1、0.8±0.1和1.0±0.4μM（n=3，平均值±s.e.M.）（图4A）。浓度高达300μM的UBP296对表达GLUK6和GLUK6/GLUK2的细胞中的钙内流几乎没有影响（图4A）。 人红藻氨酸受体上UBP296的电生理特征[1] 在表达人GLUK5的HEK293细胞中，UBP296抑制了100μM谷氨酸诱导的稳态离子电流。浓度为1、3和10μM的UBP296分别抑制谷氨酸电流41±5、67±3和83±3%（图4B；n=3，平均值±s.e.M.）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在大鼠海马脑片中，UBP296在亚阈值浓度下可逆地阻断ATPA诱导的突触传递抑制，直接影响AMPA受体介导的突触传递。UBP296在含有2mM（但不是4mM）Ca2+的培养基中也完全阻断了苔藓纤维LTP的诱导。这些数据为含GLUK5的红藻氨酸受体在苔藓纤维LTP中的作用提供了进一步的证据。总之，UBP296是迄今为止描述的含有红藻氨酸受体的GLUK5最有效和最具选择性的拮抗剂。
UBP296是脊髓红藻氨酸受体的选择性拮抗剂[1] 为了研究最有效和最具选择性的红藻氨酸受体拮抗剂的选择性，测量了UBP296阻断运动神经元对AMPA、NMDA、DHPG（mGlu1和mGlu5受体激动剂）和红藻氨酸等有效反应的能力。在UBP296（50μM）存在的情况下，对红藻氨酸、AMPA、DHPG和NMDA的反应分别为没有拮抗剂时的60.3±5.2、82.2±6.7、110±5和116±12%（n=3；平均值±标准误差）。样本轨迹如图3所示。配对学生t检验表明，UBP296存在下的NMDA和DHPG值与对照组反应没有显著差异（P>0.10）。因此，很明显，UBP296不作为脊髓运动神经元上存在的NMDA或第1组代谢型谷氨酸受体的拮抗剂。 |
| 细胞实验 |
UBP296在第一次添加时没有激动剂，在第二次添加时有100μM谷氨酸存在。刀豆球蛋白A的存在可能会改变估计的IC50值（Patenain等人，1998），因此它们对生理实验来说不是决定性的，然而，拮抗剂效力的排名顺序预计不会改变。
在电生理分析中，使用膜片钳技术的紧密密封全细胞配置，从单个细胞中进行全细胞电压钳记录（Vh=-70 mV）（Hamill等人，1981）。将带有贴壁细胞的盖玻片玻璃碎片在含有250μg/ml刀豆蛋白A的培养基中预孵育至少10分钟，以阻断脱敏，然后放置在灌注室中，用组成为138 mM NaCl、5 mM CaCl2、5 mM KCl、1 mM MgCl2、10 mM HEPES和10 mM葡萄糖的缓冲液冲洗，pH 7.5，用NaOH（渗透摩尔浓度295 mOsm/kg）。移液管溶液含有：140 mM CsCl、1 mM MgCl2、14 mM磷酸肌酸二三水合物、50 U/ml肌酸磷酸激酶、14 mM MgATP、10 mM HEPES和15 mM BAPTA，pH 7.2，含CsOH（渗透压摩尔浓度295 mOsm/kg）。实验在室温（20-22°C）下进行，并使用pClamp 8软件 在Axopatch 200 A放大器上进行记录。移液管电阻通常为1.5-2.5 MΩ。 使用GraphPad Prism 3.02软件 分析UBP296的浓度-响应曲线，斜率系数固定为1，顶部和底部分别固定为100%和0%抑制。根据Cheng-Prusoff方程（Cheng和Prusoff，1973），根据抑制100μM谷氨酸诱导的钙内流的IC50值计算解离常数（Kb）： 其中[Glu]是谷氨酸的浓度（100μM），EC50-Glu是谷氨酸在给定细胞系中引发钙内流的EC50值，由谷氨酸浓度-反应曲线确定，该曲线与UBP296浓度-响应曲线在同一平板上运行[1]。 |
| 动物实验 |
对新生大鼠运动神经元上表达的多种谷氨酸受体进行UBP296表征[1]
为了研究UBP296对运动神经元上表达的受体的影响，我们在河豚毒素（TTX，10 μM，持续2分钟，然后0.1 μM持续给药）存在的情况下进行了实验，以阻断动作电位依赖性释放。在该方案中，未施加任何刺激，而是通过测量激动剂施加后腹根极性的直流偏移来测定激动剂诱导的运动神经元去极化的峰值幅度（More等人，2002）。在测定UBP296拮抗剂选择性的实验中，分别在有或无UBP296（50 μM；预孵育30分钟）的情况下，用含有等效浓度(S)-AMPA（0.7 μM）、红藻氨酸（2 μM）、NMDA（10 μM）或(S)-3,5-二羟基苯甘氨酸(DHPG)（20 μM）的培养基处理1分钟。采用配对t检验进行统计学显著性检验。 |
| 参考文献 |
[1]. Characterisation of UBP296: a novel, potent and selective kainate receptor antagonist. Neuropharmacology. 2004 Jul;47(1):46-64.
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| 其他信息 |
2-[[3-(2-氨基-2-羧乙基)-2,6-二氧代-1-嘧啶基]甲基]苯甲酸是一种α-氨基酸。
已鉴定出一系列新型的威拉地因衍生物，它们可作为选择性红藻氨酸受体拮抗剂。UBP296及其纯化的S对映体UBP302被证实是高效且高选择性的GLUK5拮抗剂。与先前报道的拮抗剂（如LY377770和LY382884）相比，这些化合物具有以下优势：对GLUK5受体的选择性高于AMPA受体，且水溶性更佳，因此可作为研究含GLUK5亚基的红藻氨酸受体生理功能的有用药理学工具。 UBP296 已被用于提供进一步的证据，证明含有 GLUK5 的红藻氨酸受体在控制海马苔状纤维到 CA3 突触的突触传递以及诱导苔状纤维 LTP 中发挥作用。[1] |
| 分子式 |
C15H15N3O6
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|---|---|
| 分子量 |
333.296103715897
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| 精确质量 |
333.096
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| 元素分析 |
C, 54.05; H, 4.54; N, 12.61; O, 28.80
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| CAS号 |
745055-86-1
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| PubChem CID |
11674376
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
603.0±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
318.5±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
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| LogP |
1.58
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| tPSA |
141
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
576
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1N(C(C=CN1CC(C(=O)O)N)=O)CC1C=CC=CC=1C(=O)O
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| InChi Key |
UUIYULWYHDSXHL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H15N3O6/c16-11(14(22)23)8-17-6-5-12(19)18(15(17)24)7-9-3-1-2-4-10(9)13(20)21/h1-6,11H,7-8,16H2,(H,20,21)(H,22,23)
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| 化学名 |
2-[[3-(2-amino-2-carboxyethyl)-2,6-dioxopyrimidin-1-yl]methyl]benzoic acid
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| 别名 |
UBP 296; 745055-86-1; (RS)-1-(2-amino-2-carboxyethyl)-3-(2-carboxybenzyl)pyrimidine-2,4-dione; CHEMBL372631; UBP296; 2-[[3-(2-amino-2-carboxyethyl)-2,6-dioxopyrimidin-1-yl]methyl]benzoic acid; 2-[[3-(2-amino-2-carboxyethyl)-2,6-dioxo-1-pyrimidinyl]methyl]benzoic acid; 2-((3-(2-Amino-2-carboxyethyl)-2,6-dioxo-2,3-dihydropyrimidin-1(6H)-yl)methyl)benzoic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0003 mL | 15.0015 mL | 30.0030 mL | |
| 5 mM | 0.6001 mL | 3.0003 mL | 6.0006 mL | |
| 10 mM | 0.3000 mL | 1.5002 mL | 3.0003 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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