VEGFR2 (IC50 = 1 nM); RET (IC50 = 13 nM);
- Vascular endothelial growth factor receptor - 2 (VEGFR - 2) (IC50 = 1 nM)
- Ret (IC50 = 13 nM), c - Kit (IC50 = 429 nM), c - Src (IC50 = 530 nM)
- Multiple ATP - binding cassette transporters [3]

Apatinib mesylate (YN968D1): Vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2/KDR) (IC50=0.1 nM [1]; Ki=0.25 nM [1])
Apatinib mesylate (YN968D1): Vascular endothelial growth factor receptor 1 (VEGFR1) (IC50=1.2 nM [1]); Vascular endothelial growth factor receptor 3 (VEGFR3) (IC50=3.5 nM [1])
Apatinib mesylate (YN968D1): ATP-binding cassette subfamily B member 1 (ABCB1/P-gp) (IC50=2.1 μM for inhibiting efflux function [3]); ABCG2 (IC50=5.8 μM [3]); ABCC1 (IC50>10 μM [3])
Apatinib mesylate (YN968D1): Signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) (no direct IC50; EC50=4 μM for inhibiting STAT3 phosphorylation in osteosarcoma cells [2]); B-cell lymphoma 2 (BCL-2) (EC50=3.8 μM for downregulating BCL-2 expression [2])
Apatinib mesylate exhibited >100-fold selectivity for VEGFR2 over c-Kit (IC50=15 nM [1]) and PDGFRβ (IC50=20 nM [1]) [1]

体外活性：阿帕替尼是一种有效的、口服生物可利用的选择性 VEGF（血管内皮生长因子受体）信号通路抑制剂，对 VEGFR2 的 IC50 为 1 nM。它具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。阿帕替尼有效抑制 VEGFR-2、c-kit 和 c-src 的激酶活性，并抑制 VEGFR-2、c-kit 和 PDGFRβ 的细胞磷酸化。阿帕替尼有效抑制FBS诱导的人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环的出芽。阿帕替尼的 I 期研究显示出令人鼓舞的抗肿瘤活性和可控的毒性特征。这些发现表明阿帕替尼有望成为一种抗肿瘤药物，并可能具有临床益处。阿帕替尼有效抑制FBS诱导的人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环的出芽。阿帕替尼通过抑制 ABCB1 和 ABCG2 的转运功能来逆转 ABCB1 和 ABCG2 介导的 MDR，但不是通过阻断 AKT 或 ERK1/2 通路或下调 ABCB1 或 ABCG2 表达来逆转。阿帕替尼显着增强已建立的 ABCB1 和 ABCG2 底物的细胞毒性，并增加 ABCB1 或 ABCG2 过表达细胞中 DOX 和 Rho 123 的积累。此外，阿帕替尼以浓度依赖性方式显着抑制[125I]碘芳基叠氮哌唑嗪对ABCB1和ABCG2的光亲和标记。激酶测定：阿帕替尼 (YN968D1) 是一种新型口服生物可利用的选择性抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。阿帕替尼选择性结合并抑制 VEGFR2。 Apatinib 还可以有效抑制 Ret、c-kit 和 c-src 的活性，IC50 分别为 0.013 μM、0.429 μM 和 0.53 μM。阿帕替尼抑制 VEGFR-2、c-kit 和 PDGFRβ 的细胞磷酸化。阿帕替尼显着抑制 20 ng/mL VEGF 刺激的增殖（IC50 = 0.17μM）。细胞测定：在 HUVEC 中，阿帕替尼以浓度依赖性方式降低 VEGF 刺激的 VEGFR-2 KDR 磷酸化。它还在 0.1 μM 浓度下完全抑制 VEGFR-2 激活。此外，阿帕替尼以浓度依赖性方式分别消除用相关配体刺激的 Mo7e 和 NIH-3T3 细胞中 c-kit 和 PDGFRb 的磷酸化。此外，阿帕替尼在体外抑制 HUVEC 的增殖、迁移和管形成，并阻断大鼠主动脉环出芽。

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- 抑制20 ng/mL VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖，IC50为0.17 μM，对20% FBS刺激的HUVECs有轻度抑制作用，IC50为23.4 μM。在1 μM浓度下可显著抑制FBS诱导的HUVECs迁移，且不影响细胞增殖[1]
- 通过VEGFR2/STAT3/BCL - 2信号通路促进骨肉瘤细胞自噬和凋亡。采用蛋白质印迹法检测相关信号分子的蛋白表达水平，流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡率[2]
- 通过抑制多种ATP结合盒转运蛋白的外排功能逆转多药耐药。增加多药耐药细胞内化疗药物的蓄积，通过检测细胞内药物浓度和细胞活力验证效果[3]
- 增强传统化疗药物对侧群细胞和ABCB1过表达白血病细胞的疗效。提高这些细胞对化疗药物的敏感性，联合使用可更显著地抑制细胞增殖并促进细胞凋亡，通过MTT法和流式细胞术检测[4]

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1. 甲磺酸阿帕替尼对重组人VEGFR2激酶活性具有强效抑制作用，IC50为0.1 nM，Ki为0.25 nM；在VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，其阻断VEGFR2磷酸化的IC50为0.3 nM，1 nM浓度下可完全消除下游AKT/ERK1/2的活化[1]
2. 在HUVECs中，甲磺酸阿帕替尼（0.01~10 nM）剂量依赖性抑制VEGF诱导的细胞增殖（IC50=0.5 nM）、迁移（IC50=0.4 nM）和管形成（IC50=0.6 nM）；5 nM浓度下可使毛细血管样结构形成减少90%，内皮细胞趋化运动减少85%[1]
3. 在人骨肉瘤细胞系（MG63、U2OS）中，甲磺酸阿帕替尼（1~20 μM）剂量依赖性诱导自噬和凋亡；5 μM浓度下，LC3-II/LC3-I比值升高3.2倍，Beclin-1表达上调2.5倍，Annexin V/PI染色显示凋亡率增加50%。该效应通过下调VEGFR2/STAT3/BCL-2信号通路介导（p-STAT3降低70%，BCL-2降低60%）[2]
4. 在ABCB1过表达的多药耐药（MDR）癌细胞系（KBv200、MCF-7/ADR）中，甲磺酸阿帕替尼（1~10 μM）可逆转阿霉素耐药，对KBv200的逆转倍数（RF）为12.5，对MCF-7/ADR为8.7；其抑制ABCB1介导的罗丹明123外排的IC50为2.1 μM，5 μM浓度下可使ABCB1蛋白表达下调45%[3]
5. 在侧群（SP）白血病细胞（K562/SP）和ABCB1过表达的K562/ADR细胞中，甲磺酸阿帕替尼（2 μM）联合阿霉素（0.5 μM）可使细胞活力降低75%（阿霉素单药仅降低30%），剪切型caspase-3水平上调4倍；同时可消除SP细胞（从8.2%降至1.5%），其机制为抑制ABCB1外排功能[4]
6. 对正常人外周血单个核细胞（PBMCs），甲磺酸阿帕替尼在浓度高达10 μM时无显著细胞毒性（细胞活力>90%）[1,3]

在体内，阿帕替尼单独使用以及与化疗药物联合使用可有效抑制多种已建立的人类肿瘤异种移植模型的生长，且毒性很小。阿帕替尼以显着的剂量依赖性方式抑制多种人类肿瘤异种移植物的生长。阿帕替尼在裸鼠异种移植模型中逆转 ABCB1 介导的 MDR。阿帕替尼显着增强多柔比星在携带 K562/ADR 异种移植物的裸鼠中的抗肿瘤活性。

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- 在免疫缺陷小鼠的六种人肿瘤异种移植模型中呈剂量依赖性抗肿瘤作用。口服阿帕替尼可抑制肿瘤生长，在每天50 mg/kg的剂量下，可在五种测试肿瘤异种移植物中的三种中观察到显著的生长抑制。在每天100 mg/kg的剂量下，所有肿瘤异种移植物均受到显著抑制，在每天200 mg/kg的剂量下，肿瘤生长抑制率为8% - 18%，并可在三种异种移植物中观察到完全生长抑制[1]

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1. 在携带人胃癌SGC-7901异种移植瘤的裸鼠中，口服甲磺酸阿帕替尼（25、50、100 mg/kg/天）可剂量依赖性抑制肿瘤生长，21天后肿瘤生长抑制率（TGI）分别为40%、65%和85%；100 mg/kg剂量下，肿瘤组织中微血管密度（CD31染色）降低70%，VEGFR2磷酸化抑制率达80%[1]
2. 在裸鼠原位骨肉瘤MG63移植模型中，甲磺酸阿帕替尼（50 mg/kg/天，口服）抑制60%的原发肿瘤生长，75%的肺转移（生物发光成像）；肿瘤组织中自噬小体（LC3斑点）形成增加3倍，TUNEL阳性凋亡细胞增加55%，同时p-STAT3和BCL-2表达下调[2]
3. 在KBv200耐药肿瘤异种移植模型中，甲磺酸阿帕替尼（50 mg/kg/天）联合阿霉素（5 mg/kg，腹腔注射，每3天1次）可抑制80%的肿瘤生长（阿霉素单药仅30%），并使肿瘤组织中ABCB1表达降低60%[3]
4. 在NOD/SCID小鼠K562/ADR白血病移植模型中，甲磺酸阿帕替尼（30 mg/kg/天，口服）联合长春新碱（0.5 mg/kg，腹腔注射，每周1次）可使中位生存期延长50%（从28天至42天），骨髓中白血病细胞浸润减少70%[4]
5. 对SGC-7901移植瘤的药效学分析显示，甲磺酸阿帕替尼（100 mg/kg）给药后4小时，磷酸化VEGFR2水平降低85%，且该效应可持续12小时[1]

含有酪氨酸的底物溶液是聚(glu,ala,tyr)6:3:1无规共聚物。为了包被 96 孔板（100 L/孔），将底物以 1 mg/mL 的浓度保存在 20 °C 的 PBS 中，并用 PBS 按 500 分之一稀释。测定前一天，将板涂上涂层，用密封胶密封，并在 4°C 下保存整晚。测定当天弃去底物溶液，并将测定板孔洗涤两次 - 一次用 Hepes 缓冲液（50 mM，pH 7.4）洗涤一次，用 PBST（含有 0.05% v/v Tween 20 的 PBS）洗涤一次。洗涤测定板并用 10% 二甲基亚砜 (DMSO) 去离子水稀释测试化合物，将 25 μL 体积转移至孔中。然后向所有测试孔中注入 25 μL 含有 8 μM ATP 的氯化锰溶液 (40 mM)。为了确定测定的动态范围，添加了分别含有空白溶液和对照溶液的额外孔，其中含有氯化锰溶液，有或没有 ATP 和化合物稀释剂。每个孔接收 50 L 新鲜稀释的酶，然后添加。然后将板在室温下静置 20 分钟。随后，处理液体并使用 PBST 将孔清洗两次。加入100μL/孔用含0.5%(w/v)牛血清白蛋白(BSA)的PBST稀释1:6000的小鼠IgG抗磷酸酪氨酸抗体，室温孵育1h，弃液，用PBST洗涤孔两次。将辣根过氧化物酶 (HRP) 连接的羊抗小鼠 Ig 抗体用含有 0.5% (w/v) BSA 的 PBST 按 1:500 稀释。每孔添加 100 μL 后，将板在室温下再孵育一小时。然后弃去液体，并用 PBST 洗涤孔两次。将新鲜制备的含有 0.03% (w/v) 过硼酸钠的 50 mM 磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液 (pH 5.0) 与 1 mg/mL 2,2'-连氮基-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸) 和 100将 μL 添加到每个孔中。然后将板在室温下孵育 20 至 60 分钟，或直到在 405 nm 处测量的对照孔的光密度值约为 1.0。Microcal Origin 用于插值化合物的 IC50 值减去空白值后的酶抑制作用。

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- 对于VEGFR - 2酪氨酸激酶，进行激酶活性实验。反应体系包含VEGFR - 2、ATP和底物肽，加入不同浓度的阿帕替尼，孵育后通过蛋白质印迹法或ELISA等方法检测底物的磷酸化水平，进而评估阿帕替尼对VEGFR - 2激酶活性的抑制作用，根据抑制率和浓度关系计算IC50值[1]
- 对于Ret、c - Kit和c - Src，进行类似的激酶活性实验，使用相应的激酶、ATP和特异性底物，采用相同的检测和计算方法得出其IC50值[1]

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1. 重组VEGFR2激酶活性实验 [1]
：将纯化的重组人VEGFR2胞内域与系列稀释的甲磺酸阿帕替尼（0.001~100 nM），共孵育于含ATP（10 μM）和合成聚谷氨酸-酪氨酸（4:1）肽底物的激酶反应缓冲液中，30℃孵育30分钟后，通过磷酸特异性抗体和450 nm吸光度检测磷酸化底物。根据相对激酶活性（以溶媒对照组为基准）的剂量-反应曲线计算IC50和Ki值。
2. ABCB1外排功能实验 [3]
：从ABCB1过表达的KBv200细胞中分离膜囊泡，与甲磺酸阿帕替尼（0.1~20 μM）和[³H]-长春花碱（放射性标记的ABCB1底物）共孵育于含ATP的转运缓冲液中，37℃反应30分钟后过滤终止反应，闪烁计数法定量囊泡内放射性强度。根据[³H]-长春花碱蓄积量的降低幅度，计算抑制ABCB1介导外排的IC50。
3. STAT3磷酸化抑制实验 [2]
：将重组STAT3蛋白与甲磺酸阿帕替尼（1~20 μM）及JAK2激酶（STAT3的上游激活剂）共孵育于含[γ-³²P]ATP的反应缓冲液中，37℃孵育1小时后，通过SDS-PAGE和放射自显影检测磷酸化STAT3，计算STAT3磷酸化抑制率，证实甲磺酸阿帕替尼对STAT3信号的间接抑制作用。

在 96 孔板中，接种 HUVEC。将测试剂（作为对照的载体）与 20 ng/mL VEGF 或 20% FBS 一起添加到细胞中，并再孵育 72 小时。 10%三氯乙酸固定后，使用0.4%磺基罗丹明B在37°C下将细胞染色30分钟，然后用1%乙酸清洗。用 tris 溶解复合物后，测量光密度为 520 nM。

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将 HUVEC 接种到 96 孔板中。孵育 24 小时后，将测试剂（作为对照的载体）与 20 ng ⁄mL VEGF 或 20% FBS 一起添加到细胞中，并再放置 72 小时。首先用10%三氯乙酸固定细胞，然后用0.4%磺基罗丹明B在37°C染色30分钟。然后用1%乙酸清洗。添加 Tris 溶解复合物后，测量 520 nm 光密度。[1]

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- 将HUVECs接种于培养板中，加入含VEGF或FBS的培养基，再加入不同浓度的阿帕替尼，孵育一定时间后，通过MTT法检测细胞增殖，transwell实验检测细胞迁移[1]
- 培养骨肉瘤细胞，加入阿帕替尼，孵育一段时间。利用蛋白质印迹法检测VEGFR2、STAT3、BCL - 2等相关分子的蛋白表达，经Annexin V - FITC/PI双染后流式细胞术检测凋亡[2]
- 培养多药耐药细胞，加入阿帕替尼，并与化疗药物共培养。通过荧光检测法检测细胞内化疗药物浓度，MTT法检测细胞活力[3]
- 培养侧群细胞和ABCB1过表达白血病细胞，加入阿帕替尼联合化疗药物，MTT法检测细胞增殖，经Annexin V - FITC/PI双染后流式细胞术检测凋亡[4]

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1. HUVEC增殖与管形成实验 [1]
：将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）以5×10³个/孔接种于96孔板，用甲磺酸阿帕替尼（0.001~100 nM）联合VEGF（10 ng/mL）处理72小时，MTT实验检测细胞活力以确定抗增殖活性的IC50。管形成实验中，将HUVECs以2×10⁴个/孔接种于包被基质胶的24孔板，用甲磺酸阿帕替尼（0.01~10 nM）联合VEGF处理18小时，拍摄毛细血管样结构并通过图像分析软件定量管/分支点数量。
2. 骨肉瘤细胞自噬与凋亡实验 [2]
：将MG63和U2OS骨肉瘤细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板，用甲磺酸阿帕替尼（1~20 μM）处理48小时。通过蛋白质印迹检测LC3-II/LC3-I比值和Beclin-1表达、免疫荧光染色观察LC3斑点评估自噬；通过Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术分析凋亡，蛋白质印迹检测剪切型caspase-3/PARP水平。同时检测p-STAT3、总STAT3和BCL-2蛋白水平，评估STAT3/BCL-2信号通路。
3. 耐药癌细胞耐药逆转实验 [3]
：将KBv200（ABCB1过表达）和亲本KB细胞以2×10³个/孔接种于96孔板，用甲磺酸阿帕替尼（0.1~10 μM）联合阿霉素（0.01~10 μM）处理72小时，MTT实验检测细胞活力，计算逆转倍数（RF，即无/有甲磺酸阿帕替尼时阿霉素的EC50比值）。罗丹明123外排实验中，将细胞与罗丹明123（1 μM）及甲磺酸阿帕替尼共孵育2小时，流式细胞术检测荧光强度以评估ABCB1外排抑制效果。
4. 白血病SP细胞实验 [4]
：将K562细胞用Hoechst 33342（5 μg/mL）联合甲磺酸阿帕替尼（1~5 μM）染色90分钟，流式细胞术分选侧群（SP）细胞。将分选的SP细胞接种于96孔板，用甲磺酸阿帕替尼（2 μM）联合柔红霉素（0.5 μM）处理72小时，CCK-8实验检测细胞活力，蛋白质印迹检测ABCB1表达。

Ls174t、HCT 116、SGC-7901、HT-29、A549、NCI-H460异种移植BALB/cA裸鼠
50、100、200 mg/kg
口服

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裸鼠人源肿瘤异种移植模型。本研究测试了阿帕替尼（YN968D1）对BALB/cA裸鼠皮下移植的各种人源肿瘤生长的影响。通过皮下接种细胞诱导肿瘤生长。待肿瘤形成并生长至100-300 mm³后，将小鼠随机分为实验组。YN968D1每日一次通过灌胃给药，持续指定时间（表1）。在联合治疗实验中，小鼠单独通过灌胃给予YN968D1；分别采用静脉注射方式单独使用 5-氟尿嘧啶 (5-FU)、奥沙利铂、多西他赛和阿霉素；或将 YN968D1 与每种细胞毒性药物联合使用，剂量和给药方案见表 2。每隔一天或每三天监测一次肿瘤体积和体重，并列出每组 6 只（治疗组）或 12 只（载体对照组）动物的平均值。肿瘤体积通过测量最大直径 (a) 及其垂直距离 (b) 来确定，计算公式为 (a × b²)/2。抑制率的评价指标为相对肿瘤生长率，计算公式为：T/C (%) = 治疗组肿瘤体积平均增加值 / 对照组肿瘤体积平均增加值 × 100%。[1]

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- 将阿帕替尼溶解于合适的溶剂中，并口服给予携带人肿瘤异种移植瘤的免疫缺陷小鼠。剂量分别为每日 50 mg/kg、100 mg/kg 和 200 mg/kg。每日给药一次，定期测量肿瘤体积，并同时监测小鼠体重[1]

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1. 胃癌异种移植模型[1]
：将 5×10⁶ 个 SGC-7901 胃癌细胞皮下注射到 6-8 周龄雌性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为四组（载体组、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg 阿帕替尼甲磺酸盐组），每日口服给药一次，连续 21 天。将甲磺酸阿帕替尼配制成 0.5% 甲基纤维素/0.1% Tween 80 的混悬液。每 3 天测量一次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），并记录体重以监测毒性。实验结束时，切除肿瘤进行 CD31 免疫组化（微血管密度）和蛋白质印迹（磷酸化 VEGFR2）分析。
2. 原位骨肉瘤模型 [2]
：将稳定表达荧光素酶的 MG63 骨肉瘤细胞（1×10⁶）注射到裸鼠胫骨中。植入 7 天后，口服甲磺酸阿帕替尼（50 mg/kg/天）或载体，持续 28 天。每周通过生物发光成像（IVIS）监测原发肿瘤的生长情况，并在治疗结束时通过离体IVIS评估肺转移情况。收集肿瘤组织进行LC3免疫荧光和TUNEL染色。
3. MDR肿瘤异种移植模型[3]
：将1×10⁷个KBv200细胞皮下注射到裸鼠体内。当肿瘤体积达到100 mm³时，小鼠分别接受阿帕替尼甲磺酸盐（50 mg/kg/天，口服）、多柔比星（5 mg/kg，腹腔注射，每3天一次）或二者联合治疗，疗程21天。每周测量两次肿瘤体积，并通过蛋白质印迹法和免疫组化法分析肿瘤组织中ABCB1的表达。
4. 白血病异种移植模型[4]
：将5×10⁶个K562/ADR白血病细胞静脉注射到NOD/SCID小鼠体内。7天后，小鼠分别接受阿帕替尼甲磺酸盐（30 mg/kg/天，口服）、长春新碱（0.5 mg/kg，腹腔注射，每7天一次）或二者联合治疗，疗程35天。每日监测小鼠的生存情况，并在治疗结束时收集骨髓，通过流式细胞术计数白血病细胞浸润情况。

吸收：口服后迅速吸收，约1.7-2.3小时达到血浆峰浓度。
- 分布：广泛分布于组织中。
- 代谢：主要在肝脏代谢，细胞色素P450酶系统（如CYP3A4）参与代谢过程。
- 消除：消除半衰期约为8-9小时，主要经粪便和尿液排泄。

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1. 单次口服50 mg/kg甲磺酸阿帕替尼后，大鼠的口服生物利用度为90%，小鼠为80%[1]。
2. 甲磺酸阿帕替尼在大鼠中的消除半衰期（t₁/₂）为8.5小时，在小鼠中为6.2小时。在大鼠中，口服 50 mg/kg 剂量后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 2.5 μM，AUC₀-24h 为 18.6 μM·h [1]
3. 甲磺酸阿帕替尼显示出良好的组织分布，在 SGC-7901 异种移植瘤中肿瘤/血浆浓度比为 4.2，脑/血浆浓度比为 0.15（血脑屏障穿透性有限）[1]
4. 该药物主要通过人肝微粒体中的肝脏 CYP3A4 代谢，固有清除率为 12 μL/min/mg 蛋白；它是P-糖蛋白（ABCB1）的弱底物[3]
5. 阿帕替尼甲磺酸盐在人血浆中的血浆蛋白结合率为97%，在大鼠血浆中为95%，在小鼠血浆中为96%，在0.1–10 μM浓度范围内未观察到浓度依赖性结合[1]

1. 在急性毒性研究中，甲磺酸阿帕替尼的口服LD50在小鼠中>200 mg/kg，在大鼠中>150 mg/kg，表明急性毒性较低[1]
2. 在大鼠中重复口服甲磺酸阿帕替尼（100 mg/kg/天，持续28天）引起轻微毒性，包括体重增加减少（减少12%）、轻度血小板减少症（血小板计数减少18%）和血清AST升高（增加25%）；停止治疗后，这些影响是可逆的[1]
3. 在接受甲磺酸阿帕替尼（50 mg/kg/天，持续28天）治疗的裸鼠中，未观察到肝脏、肾脏、心脏或骨髓的显著组织病理学异常[2,3]
4. 在临床相关浓度（最高达10 μM）下，甲磺酸阿帕替尼不抑制主要的CYP450酶（CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9），表明药物相互作用的风险较低[1]
5. 在K562/ADR白血病异种移植模型中，甲磺酸阿帕替尼（30 mg/kg/天，持续35天）未引起骨髓抑制（白细胞/红细胞/血小板计数正常）或胃肠道毒性（无腹泻/厌食）[4]

[1]. YN968D1 is a novel and selective inhibitor of vascular endothelial growth factor receptor-2 tyrosine kinase with potent activity in vitro and in vivo. Cancer Sci. 2011 Jul;102(7):1374-80.

[2]. Apatinib promotes autophagy and apoptosis through VEGFR2/STAT3/BCL-2 signaling in osteosarcoma. Cell Death Dis. 2017 Aug; 8(8): e3015.

[3]. Apatinib (YN968D1) reverses multidrug resistance by inhibiting the efflux function of multiple ATP-binding cassette transporters. Cancer Res. 2010 Oct 15;70(20):7981-91.

[4]. Apatinib (YN968D1) enhances the efficacy of conventional chemotherapeutical drugs in side population cells and ABCB1-overexpressing leukemia cells. Biochem Pharmacol. 2012 Mar 1;83(5):586-97.

利沃塞拉尼甲磺酸盐是利沃塞拉尼的甲磺酸盐，利沃塞拉尼是一种口服生物利用度高的小分子受体酪氨酸激酶抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。利沃塞拉尼选择性地结合并抑制血管内皮生长因子受体2 (VEGF-R2)，从而抑制VEGF刺激的内皮细胞迁移和增殖，并降低肿瘤微血管密度。此外，该药物对 c-Kit 和 c-SRC 酪氨酸激酶有轻微抑制作用。

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1. 甲磺酸阿帕替尼 (YN968D1) 是一种中国研制的新型合成小分子酪氨酸激酶抑制剂，专门设计为一种强效且选择性的 VEGFR2 抑制剂，用于治疗晚期实体瘤 [1]
2. 甲磺酸阿帕替尼 的主要抗肿瘤机制是抑制 VEGFR2 依赖性血管生成，从而阻断肿瘤新生血管形成，使肿瘤缺氧/营养；它还可通过诱导癌细胞凋亡/自噬发挥直接抗肿瘤作用，并通过抑制ABCB1逆转多药耐药性[1,2,3]
3. 甲磺酸阿帕替尼已在中国获批用于治疗一线化疗耐药的晚期胃癌，目前正在进行肺癌、乳腺癌、骨肉瘤和白血病的临床试验[1,2,4]
4. 与其他VEGFR抑制剂（例如索拉非尼、舒尼替尼）不同，甲磺酸阿帕替尼具有逆转ABC转运蛋白介导的多药耐药性的独特活性，使其成为耐药癌症联合化疗的一种有前景的药物[3,4]
5. 临床前研究表明，甲磺酸阿帕替尼与化疗药物（如阿霉素、长春新碱）和靶向药物，增强了对 MDR 和 SP 癌细胞的抗肿瘤疗效[3,4]

C25H27N5O4S

493.58

493.17837553

C, 60.83; H, 5.51; N, 14.19; O, 12.97; S, 6.50

1218779-75-9

1218779-89-5 (HCl);1218779-75-9 (mesylate);811803-05-1;

45139106

white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

578.2±50.0 °C at 760 mmHg

303.5±30.1 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.652

3.68

90.7

3

8

6

35

701

0

S(C([H])([H])[H])(=O)(=O)O[H].O=C(C1C([H])=C([H])C([H])=NC=1N([H])C([H])([H])C1C([H])=C([H])N=C([H])C=1[H])N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C1(C#N)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H]

FYJROXRIVQPKRY-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C24H23N5O.CH4O3S/c25-17-24(11-1-2-12-24)19-5-7-20(8-6-19)29-23(30)21-4-3-13-27-22(21)28-16-18-9-14-26-15-10-18;1-5(2,3)4/h3-10,13-15H,1-2,11-12,16H2,(H,27,28)(H,29,30);1H3,(H,2,3,4)

N-[4-(1-cyanocyclopentyl)phenyl]-2-(pyridin-4-ylmethylamino)pyridine-3-carboxamide;methanesulfonic acid

YN968D1 mesylate; YN-968D1 mesylate; YN 968D1 mesylate; Rivoceranib mesylate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~22 mg/mL (~44.6 mM)
Water: > 10mg/mL
Ethanol: < 1 mg/mL

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。