| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
VEGFR2 (IC50 = 1 nM); RET (IC50 = 13 nM)
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- 抑制20 ng/mL VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖，IC50为0.17 μM，对20% FBS刺激的HUVECs有轻度抑制作用，IC50为23.4 μM。在1 μM浓度下可显著抑制FBS诱导的HUVECs迁移，且不影响细胞增殖[1]
- 通过VEGFR2/STAT3/BCL - 2信号通路促进骨肉瘤细胞自噬和凋亡。采用蛋白质印迹法检测相关信号分子的蛋白表达水平，流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡率[2] - 通过抑制多种ATP结合盒转运蛋白的外排功能逆转多药耐药。增加多药耐药细胞内化疗药物的蓄积，通过检测细胞内药物浓度和细胞活力验证效果[3] - 增强传统化疗药物对侧群细胞和ABCB1过表达白血病细胞的疗效。提高这些细胞对化疗药物的敏感性，联合使用可更显著地抑制细胞增殖并促进细胞凋亡，通过MTT法和流式细胞术检测[4] 体外活性：阿帕替尼是一种有效的、口服生物可利用的选择性 VEGF（血管内皮生长因子受体）信号通路抑制剂，对 VEGFR2 的 IC50 为 1 nM。它具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。阿帕替尼有效抑制 VEGFR-2、c-kit 和 c-src 的激酶活性，并抑制 VEGFR-2、c-kit 和 PDGFRβ 的细胞磷酸化。阿帕替尼有效抑制FBS诱导的人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环的出芽。阿帕替尼的 I 期研究显示出令人鼓舞的抗肿瘤活性和可控的毒性特征。这些发现表明阿帕替尼有望成为一种抗肿瘤药物，并可能具有临床益处。阿帕替尼有效抑制FBS诱导的人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环的出芽。阿帕替尼通过抑制 ABCB1 和 ABCG2 的转运功能来逆转 ABCB1 和 ABCG2 介导的 MDR，但不是通过阻断 AKT 或 ERK1/2 通路或下调 ABCB1 或 ABCG2 表达来逆转。阿帕替尼显着增强已建立的 ABCB1 和 ABCG2 底物的细胞毒性，并增加 ABCB1 或 ABCG2 过表达细胞中 DOX 和 Rho 123 的积累。此外，阿帕替尼以浓度依赖性方式显着抑制[125I]碘芳基叠氮哌唑嗪对ABCB1和ABCG2的光亲和标记。激酶测定：阿帕替尼 (YN968D1) 是一种新型口服生物可利用的选择性抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。阿帕替尼选择性结合并抑制 VEGFR2。 Apatinib 还可以有效抑制 Ret、c-kit 和 c-src 的活性，IC50 分别为 0.013 μM、0.429 μM 和 0.53 μM。阿帕替尼抑制 VEGFR-2、c-kit 和 PDGFRβ 的细胞磷酸化。阿帕替尼显着抑制 20 ng/mL VEGF 刺激的增殖（IC50 = 0.17μM）。细胞测定：在 HUVEC 中，阿帕替尼以浓度依赖性方式降低 VEGF 刺激的 VEGFR-2 KDR 磷酸化。它还在 0.1 μM 浓度下完全抑制 VEGFR-2 激活。此外，阿帕替尼以浓度依赖性方式分别消除用相关配体刺激的 Mo7e 和 NIH-3T3 细胞中 c-kit 和 PDGFRb 的磷酸化。此外，阿帕替尼在体外抑制 HUVEC 的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环出芽。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在免疫缺陷小鼠的六种人肿瘤异种移植模型中呈剂量依赖性抗肿瘤作用。口服阿帕替尼可抑制肿瘤生长，在每天50 mg/kg的剂量下，可在五种测试肿瘤异种移植物中的三种中观察到显著的生长抑制。在每天100 mg/kg的剂量下，所有肿瘤异种移植物均受到显著抑制，在每天200 mg/kg的剂量下，肿瘤生长抑制率为8% - 18%，并可在三种异种移植物中观察到完全生长抑制[1]
在体内，阿帕替尼单独使用以及与化疗药物联合使用可有效抑制多种已建立的人类肿瘤异种移植模型的生长，且毒性很小。阿帕替尼以显着的剂量依赖性方式抑制多种人类肿瘤异种移植物的生长。阿帕替尼在裸鼠异种移植模型中逆转 ABCB1 介导的 MDR。阿帕替尼显着增强多柔比星在携带 K562/ADR 异种移植物的裸鼠中的抗肿瘤活性。 阿帕替尼在体内具有有效的肿瘤生长抑制作用。与对照组相比，肿瘤体积减小（图7a和b）。根据体外实验，图7c显示阿帕替尼治疗增加了LC3-II和Bax的水平，而体内BCL-2和VEGFR2的水平降低。免疫组织化学显示，阿帕替尼降低了KHOS细胞形成的肿瘤中VEGFR2、p-STAT3和BCL-2的表达（图7d）。所有结果均表明，阿帕替尼在体内抑制骨肉瘤的生长[2]。 |
| 酶活实验 |
- 对于VEGFR - 2酪氨酸激酶，进行激酶活性实验。反应体系包含VEGFR - 2、ATP和底物肽，加入不同浓度的阿帕替尼，孵育后通过蛋白质印迹法或ELISA等方法检测底物的磷酸化水平，进而评估阿帕替尼对VEGFR - 2激酶活性的抑制作用，根据抑制率和浓度关系计算IC50值[1]
- 对于Ret、c - Kit和c - Src，进行类似的激酶活性实验，使用相应的激酶、ATP和特异性底物，采用相同的检测和计算方法得出其IC50值[1] 酶联免疫吸附试验。[1] YN968D1对酪氨酸激酶的抑制活性使用之前描述的ELISA方法测定。VEGFR-2和PDGFR是商业购买的；Her-2、c-kit和c-src是由巴氏杆菌杆状病毒表达载体系统表达并经Ni-NTA旋转柱纯化的活化细胞内蛋白酪氨酸激酶。使用VERSAmax在490nm处测量光密度。抑制活性以IC50表示，IC50是通过Logit方法从三个独立的实验中计算出来的。[1] |
| 细胞实验 |
- 将HUVECs接种于培养板中，加入含VEGF或FBS的培养基，再加入不同浓度的阿帕替尼，孵育一定时间后，通过MTT法检测细胞增殖，transwell实验检测细胞迁移[1]
- 培养骨肉瘤细胞，加入阿帕替尼，孵育一段时间。利用蛋白质印迹法检测VEGFR2、STAT3、BCL - 2等相关分子的蛋白表达，经Annexin V - FITC/PI双染后流式细胞术检测凋亡[2] - 培养多药耐药细胞，加入阿帕替尼，并与化疗药物共培养。通过荧光检测法检测细胞内化疗药物浓度，MTT法检测细胞活力[3] - 培养侧群细胞和ABCB1过表达白血病细胞，加入阿帕替尼联合化疗药物，MTT法检测细胞增殖，经Annexin V - FITC/PI双染后流式细胞术检测凋亡[4] 如前所述，CCK8测定用于评估细胞存活率。40实验前一天，在96孔板上每孔接种5000个细胞。在指定条件下用阿帕替尼孵育细胞。[2] 细胞凋亡分析和细胞周期：对于细胞周期分析，细胞在-20°C下用70%乙醇固定过夜，并用碘化丙啶染色。对于细胞凋亡分析，根据制造商的解释，用Annexin V/FITC试剂盒对细胞进行染色，并在阿帕替尼治疗后通过流式细胞术进行分析。[2] |
| 动物实验 |
将阿帕替尼溶解于合适的溶剂中，并以口服方式给予携带人源肿瘤异种移植瘤的免疫缺陷小鼠。剂量分别为每日 50 mg/kg、100 mg/kg 和 200 mg/kg。每日给药一次，并定期测量肿瘤体积，同时监测小鼠体重。[1]
裸鼠人源肿瘤异种移植瘤模型。本研究测试了阿帕替尼 (YN968D1) 对皮下接种于 BALB/cA 裸鼠体内的各种人源肿瘤生长的影响。通过皮下接种细胞诱导小鼠肿瘤生长。待肿瘤形成并生长至 100–300 mm³ 后，将小鼠随机分组。YN968D1 每日灌胃一次，持续给药指定时间（表 1）。在联合治疗实验中，小鼠分别接受以下给药方案：单独灌胃给予YN968D1；单独静脉注射给予5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂、多西他赛和阿霉素；或将YN968D1与每种细胞毒性药物联合给药，剂量和给药方案见表2。每隔一天或每三天监测一次肿瘤体积和体重，结果以每组6只（治疗组）或12只（载体对照组）动物的平均值表示。肿瘤体积通过测量最大直径（a）及其垂直距离（b）并根据公式(a × b²)/2计算得出。抑制效果的评价指标为相对肿瘤生长率，计算公式为：T/C (%) = 治疗组肿瘤体积平均增加值/对照组肿瘤体积平均增加值 × 100%。[1] 将 2 × 10⁶ 个 KHOS 细胞皮下注射到 4～6 周龄的 BALB/c 裸鼠右侧腹部。小鼠饲养于无特定病原体（SPF）条件下，待肿瘤出现可触及肿块后，随机分为两组，分别每日口服给予 DMSO 或阿帕替尼 50 mg/kg，连续 30 天。每隔一天测量一次肿瘤大小，持续 4 天。肿瘤体积计算方法为（长 × 宽²/2）。治疗结束后第 13 天处死小鼠。取肿瘤样本进行蛋白质印迹和免疫组化分析。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收：口服后吸收迅速，约1.7～2.3小时达到血浆峰浓度。
- 分布：广泛分布于组织中。 - 代谢：主要在肝脏代谢，细胞色素P450酶系统（如CYP3A4）参与代谢过程[6]。 - 消除：消除半衰期约为8～9小时，主要经粪便和尿液排泄。 |
| 参考文献 |
1218779-89-5
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| 分子式 |
C24H24CLN5OMOLECULARWEIGHT
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|---|---|
| 分子量 |
623.78300
|
| 精确质量 |
623.368
|
| 元素分析 |
C, 66.43; H, 5.57; Cl, 8.17; N, 16.14; O, 3.69
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| CAS号 |
1218779-89-5
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| 相关CAS号 |
1218779-89-5 (HCl);1218779-75-9 (mesylate);811803-05-1;
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| PubChem CID |
45136888
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
3.832
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| tPSA |
149.31
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
608
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCC(CCCCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC2=CN(OC)C3=CC=CC=C23)C(=O)NC(C(CC)C)C(=O)N2CCCC[C@]2([H])C(=O)N1)=O
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| InChi Key |
YJFMYZMORFXPKW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H23N5O.ClH/c25-17-24(11-1-2-12-24)19-5-7-20(8-6-19)29-23(30)21-4-3-13-27-22(21)28-16-18-9-14-26-15-10-18/h3-10,13-15H,1-2,11-12,16H2,(H,27,28)(H,29,30)1H
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| 化学名 |
N-(4-(1-Cyanocyclopentyl)phenyl)-2-((pyridin-4-ylmethyl)amino)nicotinamide hydrochloride
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| 别名 |
1218779-89-5; YN968D1 Hydrochloride; N-[4-(1-cyanocyclopentyl)phenyl]-2-(pyridin-4-ylmethylamino)pyridine-3-carboxamide;hydrochloride; N-[4-(1-Cyanocyclopentyl)phenyl]-2-{[(pyridin-4-yl)methyl]amino}pyridine-3-carboxamide hydrogen chloride (1:1); N-(4-(1-Cyanocyclopentyl)phenyl)-2-((pyridin-4-ylmethyl)amino)nicotinamide hydrochloride; DTXSID70659600
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6031 mL | 8.0156 mL | 16.0313 mL | |
| 5 mM | 0.3206 mL | 1.6031 mL | 3.2063 mL | |
| 10 mM | 0.1603 mL | 0.8016 mL | 1.6031 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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