| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Human mAChR M4: Atropine acts as an antagonist with an IC50 of 390 pM and a calculated Ki(CP) of 140 pM in a CRE-luciferase assay using transfected HEK293T cells. [3]
Chicken mAChR cM4: Atropine acts as an antagonist with an IC50 of 710 pM and a calculated Ki(CP) of 120 pM in a CRE-luciferase assay using transfected HEK293T cells. [3] Human alpha2A-adrenoceptor (hADRA2A): Atropine acts as an antagonist with an IC50 of 45 μM and a calculated Ki(CP) of 14 μM in a CRE-luciferase assay using transfected HEK293T cells. [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在一项使用转染了人源M4 mAChR的CRISPR-M3 HEK293T细胞进行的CRE-荧光素酶实验中，阿托品抑制了卡巴胆碱(10 μM)诱导的荧光信号，IC50值为390 pM。由此数据计算出的抑制常数(Ki)为140 pM。[3]
在一项使用转染了鸡源M4 mAChR (cM4)的CRISPR-M3 HEK293T细胞进行的CRE-荧光素酶实验中，阿托品抑制了卡巴胆碱(10 μM)诱导的荧光信号，IC50值为710 pM。由此数据计算出的抑制常数(Ki)为120 pM。[3] 在一项使用转染了人源alpha2A-肾上腺素能受体 (hADRA2A)的CRISPR-M3 HEK293T细胞进行的CRE-荧光素酶实验中，阿托品抑制了可乐定(1 μM)诱导的荧光信号，IC50值为45 μM。由此数据计算出的抑制常数(Ki)为14 μM。[3] 研究指出，根据其他文献报道，在高浓度（1-100 μM）下，阿托品对α-肾上腺素能受体也具有拮抗活性。[3] 乙酰胆碱引起的人体肺静脉扩张可被氢溴酸阿托品（托品；1 μM；肺静脉和动脉）抑制 [4]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
文章讨论到，局部使用阿托品对儿童近视有效，但1%的剂量会引起副作用。近期研究表明，0.01%浓度的阿托品在保持抑制近视效果的同时，副作用有所减轻。[3]
在鸡的形觉剥夺性近视模型中，已知阿托品可以抑制近视，其在玻璃体中发挥作用的估计浓度范围为0.1-10 mM。[3] 论文引用了研究发现，即消融鸡的胆碱能无长突细胞并不会削弱阿托品对近视的抑制作用，这表明其作用部位可能不在视网膜。[3] 论文还提到，在鸡的视网膜-RPE-脉络膜-巩膜制剂中，使用抑制近视浓度的阿托品处理会导致视网膜神经递质大量、非特异性地释放。[3] 在小鼠巩膜成纤维细胞的体外制备物中，阿托品抑制卡巴胆碱诱导的细胞增殖作用，仅在高浓度（0.5-100 μM）下才能观察到，这比其对mAChRs的Ki值高出了500-1000倍。[3] 氢溴酸阿托品（peromyscus sp.；腹腔注射；10 mg/kg；40 分钟以上） 氢溴酸可抑制麻醉期间通常发生的心律失常[2]。 |
| 酶活实验 |
本研究未进行直接的酶学实验。主要使用的是一种基于细胞的CRE-荧光素酶报告基因实验来测量受体的激活和抑制。[3]
用于受体拮抗作用的CRE-荧光素酶实验： 将缺乏内源性M3受体的CRISPR-M3 HEK293T细胞，与受体克隆（人源M4、鸡源cM4或人源ADRA2A）、cAMP反应元件荧光素酶载体（CRE-Luc）和海肾荧光素酶对照载体（RLuc）共转染。转染48小时后，将细胞与固定亚最大浓度的激动剂（对于M4/cM4使用10 μM卡巴胆碱，对于ADRA2A使用1 μM可乐定）和递增浓度的待测拮抗剂（包括阿托品）一起孵育4小时。孵育后，裂解细胞，并使用Dual-Glo荧光素酶检测系统依次测量荧光素酶活性。CRE-Luc活性（反映cAMP水平和受体激活）被归一化到RLuc活性（作为细胞活力和转染效率的对照）。通过非线性回归分析归一化数据来确定拮抗剂的IC50值。[3] |
| 细胞实验 |
细胞培养和转染： CRISPR-M3 HEK293T细胞在含10% FBS的DMEM中培养。实验时，将细胞以30%的融合度接种在12孔板中，并使用Lipofectamine LTX进行转染。每个孔，将含有160 ng受体DNA（如人源M4）、180 ng CRE-Luc和160 ng RLuc的Opti-MEM混合物与Lipofectamine LTX溶液混合。室温孵育5分钟后，将复合物加入到细胞中。8小时后更换培养基，转染24小时后，将细胞消化并重新接种到白色底透的96孔板中，密度为每孔7500个细胞。[3]
CRE-荧光素酶发光实验： 在初次转染48小时后，吸去96孔板中的培养基，替换为50 μL含有固定浓度激动剂（M4/cM4用10 μM卡巴胆碱；ADRA2A用1 μM可乐定）和不同浓度拮抗剂（如阿托品）的FluoroBrite DMEM。细胞在37°C孵育4小时。随后，每孔加入50 μL Dual-Glo荧光素酶试剂。振荡孵育10分钟确保细胞裂解后，测量CRE-Luc发光信号。接着，每孔加入50 μL Dual-Glo Stop & Glo试剂，再次振荡孵育10分钟后，测量海肾荧光素酶发光信号。CRE-Luc值通过RLuc值进行归一化，以控制孔间差异。[3] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 白足鼠（Peromyscus sp.）[2]
剂量： 10 mg/kg 给药途径： 腹腔注射（ip）；单次，持续40分钟。 实验结果： 心率加快，心律失常减少。 本文从文献综述的角度讨论了动物模型和实验方案，而非提供阿托品的新体内数据。[3] 鸡近视模型：在本文引用的研究中，通过诱导鸡的形觉剥夺性近视（FDM）来治疗近视。阿托品用于抑制近视，通常通过玻璃体内注射给药。所用浓度范围为 0.1 至 10 mM（估计玻璃体浓度），每次注射总量通常为 20-2000 nmol。[3] 兔眼部分布模型：该论文引用了一些研究，其中将单剂量 2% [3H]-阿托品滴入白化兔的结膜囊，以研究其在眼组织中的分布。[3] 人体临床应用：该论文讨论了使用浓度为 0.01% 至 1% 的阿托品滴眼液治疗儿童近视的临床方案。[3] |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C17H23NO3.HBR
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|---|---|
| 分子量 |
370.28136
|
| 精确质量 |
369.094
|
| 元素分析 |
C, 55.14; H, 6.53; Br, 21.58; N, 3.78; O, 12.96
|
| CAS号 |
6415-90-3
|
| 相关CAS号 |
Atropine;51-55-8;Atropine sulfate;55-48-1
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| PubChem CID |
21090485
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
2.826
|
| tPSA |
49.77
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
22
|
| 分子复杂度/Complexity |
353
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
Br.OCC(C(OC1CC2CCC(N2C)C1)=O)C1C=CC=CC=1
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| InChi Key |
VZDNSFSBCMCXSK-ZZJGABIISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H23NO3.BrH/c1-18-13-7-8-14(18)10-15(9-13)21-17(20)16(11-19)12-5-3-2-4-6-12;/h2-6,13-16,19H,7-11H2,1H3;1H/t13-,14+,15?,16?;
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| 化学名 |
[(1R,5S)-8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]octan-3-yl] 3-hydroxy-2-phenylpropanoate;hydrobromide
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| 别名 |
Atropine hydrobromide; 6415-90-3; Atropine (hydrobromide); 6VKW7R97ZU; 1alphaH,5alphaH-Tropan-3alpha-ol (+-)-tripate (ester), hydrobromide;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7007 mL | 13.5033 mL | 27.0066 mL | |
| 5 mM | 0.5401 mL | 2.7007 mL | 5.4013 mL | |
| 10 mM | 0.2701 mL | 1.3503 mL | 2.7007 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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