| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Ca2+-activated K+ channels
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| 体外研究 (In Vitro) |
Apamin(0.5-2 µg/mL;24 小时;HSC-T6 细胞)处理显着降低 HSC-T6 细胞中 TGF-β1 诱导的 α-SMA 表达。服用 apimin 可消除 TGF-β1 产生的 p-Smad2/3 和 Smad4 的激活 [1]。
Apamin通过Smad信号通路抑制HSC的激活[1] TGF-β1是Smad家族成员,已知可刺激HSC的激活。接下来,我们研究了apamin对TGF-β1激活HSC的抑制作用是否是通过Smad信号通路实现的。TGF-β1可增加HSC-T6细胞中α-SMA和I型胶原的表达,而apamin处理可降低其表达(图7A)。此外,免疫荧光显示TGF-β1通过增加α-SMA表达诱导HSC-T6细胞活化(图7C)。然而,apamin治疗显著降低了TGF-β1诱导的HSC-T6细胞中α-SMA的表达。Western blot分析显示,2ng/ml TGF-β1刺激Smad2/3和Smad4的磷酸化(图7B)。阿帕明治疗消除了TGF-β1诱导的p-Smad2/3和Smad4的激活。这些结果表明,apamin可能通过抑制Smad信号通路来减弱TGF-β1激活的HSC。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Apamin(0.1 mg/kg;腹腔注射;每周两次;持续 4 周;C57BL/6 雄性小鼠)治疗可减少肝损伤和促炎细胞因子水平。 Apamin 可减少 3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可啶 (DDC) 喂养动物的胶原蛋白沉积、BEC 增殖和纤维化基因表达 [1]。
Apamin改善肝损伤和炎症性肝损伤[1] 为了研究阿帕明治疗对肝纤维化的影响,使用DDC饮食喂养诱导的小鼠模型。当用DDC饮食挑战4周时,NC组的肝小叶结构清晰(图1A),DDC喂养组有大量胆管增殖,伴有炎性细胞浸润,如H&E染色所示(图1C)。此外,与DDC喂养组相比,apamin治疗组的上述病理变化有所减少(图1D)。Masson三色染色显示DDC喂养组增殖胆管周围有胶原沉积(图2C)。相比之下,阿帕明治疗导致纤维化和胶原沉积减少(图2D)。 在胆道疾病中,胆管的炎症和反应性增殖与胆管纤维化的发展密切相关。ELISA和蛋白质印迹分析表明,与NC组相比,DDC喂养组的IL-6、IFN-γ、TNF-α和IL-1β的表达水平显著升高(图3)。然而,与DDC喂养组相比,apamin治疗减弱了炎症细胞因子的表达,包括IL-6、IFN-γ、TNF-α和IL-1β。综上所述,这些数据证实了apamin对DDC喂养的小鼠的抗炎和中度抗纤维化作用。 Apamin对DDC喂养小鼠BEC增殖的影响[1] 接下来,我们通过CK19表达的免疫荧光法确定了apamin对DDC喂养小鼠导管反应的影响。先前已证明,小鼠慢性DDC喂养会导致胆管炎和针对BEC的免疫反应,并破坏胆管和小导管(18)。CK19被认为是胆汁上皮细胞的标志(19)。免疫荧光染色显示,CK19在扩大的门静脉束胆管中的BEC中高度表达(图4)。与NC组相比,DDC喂养组CK19的表达显著增加。相比之下,阿帕明治疗显著降低了胆管的活化和增殖,CK19染色证明了这一点,表明胆管反应存在缺陷。此外,PCNA的免疫荧光染色显示,与DDC喂养组相比,apamin治疗抑制了BECs的增殖。这些结果表明,apamin可能通过抑制DDC饮食诱导的BEC增殖和导管反应来抑制胆汁淤积性肝纤维化。 Apamin抑制DDC喂养小鼠肝脏中的ECM沉积[1] 为了研究apamin对DDC喂养小鼠ECM沉积的抗纤维化作用,我们使用蛋白质印迹分析、免疫组织化学和免疫荧光分析来确定该化合物对ECM分子的影响。DDC诱导的肝纤维化通过诱导纤维化基因、FSP-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原的表达得到证实。在DDC喂养组中,α-SMA在增殖胆管周围的肌成纤维细胞和HSC中强烈表达,在apamin治疗组中表达明显(图5)。此外,DDC喂养组中I型胶原的表达显著增加,尤其是在门静脉束中。与DDC组相比,apamin治疗抑制了I型胶原的表达。在肝纤维化的组织重塑过程中,FSP-1被认为是纤维化肝脏中成纤维细胞的标志物。DDC喂养增加了FSP-1表达阳性的细胞数量(图6C)。相比之下,apamin治疗导致FSP-1阳性细胞减少(图6D)。此外,蛋白质印迹结果显示,与DDC喂养组相比,DDC喂养组TGF-β1、I型胶原和纤维连接蛋白的表达水平显著升高,而apamin治疗显著降低了TGF-β1,I型胶原以及纤维连接蛋白水平(图6F)。综上所述,这些数据表明,apamin可能通过抑制纤维化基因表达来保护DDC喂养期间的肝纤维化。 |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型: HSC-T6 细胞 测试浓度: 0.5 µg/mL、1 µg/mL 和 2 µg/mL 孵育持续时间:24小时 实验结果:TGF-β1诱导的HSC-中α-SMA的表达显着减少T6细胞。消除 TGF-β1 诱导的 p-Smad2/3 和 Smad4 激活。 HSC-T6细胞是一种永生化的大鼠肝星状细胞系,具有稳定的表型和生化特征,由S.L.Friedman博士提供。细胞在37°C的加湿培养箱中,在5%的CO2气氛下培养。将HSC-T6细胞接种在完全培养基中24小时。将细胞换成含有指定浓度Apamin(0.5、1和2µg/ml)的新鲜无血清培养基。24小时后,用含有2ng/ml TGF-β1的新鲜无血清培养基替换细胞24小时[1]。 |
| 动物实验 |
Animal/Disease Models: 8weeks old C57BL/6 male mice (20-25g), fed with DDC [1]
Doses: 0.1mg/kg Route of Administration: intraperitoneal (ip) injection; twice a week; for 4 weeks Experimental Results: Caused liver damage and Proinflammatory cytokine levels are diminished. Inhibited collagen deposition, BEC proliferation, and fibrogenesis gene expression in DDC-fed mice. DDC-induced mouse model of biliary fibrosis [1] For induction of liver injury, 8-week-old C57BL/6 male mice (20–25 g) were selected. Male C57BL/6 mice were fed a control diet or a DDC supplemented diet (0.1%) for 4 weeks to induce advanced biliary fibrosis as previously described. The mice received an intraperitoneal injection of Apamin (0.1 mg/kg) dissolved in saline twice a week. Mice were sacrificed after 4 weeks from the first DDC diet administration. Apamin was dissolved in 4 mM HCl containing 0.1% bovine serum albumin (BSA). |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
16133797 小鼠腹腔注射 LD50 3800 ug/kg Toxicon., 22(308), 1984 [PMID:6145236]
16133797 小鼠皮下注射 LD50 2900 ug/kg 行为:共济失调 European Journal of Biochemistry., 56(35), 1975 [PMID:1175625] 16133797 小鼠静脉注射 LD50 4 mg/kg 行为:兴奋;行为学:运动活性变化(特异性检测)《瑙恩-施米德贝格药理学文献》,300(189),1977 [PMID:593441] 16133797 小鼠脑内注射LD50 1800 ng/kg 《毒素》,22(308),1984 [PMID:6145236] 16133797 小鼠肠外注射LD50 600 mg/kg 《毒素》,20(157),1982 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
蜜蜂(Apis mellifera)毒液中的一种高神经毒性多肽。它由18个氨基酸组成,含有两个二硫键,可引起过度兴奋,导致抽搐和呼吸麻痹。胆汁淤积性肝病以胆管上皮细胞(BECs)进行性破坏为特征,随后发展为纤维化、肝硬化和肝功能衰竭。活化的肝星状细胞(HSCs)和门静脉成纤维细胞是胆汁纤维化中胶原沉积增强的主要细胞效应因子。蜂毒素(蜜蜂毒液)中的一种18个氨基酸肽神经毒素——蜂毒素,已知其可阻断Ca2+激活的K+通道,并抑制四氯化碳诱导的肝纤维化。本研究旨在确定蜂毒素是否抑制胆汁纤维化和HSCs的增殖。本研究采用3,5-二乙氧羰基-1,4-二氢吡啶(DDC)喂养小鼠建立胆汁淤积性肝纤维化模型。利用HSC-T6细胞(大鼠永生化肝星状细胞)进行细胞学分析。DDC喂养导致肝损伤加重和促炎细胞因子水平升高。值得注意的是,阿帕明治疗可减轻肝损伤并降低促炎细胞因子水平。此外,阿帕明抑制了DDC喂养小鼠的胶原沉积、胆管上皮细胞(BEC)增殖以及纤维化相关基因的表达。在肝星状细胞中,阿帕明通过抑制Smad信号通路抑制了肝星状细胞的活化。这些数据表明,阿帕明可能是胆汁淤积性肝病的潜在治疗靶点。[1]
本研究的主要发现是阿帕明的抗纤维化作用。阿帕明抑制了胆管上皮细胞的增殖和肝星状细胞的活化。在本研究中,阿帕明显著抑制了DDC喂养小鼠的胆管增殖并减少了细胞外基质(ECM)沉积。此外,阿帕明抑制了TGF-β1诱导的肝星状细胞(HSC)中p-Smad2/3和Smad4的蛋白表达。这些结果表明,阿帕明通过抑制肝纤维化中的TGF-β1信号通路来抑制胆管上皮细胞(BEC)增殖和肝星状细胞(HSC)活化。[1] |
| 分子式 |
C79H131N31O24S4
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|---|---|
| 分子量 |
2027.34000
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| 精确质量 |
2025.886
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| CAS号 |
24345-16-2
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| 相关CAS号 |
Apamin TFA
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| PubChem CID |
16133797
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| 序列 |
Cys-Asn-Cys-Lys-Ala-Pro-Glu-Thr-Ala-Leu-Cys-Ala-Arg-Arg-Cys-Gln-Gln-His-NH2 (Disulfide bridge: Cys1-Cys11;Cys3-Cys15); H-Cys(1)-Asn-Cys(2)-Lys-Ala-Pro-Glu-Thr-Ala-Leu-Cys(1)-Ala-Arg-Arg-Cys(2)-Gln-Gln-His-NH2; L-cysteinyl-L-asparagyl-L-cysteinyl-L-lysyl-L-alanyl-L-prolyl-L-alpha-glutamyl-L-threonyl-L-alanyl-L-leucyl-L-cysteinyl-L-alanyl-L-arginyl-L-arginyl-L-cysteinyl-L-glutaminyl-L-glutaminyl-L-histidinamide (1->11),(3->15)-bis(disulfide)
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| 短序列 |
CNCKAPETALCARRCQQH; CNCKAPETALCARRCQQH-NH2 (Disulfide bridge: Cys1-Cys11;Cys3-Cys15)
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.724
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| LogP |
-14.24
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| tPSA |
1021.52
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| 氢键供体(HBD)数目 |
31
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| 氢键受体(HBA)数目 |
33
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| 可旋转键数目(RBC) |
37
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| 重原子数目 |
138
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| 分子复杂度/Complexity |
4320
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| 定义原子立体中心数目 |
19
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| SMILES |
C[C@H]1C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N2)CC(=O)N)N)C(=O)N1)CC(C)C)C)[C@@H](C)O)CCC(=O)O)C)CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC4=CNC=N4)C(=O)N)CCCNC(=N)N)CCCNC(=N)N
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| InChi Key |
YVIIHEKJCKCXOB-STYWVVQQSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C79H131N31O24S4/c1-35(2)26-49-70(127)107-51-31-136-135-30-41(81)63(120)105-50(28-57(84)114)71(128)108-53(73(130)99-42(12-7-8-22-80)64(121)96-38(5)77(134)110-25-11-15-54(110)75(132)102-47(18-21-58(115)116)69(126)109-59(39(6)111)76(133)95-37(4)62(119)104-49)33-138-137-32-52(106-66(123)44(14-10-24-92-79(88)89)98-65(122)43(13-9-23-91-78(86)87)97-61(118)36(3)94-72(51)129)74(131)101-45(16-19-55(82)112)67(124)100-46(17-20-56(83)113)68(125)103-48(60(85)117)27-40-29-90-34-93-40/h29,34-39,41-54,59,111H,7-28,30-33,80-81H2,1-6H3,(H2,82,112)(H2,83,113)(H2,84,114)(H2,85,117)(H,90,93)(H,94,129)(H,95,133)(H,96,121)(H,97,118)(H,98,122)(H,99,130)(H,100,124)(H,101,131)(H,102,132)(H,103,125)(H,104,119)(H,105,120)(H,106,123)(H,107,127)(H,108,128)(H,109,126)(H,115,116)(H4,86,87,91)(H4,88,89,92)/t36-,37-,38-,39+,41-,42-,43-,44-,45-,46-,47-,48-,49-,50-,51-,52-,53-,54-,59-/m0/s1
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| 化学名 |
3-[(1R,4S,7S,13S,16S,19S,22S,25S,28R,31S,34S,37S,40R,47S,50R)-50-amino-40-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]carbamoyl]-4-(4-aminobutyl)-47-(2-amino-2-oxoethyl)-34,37-bis(3-carbamimidamidopropyl)-19-[(1R)-1-hydroxyethyl]-7,22,31-trimethyl-25-(2-methylpropyl)-2,5,8,14,17,20,23,26,29,32,35,38,46,49-tetradecaoxo-42,43,52,53-tetrathia-3,6,9,15,18,21,24,27,30,33,36,39,45,48-tetradecazatricyclo[26.16.10.09,13]tetrapentacontan-16-yl]propanoic acid
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| 别名 |
Apamin; 24345-16-2; UNII-X644P85KUR; EINECS 246-182-7; Ro 23-6721; Apamine; X644P85KUR; DTXSID70897227;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~49.33 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.4933 mL | 2.4663 mL | 4.9326 mL | |
| 5 mM | 0.0987 mL | 0.4933 mL | 0.9865 mL | |
| 10 mM | 0.0493 mL | 0.2466 mL | 0.4933 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。