MMP-1 (IC50 = 3 nM); MMP-2 (IC50 = 4 nM); MMP-9 (IC50 = 4 nM); MMP-7 (IC50 = 6 nM); MMP-7 (IC50 = 6 nM)
Broad-spectrum matrix metalloproteinase (MMP) inhibitor. The literature states it is a potent inhibitor of MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-7, and MMP-9, with reported IC50 values of 3, 4, 4, 6, and 20 nM, respectively (citing reference 13). Other studies cited in the literature report IC50 values of 25, 32, 67, 27, 23, 19, and 29 nM for MMP-1, -2, -3, -8, -9, -14 (MT1-MMP), and -16 (MT3-MMP), respectively (citing reference 21). [1]
Broad-spectrum matrix metalloproteinase (MMP) inhibitor. The IC50 values reported for batimastat (BB-94) are: 4 nM for gelatinase A (MMP-2), 10 nM for gelatinase B (MMP-9), 3 nM for MMP-1 (interstitial collagenase), 20 nM for MMP-3 (stromelysin-1), and 6 nM for the snake venom MMP atrolysin C (Ht-d) which is structurally similar to mammalian MMPs. [2]
The Ki for the active (S,R,S) enantiomer of batimastat against atrolysin C (Ht-d) is 6 nM. Its less potent enantiomer (R,S,R), referred to as BB-1268, is 670-fold less active. [2]

Batimastat (BB-94) 是一种基质金属蛋白酶的强抑制剂，其结合方式不寻常。 Batimastat 对明胶酶 A 的 IC50 为 4 nM，对明胶酶 B 的 IC50 为 10 nM。与 MMP-1 (3 nM)、MMP-8 (10 nM) 和 MMP-3 (20 nM) 的结果相当[2]，结构相同的胶原酶 Ht-d 的 IC50 为 6 nM。这种金属蛋白酶抑制剂 Batimastat（BB-94，IC50=230 nM）基于异羟肟酸，可成功抑制细胞系 Karpas299 中 CD30 的脱落[3]。

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在收缩力降低的孕鼠（孕中期第12天和孕晚期第19天）子宫条中，加入浓度为10⁻⁶ M的batimastat（BB-94）增强了催产素诱导的收缩。具体而言，在孕晚期大鼠中，用BB-94（10⁻⁶ M）预处理30分钟显著增强了子宫条对催产素的收缩反应。该效应是一项研究的一部分，该研究表明MMP抑制剂可以逆转与妊娠相关的子宫收缩力降低。[1]
Batimastat是MMP活性的有效抑制剂。抑制浓度(IC50)数据见“靶点”字段。[2]
2.0埃分辨率的X射线晶体学揭示了batimastat在基质金属蛋白酶atrolysin C (Ht-d)活性位点内意外的结合模式。与预期的异羟肟酸基团螯合催化锌离子不同，研究发现抑制剂的甲基酰胺末端与锌离子配位。抑制剂的噻吩环深深地插入酶的大而疏水的初级特异性(S1')口袋中。这种结合几何形状主要由S1'口袋内的范德华相互作用主导，尤其是在所使用的高盐结晶条件下。抑制剂与酶骨架原子之间也形成氢键。[2]
使用GRID能量图进行的分子对接和建模研究表明，batimastat的活性对映体可以被结合位点容纳，而非活性对映体(BB-1268)则经历不利的空间位阻排斥，这解释了其效力上的巨大差异。[2]

在人乳腺癌原位模型中，鞘内治疗 Batimastat (BB-94) 显着抑制人卵巢癌异种移植物和小鼠黑色素瘤转移的生长，同时延迟原发肿瘤的生长，而不引起细胞毒性或改变 mRNA 水平[2]。合成基质金属蛋白酶抑制剂巴马司他 (BB) -94 在多种肿瘤类型中已证实具有抗肿瘤和抗血管生成特性。所有动物在接受巴马司他（每隔一天 60 毫克/公斤腹腔注射，总共注射 8 次）和顺铂（静脉注射 4 毫克/公斤，每 7 天，总共注射 3 次）治疗后第 200 天均存活且状况良好），这完全阻止了两种异种移植物的生长和扩散[4]。根据 Kaplan-Meier 生存分析（48 小时），与对照组 (75%) 相比，用 Batimastat (BB-94) 治疗的动物具有更高的生存率 (95.2%)，并且这些变化几乎具有统计显着性 (p= 0.064）[5]。 E2 给药后四小时（激素治疗后胶原蛋白密度最低的时期）在用盐水或巴马司他 (40 mg/kg) 预处理的动物中评估基质密度[6]。

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文献引用（但未在其自身实验结果中详细描述）腹腔注射batimastat可有效阻断人卵巢癌异种移植物的生长，抑制小鼠黑色素瘤转移，并在人乳腺癌原位模型中延迟原发性肿瘤生长，且未观察到细胞毒性或对mRNA水平的影响。这些发现引用自其他研究（参考文献15、16及个人交流）。[2]

在体外，使用针对各种金属蛋白酶的酶测定来计算巴替马斯特IC50。基质金属蛋白酶与肿瘤细胞侵袭、转移和关节炎等退行性过程有关。特异性金属蛋白酶抑制剂已被用于阻断肿瘤细胞增殖。我们以2.0埃的分辨率（R=16.8%）研究了巴替马斯特（BB-94）与金属蛋白酶[atrolysin C（Ht-d），EC 3.4.24.42]活性位点的相互作用。标题结构表现出意想不到的结合几何形状，噻吩环深深插入到主要特异性位点。这种前所未有的结合几何形状生动地展示了海绵状主要特异性位点的重要性，为设计新一代潜在的抗肿瘤药物指明了方向。

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本研究的主要实验方法是X射线晶体学，而非基于溶液的酶活性测定。抑制效力(IC50/Ki)数据引用自其他工作。晶体学实验涉及共结晶/浸泡：将atrolysin C (Ht-d)的单晶置于含有固体batimastat饱和的缓冲液的毛细管中。缓冲液由0.1 M咪唑(pH 6.8)和2.4 M硫酸铵组成。使用面积探测器和Cu-Kα辐射收集2.0埃分辨率的衍射数据。通过使用天然酶坐标进行分子置换来解析结构并进行精修。[2]
进行了分子建模研究以分析结合。使用GRID程序在三维网格上计算了酶的空结合位点与各种化学探针（酰胺NH、羰基O、甲基）之间的相互作用能。使用GRASP和DELPHI等程序计算了抑制剂和结合口袋的分子表面及静电势。基于计算出的能量图，将活性和非活性对映体对接到活性位点。[2]

细胞增殖测定[Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):393-400.]
将细胞系接种在生长培养基中的24孔多层培养基中，并允许其粘附两天。当实验开始时（第0天），以图中所示的浓度加入含有氟维司群（0.1μM）、HER配体（10 ng/ml）、吉非替尼、CI-1033、TAPI-2、Batimastat (BB94)或GM6001的生长培养基。对照细胞加入的载体量与处理细胞相似。在第三天更换生长培养基，在第五天使用如前所述的结晶紫比色法测定细胞数量。每个实验进行四次，重复至少两次。

溶于含0.01% Tween 2O的PBS缓冲液中；30 mg/kg；腹腔注射
裸鼠
小鼠：采用6周龄雌性BALB/c小鼠。感染前1小时和感染后24小时，小鼠接受腹腔注射巴替马司他（BB-94，50 mg/kg）。巴替马司他以50 mg/mL的浓度溶于DMSO中，并于-20°C冷冻保存。使用前用磷酸盐缓冲液（PBS）稀释20倍，取500 μL注射到小鼠体内。对照组小鼠注射500 μL 5% DMSO的PBS溶液。在进行脑内刺激48小时后，处死动物。

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大鼠：Sprague-Dawley雌性大鼠在尸检前预定时间间隔内，腹腔注射单次生理剂量的E2（40 μg/kg，溶于0.9% NaCl、0.4% EtOH溶剂中）。已证实，体内该剂量的雌激素可引起子宫湿重、组织结构和基因表达的变化，这些变化表明雌激素受体被激活。在每项研究中，动物在组织采集前4小时腹腔注射单次40 μg/kg的E2，对照组仅注射溶剂。腹腔注射巴替马司他（batimastat）40 mg/kg，溶于含0.1% Tween-20的1×PBS缓冲液中，于雌二醇（E2）或生理盐水对照组给药前4小时给药，已证实其具有体内MMP抑制作用。

[1]. Increased MMPs expression and decreased contraction in the rat myometrium during pregnancy and in response to prolonged stretch and sex hormones. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2012 Jul 1;303(1):E55-70.

[2]. Batimastat, a potent matrix mealloproteinase inhibitor, exhibits an unexpected mode of binding. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996 Apr 2;93(7):2749-54.

[3]. Inhibition of metalloproteinases enhances the internalization of anti-CD30 antibody Ki-3 and the cytotoxic activity of Ki-3 immunotoxin. Int J Cancer. 2002 Mar 10;98(2):210-5.

[4]. Batimastat, a synthetic inhibitor of matrix metalloproteinases, potentiates the antitumor activity of cisplatin in ovarian carcinoma xenografts. Clin Cancer Res. 1998 Apr;4(4):985-92.

[5]. Inhibition of matrix metalloproteinases attenuates brain damage in experimental meningococcal meningitis. BMC Infect Dis. 2014 Dec 31;14:726.

[6]. Regulated expression of matrix metalloproteinases, inflammatory mediators, and endometrial matrix remodeling by 17beta-estradiol in the immature rat uterus. Reprod Biol Endocrinol. 2009 Nov 4;7:124.

巴替马司他是一种仲酰胺，由(2S,3R)-5-甲基-3-{[(2S)-1-(甲氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基]氨基甲酰基}-2-[(噻吩-2-基硫基)甲基]己酸的羧基与羟胺的氨基缩合而成。它是一种广谱基质金属蛋白酶抑制剂。它具有基质金属蛋白酶抑制剂、抗肿瘤药和血管生成抑制剂的作用。它是L-苯丙氨酸衍生物，属于噻吩类化合物、有机硫化物、三酰胺、羟肟酸和仲酰胺类化合物。

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巴替马司他是一种具有潜在抗肿瘤活性的合成羟肟酸类药物。巴替马司他与基质金属蛋白酶 (MMPs) 活性位点中的锌离子共价结合，从而抑制 MMPs 的活性，诱导细胞外基质降解，并抑制血管生成、肿瘤生长、侵袭和转移。
巴替马司他是一种抗癌药物，属于血管生成抑制剂类药物。它是一种基质金属蛋白酶抑制剂。

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基质金属蛋白酶与转移性肿瘤的生长和扩散密切相关。本研究利用基质金属蛋白酶抑制剂 BB-94（巴替马司他）在裸鼠原位移植人结肠癌模型中探讨了基质金属蛋白酶的这一作用。将 1-1.5 mm 的人结肠癌组织块通过手术原位移植到 40 只无胸腺 nu/nu 小鼠的结肠上。肿瘤植入7天后开始给予BB-94或载体（磷酸盐缓冲液，pH 7.4，含0.01% Tween 80）（每组20只动物）。动物在前60天每天腹腔注射一次BB-94，剂量为30 mg/kg，之后每周注射三次。BB-94治疗使原发肿瘤的中位重量从对照组的293 mg降低至BB-94治疗组的144 mg（P < 0.001）。BB-94治疗还降低了局部和区域性侵袭的发生率，从对照组18只小鼠中的12只（67%）降低至治疗组20只小鼠中的7只（35%）。对照组中有6只小鼠被发现出现肝脏、肺、腹膜、腹壁或局部淋巴结转移。 BB-94组中仅有两只小鼠出现转移性疾病的证据，且转移灶均局限于腹壁。BB-94治疗组观察到的肿瘤进展减缓转化为该组小鼠生存期的延长，中位生存期从对照组的110天延长至治疗组的140天（P < 0.01）。BB-94治疗未观察到任何明显的毒性作用，这些结果表明此类药物可能作为辅助癌症疗法有效。

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我们测试了合成基质金属蛋白酶抑制剂巴替马司他抑制同源C57BL/6N小鼠体内B16-BL6鼠黑色素瘤生长和转移扩散的能力。腹腔注射巴替马司他可显著抑制静脉注射B16-BL6细胞后在肺部形成的转移灶数量。研究人员在小鼠后足垫接种B16-BL6黑色素瘤后，检测了巴替马司他对自发性转移的影响。26-28天后，手术切除原发肿瘤。从第14天至第28天（术前）或从第26天至第44天（术后），每天两次给予巴替马司他。两种给药方案均未显著影响肺转移灶的中位数，但转移灶的重量显著降低。最后，研究人员还检测了巴替马司他对B16-BL6黑色素瘤皮下生长的影响。从肿瘤移植当天开始每日给予巴替马司他，可显著延缓肿瘤生长；而从晚期肿瘤开始治疗，仅能轻微抑制肿瘤生长。我们的研究结果表明，基质金属蛋白酶抑制剂不仅可以阻止B16-BL6细胞对继发性器官的侵袭，还可以限制实体瘤的生长。

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在本研究中，我们使用浓度为10⁻⁶ M的巴替马司他（BB-94）作为药理学工具，抑制离体大鼠子宫组织条中的MMP活性。巴替马司他溶于DMSO中配制成储备液（10⁻² M），实验浴槽中DMSO的最终浓度保持在0.1%以下。[1]
本研究假设妊娠期间子宫扩张增加会上调特定MMP（如MMP-2和MMP-9）的表达，进而抑制子宫肌层收缩。巴替马司他能够增强妊娠大鼠子宫的收缩，这支持了MMP参与该松弛通路。 [1]
巴替马司他是一种合成的肽模拟基质金属蛋白酶抑制剂。[2]
本研究阐明了巴替马司他的另一种结合模式，在高盐条件下，甲基酰胺基团而非羟肟酸基团作为锌配体发挥作用。这表明，大型S1'口袋中的范德华相互作用可能是结合的主要驱动力，为设计可能避免羟肟酸部分潜在毒性的新型抑制剂提供了思路。[2]
MMP中保守的、空腔状的S1'口袋被认为是实现高亲和力抑制的关键靶点。[2]

C23H30N3O4S2-.NA+

499.6218

499.158

130464-84-5

Batimastat;130370-60-4

59955182

Typically exists as solid at room temperature

4.378

163.9

3

6

12

33

621

3

[O-]NC([C@@H](CSC1=CC=CS1)[C@@H](CC(C)C)C(N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(NC)=O)=O)=O.[Na+]

VWABIWQKZWQAKG-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C23H30N3O4S2.Na/c1-15(2)12-17(18(22(28)26-30)14-32-20-10-7-11-31-20)21(27)25-19(23(29)24-3)13-16-8-5-4-6-9-16;/h4-11,15,17-19H,12-14H2,1-3H3,(H3-,24,25,26,27,28,29,30);/q-1;+1

sodium;N-[1-(methylamino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]-2-(2-methylpropyl)-N'-oxido-3-(thiophen-2-ylsulfanylmethyl)butanediamide

Batimastat (sodium salt); BB-94 sodium salt; Batimastat Sodium; 130464-84-5; sodium;(2R,3S)-N-[(2S)-1-(methylamino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]-2-(2-methylpropyl)-N'-oxido-3-(thiophen-2-ylsulfanylmethyl)butanediamide; BatimastatSodium; (2S,3R)-N-Hydroxy-N'-[(2S)-1-methylamino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]-3-(2-methylpropyl)-2-(thiophen-2-ylsulfanylmethyl)butanediamide sodium salt; PD118565

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。