| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Luminescent enzyme substrate
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| 体外研究 (In Vitro) |
用扩展的电子偶联取代C-8位的亚甲基是一种很有前途的制备红移酮肠嗪衍生物的新方法。在本文中，我们描述了一种含氧的coelenterazine衍生物，相对于coelenterazine 400a具有显著的红移(63 nm)生物发光信号最大值(DeepBlueC™，1)。在细胞成像中，含硫coelenterazine衍生物显示出显著的(1.77±0.09;P≤0.01)，其发光信号略高于coelenterazine 400a，含氧coelenterazine衍生物的发光信号略高于(0.74±0.08;P≤0.05)较低的发光信号。这有助于进一步了解生物发光的潜在机制。[3]
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| 细胞实验 |
相对量子产率(RQY)与离体发光动力学[3]
RQY研究和动力学分析使用IVIS动力学进行，该动力学由安装在避光标本室(暗箱)上的冷却电荷耦合器件(CCD)摄像机、摄像机控制器、摄像机冷却系统和计算机控制组成。数据表示为光强(蓝色最弱，红色最强)叠加在灰度参考图像上的伪彩色图像(以光子/s/cm2/scr为单位)。在区域上绘制圆形指定感兴趣区域(roi)，并使用Living Image软件将光输出量化为每秒发射的光子总数。 为确定底物的适宜不饱和量，采用10 μL coelenterazine (CTZ) 衍生物1 - 3 (1 ~ 100 μmol/L)和90 μL DMSO或Rluc酶，终浓度为15 nmol/L(生物发光)。将10 μL coelenterazine (CTZ) 衍生物(终浓度为5 μmol/L)与90 μL DMSO或Rluc酶(15 nmol/L)混合在96孔黑板上，以防止孔间光反射，测定RQY和反应动力学。在混合后立即测量发光信号，并使用IVIS监测25-30分钟(发光几乎衰减到接近背景水平)。化学发光每5分钟记录一次光输出，曝光时间30 s;生物发光每1分钟记录一次光输出，前15分钟曝光时间5 s。采用Prism 5.0 GraphPad软件对采集数据进行分析，计算总光输出。在相同条件下，用Tris-HCl缓冲液代替coelenterazine (CTZ) 衍生物溶液作为相应的空白对照。所有试验均为三份。 活细胞发光活性测定[3] 表达Rluc的ES-2细胞(人卵巢癌细胞系)由BioDiagnosis提供。ES-2细胞在Dulbecco's modified Eagle's培养基(DMEM;含10%胎牛血清(FBS)和0.5 μg/mL嘌呤霉素的高葡萄糖(含l-谷氨酰胺)，在37℃的湿化气氛中，在5% CO2培养箱中培养。coelenterazine (CTZ) 衍生物在乙醇中溶解成1 mmol/L的原液，用Tris-HCl缓冲液稀释至梯度浓度(5、10、20、40、60、80、100 μmol/L)。 ES-2-Rluc细胞生长于黑色96孔板(每孔4 × 104个细胞)。24小时孵育后，取出培养基。然后用Tris-HCl缓冲液冲洗细胞2次，并用100 μL浓度的coelenterazine (CTZ) 衍生物溶液(范围为0 ~ 100 μmol/L)处理细胞。然后使用IVIS立即确定生物发光信号。每1分钟记录一次光输出，曝光时间30秒，直到发光几乎衰减到接近背景水平。测量每个孔的发光信号(每秒光子数)并绘制平均值。所有的实验都是三次重复。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
总之，我们描述了一种含氧的CTZ衍生物2，与腔肠素400a相比，其生物发光信号最大值发生了更显著的红移（63 nm），但量子产率较低。本研究结果似乎支持我们的假设，即在C-8位引入氧杂原子也能产生红移效应。虽然我们已提出了CTZ发光反应的可能机制（见补充信息图S2），但Rluc系统的酶促识别机制尚未完全阐明。我们推测，这可能是由于C-8位氧原子的π电子共轭、电负性或氢键的有效扩展所致。我们还开发了一种新的测量方法，即使用配备CCD的IVIS Kinetic来检测RQY。CTZ衍生物3的化学发光RQY与先前报道的值吻合良好。为了获得真实准确的生物发光量子产率（RQY），我们采用市售纯化的Rluc酶代替粗胞质提取物，以避免酶非依赖性发光。化合物2和3的量子产率较低，与先前报道的值存在较大差异。然而，我们发现化合物3对Rluc的亲和力高于腔肠素400a。在细胞成像中，化合物3也显示出更高的发光信号。总之，化合物2和3是很有前景的明亮红移CTZ衍生物，为改善CTZ类似物的发光性能提供了一种新方法。更重要的是，这有助于理解Rluc与腔肠素反应后生物发光的潜在机制。[3]
在BRET2（生物发光共振能量转移）中，海肾荧光素酶（RLuc）用作供体蛋白，而绿色荧光蛋白（GFP2）用作受体蛋白。在细胞可渗透底物DeepBlueC存在的情况下，RLuc会发出395 nm的蓝光。如果通过特定的生物分子相互作用使GFP2与RLuc紧密靠近，GFP2会吸收蓝光能量并重新发出510 nm的绿光。因此，使用合适的双通道发光仪（例如，Packard BioScience公司的Fusion Universal Microplate Analyzer）测量绿光与蓝光的比值（510/395 nm）即可轻松确定BRET2信号。由于BRET2检测不需要光源，因此该技术不存在标准FRET检测中常见的荧光背景过高或光漂白问题。基于BRET2技术，我们开发了一种通用的G蛋白偶联受体（GPCR）检测方法。该方法基于以下观察：大多数GPCR被激动剂激活后，会导致β-arrestin（一种参与受体脱敏和隔离的蛋白质）与受体相互作用。我们构建了一个稳定表达GFP2:β-arrestin 2融合蛋白的细胞系，并证明该细胞系可用于BRET2/arrestin检测中监测各种瞬时表达的GPCR的激活情况。此外，我们以HEK 293/GFP2:β-arrestin 2细胞系为受体，构建了一个双稳定细胞系，该细胞系共表达与RLuc融合的血管加压素2受体（V2R）(V2R:RLuc)，并将其用于BRET2/arrestin检测中化合物的药理学表征。该方法能够获得真实的药理学结果，并支持将BRET2/arrestin检测作为一种可用于重组细胞系的工具，以表征配体-GPCR相互作用，从而应用于孤儿受体的配体鉴定。[2] |
| 分子式 |
C26H21N3O
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|---|---|
| 分子量 |
391.464445829391
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| 精确质量 |
391.168
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| CAS号 |
70217-82-2
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| 相关CAS号 |
Coelenteramine 400a hydrochloride;2320429-05-6
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| PubChem CID |
135750016
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| 外观&性状 |
Brown to dark brown solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
551.4±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
287.3±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.662
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| LogP |
4.84
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| tPSA |
50.16
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
524
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
OC1=C(CC2C=CC=CC=2)N=C2C(CC3C=CC=CC=3)=NC(C3C=CC=CC=3)=CN21
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| InChi Key |
XNNYOKUWNAAJQW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H21N3O/c30-26-23(17-20-12-6-2-7-13-20)28-25-22(16-19-10-4-1-5-11-19)27-24(18-29(25)26)21-14-8-3-9-15-21/h1-15,18,30H,16-17H2
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| 化学名 |
2,8-dibenzyl-6-phenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3-ol
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| 别名 |
Coelenterazine 400a; 70217-82-2; Coelenterazine 400 a; Coelenteramine 400a; BlueSyn C; 2,8-dibenzyl-6-phenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one; 2,8-dibenzyl-6-phenyl-7H-imidazo[1,2-a]pyrazin-3-one; 2,8-dibenzyl-6-phenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3-ol;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5545 mL | 12.7727 mL | 25.5454 mL | |
| 5 mM | 0.5109 mL | 2.5545 mL | 5.1091 mL | |
| 10 mM | 0.2555 mL | 1.2773 mL | 2.5545 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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