| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Caspase-3
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| 细胞实验 |
Caspase-3样酶活性评估[1]
使用Z-Asp-Glu-Val-Asp-AFC(Z-DEVD-AFC)在视网膜神经细胞培养物中测量Caspase-3活性,Z-DEVD-AFC是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的细胞渗透性底物,在AFC荧光团切割时会导致荧光发生变化。 洗涤细胞,然后在4°C下在50 mM KCl、50 mM PIPES、10 mM EGTA、2 mM MgCl2、0.5%Triton X-100中裂解,并补充100μM苯甲基磺酰氟(PMSF)、1 mM二硫苏糖醇(DTT)、1μg/ml胰凝乳蛋白酶抑制剂、1μg/ml亮肽、1μg/ml抗凝剂、1μmg/ml胃蛋白酶抑制剂A,pH 7.4,在4°C。视网膜神经细胞裂解物在液氮中冷冻三次,在4°C下以15 800×g离心10分钟。收集上清液,通过Bradford/Bio Rad法测定蛋白质浓度。为了测量胱天蛋白酶活性,将20μg蛋白质与100μM DEVD-AFC在反应缓冲液(25 mM HEPES,0.1%(w/v)3-[(3-氨基丙基)二甲基铵]-1-丙烷磺酸酯(CHAPS),10 mM DTT,100μM PMSF)中在37°C下孵育30分钟。用冰冷的反应缓冲液停止反应。用Spex Fluoromax荧光分光光度计监测荧光,激发波长为420nm,发射波长为505nm,带通为5nm。Caspase-3样酶活性以相同蛋白质负载的对照百分比表示。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Diabetic retinopathy is one of the leading causes of blindness in adults in Western countries. It has been reported that diabetic retinopathy may lead to neurodegeneration, but the mechanism of retinal cell death is still unclear. We found that high glucose treatment increased the number of nuclear condensed cells and TUNEL-positive cells and led to increased translocation of phosphatidylserine to the outer layer of the plasma membrane, indicating that high glucose can induce apoptosis in cultured retinal neurons. Caspase activity was not increased in cells treated with high glucose, but the level of apoptosis-inducing factor (AIF) in mitochondria was decreased, while the level of AIF in the nucleus was increased, indicating that AIF translocation to the nucleus may lead to DNA fragmentation. These results indicate that high glucose can induce apoptosis in cultured retinal neurons. The increase in apoptosis is not dependent on caspase activation, but is mediated by the release of AIF from mitochondria. [1]
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| 分子式 |
C36H38F3N5O14
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|---|---|
| 分子量 |
821.707240581512
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| 精确质量 |
821.236
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| CAS号 |
1135416-11-3
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| PubChem CID |
25108569
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| 序列 |
zDEVD-AFC
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| 短序列 |
DEVD
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
1160.9±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
655.9±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.591
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| LogP |
4.15
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| tPSA |
293
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| 氢键供体(HBD)数目 |
8
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| 氢键受体(HBA)数目 |
17
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| 可旋转键数目(RBC) |
20
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| 重原子数目 |
58
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| 分子复杂度/Complexity |
1600
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)NC1=CC2=C(C=C1)C(=CC(=O)O2)C(F)(F)F)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)OCC3=CC=CC=C3
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| InChi Key |
JEPURZRNABGOCW-CQUCHYGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C36H38F3N5O14/c1-17(2)30(34(55)42-23(14-27(47)48)32(53)40-19-8-9-20-21(36(37,38)39)13-29(51)58-25(20)12-19)44-31(52)22(10-11-26(45)46)41-33(54)24(15-28(49)50)43-35(56)57-16-18-6-4-3-5-7-18/h3-9,12-13,17,22-24,30H,10-11,14-16H2,1-2H3,(H,40,53)(H,41,54)(H,42,55)(H,43,56)(H,44,52)(H,45,46)(H,47,48)(H,49,50)/t22-,23-,24-,30-/m0/s1
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| 化学名 |
(4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-3-carboxy-1-oxo-1-[[2-oxo-4-(trifluoromethyl)chromen-7-yl]amino]propan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-3-carboxy-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid
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| 别名 |
Z-DEVD-AFC; 1135416-11-3; (5S,8S,11S,14S)-8-(2-carboxyethyl)-5-(carboxymethyl)-11-isopropyl-3,6,9,12-tetraoxo-14-((2-oxo-4-(trifluoromethyl)-2H-chromen-7-yl)carbamoyl)-1-phenyl-2-oxa-4,7,10,13-tetraazahexadecan-16-oicacid; (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-3-Carboxy-1-oxo-1-[[2-oxo-4-(trifluoromethyl)chromen-7-yl]amino]propan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-3-carboxy-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid; Caspase 3 Apopain Substrate; SCHEMBL5888314; Fluorogenic substrate for Caspase-3;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~60.85 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2170 mL | 6.0849 mL | 12.1697 mL | |
| 5 mM | 0.2434 mL | 1.2170 mL | 2.4339 mL | |
| 10 mM | 0.1217 mL | 0.6085 mL | 1.2170 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。