Natural product; secondary metabolite
Usnic acid targets multiple biological pathways, including those involved in oxidative stress, inflammation, and microbial growth. Its antioxidant activity is mediated by its ability to scavenge free radicals and inhibit lipid peroxidation. Its antimicrobial activity is attributed to its ability to disrupt microbial cell membranes and inhibit microbial enzymes. Its anticancer activity is thought to involve induction of apoptosis and inhibition of cell proliferation. Usnic acid's multiple mechanisms of action contribute to its diverse pharmacological activities.

破骨细胞是唯一能够吸收骨组织的细胞，它们在M-CSF和RANKL存在的情况下由单核细胞/巨噬细胞产生，并在体内通过免疫反应被激活。地衣酸是地衣的次生代谢产物，具有独特的二苯并呋喃骨架。多年来，它一直被用于化妆品、香料和传统药物中。地衣酸具有广泛的生物活性，包括抗炎、抗菌、抗癌、抗病毒等。然而，目前尚未有关于地衣酸抗破骨细胞生成活性的报道。本研究旨在探讨地衣酸是否能够影响RANKL介导的破骨细胞生成。地衣酸通过降低破骨细胞生成关键调控因子NFATc1的转录和翻译表达，显著抑制RANKL介导的破骨细胞形成和功能[1]。体外实验表明，地衣酸具有抗氧化、抗癌、抗真菌、抗原生动物和抗菌活性。它对正念珠菌和其他念珠菌属真菌具有杀灭作用。其抗氧化活性已通过多种体外实验得到证实，包括DPPH自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验。其抗癌活性已在多种癌细胞系中得到验证。

松萝酸对LPS诱导小鼠血清生化标志物的影响[1]
首次注射松萝酸8天后，采用ELISA法检测血清中骨吸收标志物TRAP-5b的浓度。LPS组血清TRAP-5b水平约为对照组的两倍，而LPS+松萝酸组血清TRAP-5b水平约为LPS组的30%。

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松萝酸抑制LPS诱导小鼠骨丢失[1]
采用LPS诱导的小鼠骨侵蚀模型评价松萝酸的抗骨吸收活性。收集小鼠股骨，并使用微型计算机断层扫描（μCT）系统进行分析。 μCT显示，LPS处理导致股骨干骺端小梁骨骨量减少，而松萝酸处理则显著抑制了LPS介导的小梁骨丢失（图6A）。松萝酸显著抑制了LPS介导的骨矿物质密度（BMD）、骨体积/总体积（BV/TV）、骨表面积/总体积（BS/TV）和小梁间距（Tb.Sp）的变化。

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松萝酸可预防小鼠脂多糖（LPS）诱导的骨侵蚀。综上所述，我们的结果表明松萝酸可能是一种潜在的骨质疏松症治疗候选药物[1]。
体内研究表明，剂量>50 mg/kg的松萝酸可减少大鼠吲哚美辛诱导的胃溃疡数量。这种作用是通过降低脂质过氧化和髓过氧化物酶活性实现的。松萝酸在癌症和传染病治疗方面的潜在应用也已被研究。有报道称其可局部用作抗生素。

采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 测定血清 TRAP 水平 [1]
从 LPS 处理的骨质疏松模型小鼠的眼眶后静脉丛采集血液，并在 18,000 g 下离心 5 分钟。分离血清并储存于 -20 °C。使用抗酒石酸酸性磷酸酶 5b ELISA 试剂盒测定血清 TRAP-5b 水平。分析按照制造商提供的方案进行。
地衣酸的体外酶/受体结合（非细胞）活性测定包括使用 DPPH 自由基清除、ABTS 自由基清除和脂质过氧化抑制等方法测定其抗氧化活性。其抗菌活性采用标准肉汤微量稀释法测定针对各种微生物菌株的最低抑菌浓度 (MIC)。

细胞活力检测：采用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 法测定乌斯尼酸对骨髓单核细胞(BMM)活力的影响。简而言之，将BMM以1 × 10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔板中，并用不同浓度的乌斯尼酸（0、0.3、1和3 µM）培养3天。根据制造商的说明，使用CCK-8试剂盒评估细胞活力。

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骨陷窝形成实验：骨陷窝形成实验按先前所述进行。将BMM以3 × 10⁵个细胞/孔的密度接种于骨分析板（24孔板）上，并在乌斯尼酸（0、1和3 µM）存在下，用10 ng/mL RANKL和30 ng/mL M-CSF刺激。 4天后，用5%次氯酸钠溶液处理5分钟去除细胞，然后在光学显微镜下观察吸收区域（放大倍数×50），之后使用ImageJ软件进行测量。
利用癌细胞系和微生物培养物进行基于细胞的体外实验，研究松萝酸的作用。用不同浓度的松萝酸处理细胞，并评估细胞活力、凋亡和增殖情况。通过测量微生物生长的抑制情况来评估其抗菌活性。

脂多糖（LPS）诱导的骨侵蚀 所有涉及小鼠的实验操作均严格按照华南师范大学动物护理与使用委员会（SCNU IACUC）的实验动物饲养和使用指南进行（许可证号：SCNU IACUC-2016-08）。LPS诱导的骨侵蚀实验方法如前所述[28]。将5周龄雄性ICR小鼠随机分为3组，每组6只。在注射LPS（Sigma-Aldrich，美国密苏里州圣路易斯）前一天，以及随后每天（直至实验结束）腹腔注射地衣酸（1 μg/g体重）或10% Kolliphor ER（PBS溶液，对照组）。在第1天和第4天，腹腔注射LPS（5 μg/μL，溶于0.1% BSA PBS）。所有小鼠均通过颈椎脱臼处死，并使用高分辨率微型CT（SKYSCAN 1272；Bruker，Billerica，MA，USA）扫描其股骨，并使用DataViewer（SKYSCAN）软件进行成像。使用SKYSCAN分析工具自带的CTAn软件测量骨矿物质密度（BMD）、骨体积/总体积（BV/TV）、骨表面积/总体积（BS/TV）和骨小梁间距（Tb.Sp），以评估股骨的骨小梁微结构。
在胃溃疡、癌症和感染的动物模型中进行了地衣酸的体内动物实验。地衣酸通过口服或局部给药，并评估疾病严重程度、炎症和氧化应激标志物。

乌斯尼酸是一种水溶性有限的天然产物。它是一种黄色结晶固体，分子量为344.32 g/mol。其药代动力学性质与天然多酚类化合物相似，具有口服生物利用度和全身暴露量。

不良反应
皮肤致敏剂 - 可诱发皮肤过敏反应的物质。
小鼠皮下注射LD50：75 mg/kg，《CRC抗生素化合物手册》，第1卷，Berdy, J.，佛罗里达州博卡拉顿，CRC出版社，1980年，9(89)，1982。
小鼠静脉注射LD50：25 mg/kg，《抗生素》，1(611)，1967。
兔口服LD50：>500 mg/kg，《药物研究》，5(510)，1955 [PMID:13276269]。
解毒剂和急救措施
/SRP:/基本治疗：保持呼吸道通畅。必要时进行吸痰。注意呼吸衰竭的迹象，必要时进行辅助通气。通过无创通气面罩以 10 至 15 升/分钟的流速给予氧气。监测肺水肿，必要时进行治疗……监测休克，必要时进行治疗……预判癫痫发作，必要时进行治疗……如果眼睛受到污染，立即用水冲洗。转运过程中，持续用生理盐水冲洗每只眼睛……不要使用催吐剂。如果吞咽，漱口；如果患者可以吞咽，有强烈的咽反射，且没有流涎，则按每公斤体重 5 毫升的比例稀释到 200 毫升水中……清洁后，用干燥的无菌敷料覆盖烧伤部位……/A 类和 B 类中毒/
/SRP:/ 高级治疗：对于意识改变、严重肺水肿或呼吸骤停的患者，考虑进行口咽或鼻咽气管插管以控制气道。使用球囊面罩进行正压通气可能有效。监测心律，必要时治疗心律失常……使用5%葡萄糖溶液/SRP建立静脉通路：“保持通路畅通”，使用最小流速。如果出现低血容量的迹象，则使用乳酸林格氏液。注意液体负荷过重的迹象。考虑药物治疗肺水肿……对于伴有低血容量迹象的低血压，应谨慎输注静脉液体。注意观察体液超负荷的迹象……使用地西泮（安定）治疗癫痫发作……使用盐酸普罗米卡因辅助眼部冲洗……/毒素A和B/

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非人类毒性值
犬静脉注射LD50 40 mg/kg PMID:12453567
兔静脉注射LD50 30 mg/kg PMID:12453567
大鼠静脉注射LD50 30 mg/kg PMID:12453567
兔口服LD50 500 mg/kg

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非人类毒性值
犬静脉注射LD50 40 mg/kg
兔静脉注射LD50 30 mg/kg
大鼠静脉注射LD50 30 mg/kg
兔口服LD50 500 mg/kg
有关USNIC酸（共6种）更完整的非人类毒性数据，请访问HSDB记录页面。
据报道，乌斯尼酸可引起过敏性接触性皮炎，主要发生于林业和园艺工人以及地衣采集者等职业人群。其局部和全身用药的安全性已在多项研究中得到评估。

[1]. Effect of Usnic Acid on Osteoclastogenic Activity. J Clin Med. 2018 Oct 12;7(10). pii: E345.

7-羟基-(S)-乌斯尼酸属于苯并呋喃类化合物。据报道，它存在于地衣中，例如Dimelaena oreina、Flavoparmelia haysomii以及其他具有相关数据的生物体中。另见：(-)-乌斯尼酸（注：此处已移动）。作用机制：本研究探讨了乌斯尼酸对两种培养的地衣藻类——小球藻（Trebouxia）的生理效应。小球藻暴露于乌斯酸钠后，其生长和光合作用受到抑制，细胞膜通透性增加，游动孢子固定化。/乌斯酸钠/ 乌斯尼酸的作用机制尚不明确。研究表明，(+)-乌斯尼酸在小鼠肝线粒体中浓度为1 μM时可解偶联并进行氧化磷酸化。光合作用的抑制会刺激乌斯尼酸的积累，提示葡萄糖可能在酚类合酶的调节中发挥作用。
实验表明，地衣酸是一种抑制苔藓植物孢子萌发的化感物质，其抑制作用具有pH依赖性。
体外实验表明，地衣酸对牛多形核白细胞中白三烯的生物合成具有轻微的抑制作用。其机制是通过与特定酶相互作用，而非作为抗氧化剂对抗过氧化、清除自由基，甚至并非作为自由基的来源。

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破骨细胞是唯一能够吸收骨骼的细胞。它们在M-CSF和RANKL存在的情况下由单核细胞/巨噬细胞产生，并在体内被免疫系统激活。地衣酸是地衣的一种次生代谢产物，具有独特的二苯并呋喃骨架。多年来，它一直被用于化妆品、香水和传统药物中。地衣酸具有广泛的生物活性，包括抗炎、抗菌、抗癌和抗病毒作用。然而，尚未有关于地衣酸抗破骨细胞生成活性的报道。本研究探讨了地衣酸是否影响RANKL介导的破骨细胞生成。结果表明，地衣酸通过降低破骨细胞生成关键调控因子NFATc1的转录和翻译表达，显著抑制RANKL介导的破骨细胞形成和功能。此外，地衣酸还能预防脂多糖（LPS）诱导的小鼠骨侵蚀。综上所述，我们的研究结果表明，地衣酸可能是一种治疗骨质疏松症的潜在候选药物。[1]

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治疗应用
近期研究采用大鼠足爪水肿试验（急性效应）和棉球试验（慢性效应）比较了(+)-地衣酸和布洛芬的抗炎活性。结果显示，口服100 mg/kg的(+)-地衣酸在两项试验中均显示出显著疗效，且与相同剂量的布洛芬疗效相当。PMID:12453567
/EXPL THER:/ 研究表明，将市售的(+)-地衣酸涂覆于滤纸上，然后将滤纸置于病毒感染的非洲绿猴肾细胞（BS-C-1）上，可以抑制1型单纯疱疹病毒和1型脊髓灰质炎病毒的细胞病变效应。PMID:12453567
/EXPL THER:/ 口服30和100 mg/kg剂量的地衣酸在醋酸诱导的扭体试验和尾部挤压试验中均显示出显著的镇痛作用。口服100和300 mg/kg剂量的松萝酸在脂多糖诱导的高热模型中显示出显著的解热活性。 PMID:12453567
地衣酸抑制耐药金黄色葡萄球菌、肠球菌和分枝杆菌的生长。PMID:12061397

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地衣酸通过下调RANKL介导的ERK激活来抑制NFATc1的表达，从而发挥抗破骨细胞作用，并显著预防体内LPS诱导的骨丢失。因此，地衣酸可作为一种新型结构支架用于治疗骨质疏松症和其他骨骼疾病。[1]

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治疗用途
近期研究采用大鼠足爪水肿试验（急性效应）和棉球试验（慢性效应）比较了(+)-地衣酸和布洛芬的抗炎活性。结果显示，口服100 mg/kg剂量的(+)-地衣酸在两项试验中均显示出显著疗效，且与相同剂量的布洛芬疗效相当。
/EXPL THER:/ 研究表明，将市售的(+)-地衣酸涂覆在滤纸上，然后将其置于病毒感染的非洲绿猴肾细胞（BS-C-1）上，可以抑制1型单纯疱疹病毒（HSV-1）和1型脊髓灰质炎病毒（PPV-1）的细胞病变效应。
/EXPL THER:/ 口服30和100 mg/kg剂量的地衣酸可显著降低细胞病变效应。镇痛效果通过醋酸诱导扭体试验和尾压试验进行评估。口服100和300 mg/kg剂量的尿酸显示出显著的解热活性，该活性通过脂多糖诱导的高热试验进行评估。
地衣酸能抑制耐多药金黄色葡萄球菌、肠球菌和分枝杆菌的生长。
有关地衣酸（8种类型）治疗用途的更完整数据，请访问HSDB记录页面。
地衣酸是一种地衣代谢产物，在传统医学中有着悠久的应用历史。它是一种天然存在的二苯并呋喃衍生物，存在于多种地衣中。其具有多种生物活性，包括抗氧化、抗癌、抗真菌、抗原生动物和抗菌作用。地衣酸曾被用作外用抗生素。虽然大多数国家未批准其作为治疗药物，但它被用于膳食补充剂和化妆品中。

C18H16O7

344.31

344.089

C, 62.79; H, 4.68; O, 32.53

125-46-2

(+)-Usnic acid;7562-61-0

5646

White to yellow solid powder

1.5±0.1 g/cm3

594.8±50.0 °C at 760 mmHg

204 °C

219.1±23.6 °C

0.0±1.7 mmHg at 25°C

1.643

1.4

118

2

7

2

25

708

0

O=C(C1(C)C(OC2=C(C(C)=O)C(O)=C(C)C(O)=C12)=C3)C(C(C)=O)C3=O

CUCUKLJLRRAKFN-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C18H16O7/c1-6-14(22)12(8(3)20)16-13(15(6)23)18(4)10(25-16)5-9(21)11(7(2)19)17(18)24/h5,11,22-23H,1-4H3

2,6-diacetyl-7,9-dihydroxy-8,9b-dimethyldibenzofuran-1,3-dione

NSC-8517; 125-46-2; Usno; 1,3(2H,9bH)-Dibenzofurandione, 2,6-diacetyl-7,9-dihydroxy-8,9b-dimethyl-; usnic-acid; L-Usnic acid; NSC 8517; NSC5890; NSC 8517; Usnic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~3.33 mg/mL (~9.67 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。