| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 10.5 μM (TRPP3 channel)[1] NHE[2] Macropinocytosis[3]
EIPA hydrochloride targets the TRPP3 channel (a TRP channel) as an antagonist. It also inhibits the Na+/H+ exchanger (NHE), particularly NHE3, and macropinocytosis. The compound's primary targets are thus ion channels and transporters involved in cellular ion homeostasis and endocytic processes. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在X染色体上，EIPA盐酸盐（100 μM，30分钟）可抑制TRPP3介导的Ca2+摄取。在非洲卵子中也观察到类似现象[1]。EIPA盐酸盐（10-100 μM）可逆性地抑制基础Na+电流（IC50：19.5 μM）[1]。EIPA盐酸盐（300 μM，6小时）通过NHE3（Na+/H+交换器3）增强IEC-18细胞的自噬[2]。EIPA盐酸盐（20 μM，2小时）可抑制CA-PZ通过巨胞饮作用进入HT-29细胞和MIA PaCa-2细胞[3]。EIPA盐酸盐（30 μM，3小时）通过减少Zn2+进入小脑颗粒神经元，减轻锌/红藻氨酸的毒性[4]。 EIPA盐酸盐（5-100 μM，48小时）通过上调p21表达抑制MKN28细胞增殖[5]。EIPA盐酸盐（3 μM，6小时）可阻止LPS诱导的COX-2蛋白水平升高[7]。体外实验表明，EIPA盐酸盐（100 μM，30分钟）抑制TRPP3介导的Ca2+摄取。它可逆性地抑制基础Na+电流，IC50值为19.5 μM。在300 μM浓度下，作用6小时后，EIPA盐酸盐可通过NHE3途径增强IEC-18细胞的自噬。在20 μM浓度下，作用2小时后，EIPA盐酸盐可通过巨胞饮作用抑制CA-PZ进入HT-29和MIA PaCa-2细胞。此外，在30 μM浓度下，EIPA盐酸盐可通过减少Zn2+进入神经元来降低锌/红藻氨酸毒性。此外，它在 5-100 μM 时通过上调 p21 表达抑制 MKN28 细胞增殖，并在 3 μM 时阻止 LPS 诱导的 COX-2 蛋白水平升高。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在ddY品系小鼠中，静脉注射1 mg/kg EIPA盐酸盐可剂量依赖性地减轻缺血/再灌注（I/R）引起的肾损伤[6]。在球囊型LPS诱导的炎症模型中，EIPA盐酸盐（10 mg/kg）可减轻LPS诱导的炎症[7]。体内实验表明，在ddY品系小鼠中，静脉注射1 mg/kg EIPA盐酸盐可剂量依赖性地减轻缺血/再灌注（I/R）引起的肾损伤。在球囊型LPS诱导的炎症模型中，EIPA盐酸盐（10 mg/kg）可减轻LPS诱导的炎症。
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| 酶活实验 |
方法：本研究采用表达NHE的MKN28细胞，在EIPA处理48小时后，探讨EIPA对细胞增殖、细胞内pH值（pH(c)）、细胞内氯离子浓度（[Cl(-)](c)）以及细胞周期调控蛋白和MAPKs表达的影响。结果：EIPA通过诱导G(0)/G(1)期阻滞抑制MKN28细胞增殖，对细胞内pH值无显著影响，但与细胞内氯离子浓度（[Cl(-)](c)）降低相关。尽管单独使用EIPA对pH(c)没有影响，但EIPA与DIDS（一种Cl⁻/HCO₃⁻交换器抑制剂，例如阴离子交换器(AE)和Na⁺驱动的Cl⁻/HCO₃⁻交换器(NDCBE)）联合使用时，pH(c)降低，这表明在NHE抑制条件下，DIDS敏感的Cl⁻/HCO₃⁻转运蛋白（如AE和/或NDCBE）通过刺激HCO₃⁻摄取并伴随Cl⁻释放来维持pH(c)的正常水平。EIPA诱导的[Cl⁻](c)降低上调了与MAPK磷酸化相关的p21表达，从而抑制了与G₀/G₁期阻滞相关的细胞增殖。结论：EIPA通过上调p21表达抑制MKN28细胞增殖，而p21表达的降低是由于DIDS敏感的Cl⁻/HCO₃⁻交换器介导的补偿作用，从而在NHE抑制条件下维持pH(c)正常。这是首个揭示NHE抑制剂通过降低[Cl⁻](c)而非pH(c)来抑制癌细胞增殖的研究[5]。
EIPA盐酸盐的体外酶/受体结合试验通常涉及研究其对离子通道和转运蛋白的影响。例如，可以在表达TRPP3通道的细胞中测量TRPP3介导的Ca²⁺摄取，或在卵母细胞中评估基础Na⁺电流。可以通过测量细胞内pH变化或Na⁺通量来评估该化合物对NHE的抑制作用。这些试验有助于确定该化合物对其主要靶点的效力和作用机制。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验[5]
细胞类型： MKN28 细胞 测试浓度： 5、10、25、50 和 100 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 细胞增殖呈剂量和时间依赖性抑制。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型： IEC-18 细胞 测试浓度： 300 μM 孵育时间： 6 小时 实验结果： LC3-II 总蛋白水平和 P62 通量增加。 ATG5、7、12 和 P62 的表达均有所增加。 体外细胞实验通常采用 MKN28（胃癌）、HT-29（结肠癌）或 MIA PaCa-2（胰腺癌）等癌细胞系来检测 EIPA 盐酸盐。将细胞培养后，用不同浓度的化合物进行处理。检测终点包括评估细胞增殖、自噬诱导、巨胞饮抑制以及测量 COX-2 等炎症标志物。这些实验用于研究该化合物对癌症和炎症的影响。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性ddY品系小鼠[6]
剂量：1 mg/kg 给药途径：静脉注射(iv) 实验结果：减轻肾脏组织学损伤，改善缺血/再灌注(I/R)引起的肾脏ET-1含量升高。 动物/疾病模型：气囊型LPS诱导炎症模型[7] 剂量：10 mg/kg 给药途径：口服 实验结果：抑制LPS诱导的白细胞浸润气囊。抑制造口袋液中PGE2的含量。 已在小鼠模型中进行了EIPA盐酸盐的体内动物研究。在ddY品系小鼠中，以1 mg/kg的剂量静脉注射该化合物，以研究其对缺血/再灌注引起的肾损伤的影响。在球囊型LPS诱导的炎症模型中，以10 mg/kg的剂量给予EIPA盐酸盐，以减轻炎症。这些研究有助于评估该化合物在疾病模型中的治疗潜力。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
EIPA盐酸盐的药代动力学(PK)特性表明其具有口服生物活性。然而，现有文献中尚未详细描述其具体的PK参数，例如半衰期、Cmax和生物利用度。据报道，该化合物在DMSO中的溶解度为50 mg/mL。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
EIPA盐酸盐的毒性特征尚未在临床前研究中得到充分表征。现有文献中没有关于其急性毒性、遗传毒性或慢性毒性的具体数据。该化合物仅供研究使用，未经批准用于人体治疗。
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| 参考文献 |
[1]. Inhibition of TRPP3 channel by MK-870 and analogs. Mol Pharmacol. 2007 Dec;72(6):1576-85.
[2]. Na+/H+ Exchanger Regulates Amino Acid-Mediated Autophagy in Intestinal Epithelial Cells. Cell Physiol Biochem. 2017;42(6):2418-2429. [3]. A new HDAC inhibitor cinnamoylphenazine shows antitumor activity in association with intensive macropinocytosis.Oncotarget. 2017 Feb 28;8(9):14748-14758. [4]. Acidosis and 5-(N-ethyl-N-isopropyl)amiloride (EIPA) Attenuate Zinc/Kainate Toxicity in Cultured Cerebellar Granule Neurons. Biochemistry (Mosc). 2015 Aug;80(8):1065-72. [5]. An inhibitor of Na(+)/H(+) exchanger (NHE), ethyl-isopropyl amiloride (EIPA), diminishes proliferation of MKN28 human gastric cancer cells by decreasing the cytosolic Cl(-) concentration via DIDS-sensitive pathways. Cell Physiol Biochem. 2012;30(5):1241-53. [6]. Role of Na+/H+ exchanger in the pathogenesis of ischemic acute renal failure in mice. J Cardiovasc Pharmacol. 2007 Mar;49(3):154-60. [7]. Inhibition of lipopolysaccharide-induced prostaglandin E2 production and inflammation by the Na+/H+ exchanger inhibitors. J Pharmacol Exp Ther. 2007 Apr;321(1):345-52. |
| 其他信息 |
TRPP3是瞬时受体电位（TRP）阳离子通道超家族的成员，是一种Ca²⁺激活的通道，可通透Ca²⁺、Na⁺和K⁺。TRPP3参与调节舌双极细胞的酸味感知以及脊髓神经元的pH敏感性动作电位。TRPP3也存在于其他组织的兴奋性和非兴奋性细胞中，包括视网膜、脑、心脏、睾丸和肾脏，但其功能尚不明确。本研究利用非洲爪蟾卵母细胞表达、电生理和放射性示踪技术，探讨了阿米洛利及其类似物（已知可抑制多种离子通道和转运蛋白，并对所有味觉刺激均有反应）对TRPP3通道功能的调节作用。我们发现，阿米洛利及其类似物对TRPP3通道活性的抑制亲和力各不相同。放射性标记的 (45)Ca2+ 摄取实验表明，阿米洛利、苯甲酰胺、苯甲酰胺和 5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利 (EIPA) 均能抑制 TRPP3 介导的 Ca2+ 转运。双微电极电压钳实验表明，阿米洛利类似物显著抑制 TRPP3 介导的 Ca2+ 激活电流，其抑制效力顺序为：苯甲酰胺 > 苯甲酰胺 > EIPA > 阿米洛利，IC50 值分别为 0.14、1.1、10.5 和 143 μM。抑制效力与抑制剂分子大小呈正相关。利用细胞贴附式膜片钳技术，我们发现阿米洛利类似物降低了通道开放概率和平均开放时间，但对单通道电导无影响。先前关于苯甲酰胺在已报道的抑制剂四戊基铵存在下的抑制作用的研究表明，阿米洛利和有机阳离子抑制剂竞争结合TRPP3上的同一位点。TRPP3可能与先前报道的体内阿米洛利敏感阳离子转运有关。[1] EIPA盐酸盐是一种研究级化合物，主要用于离子通道、自噬和炎症的研究。它也被称为L593754盐酸盐和5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利盐酸盐。该化合物并非已批准的治疗药物，也没有临床试验历史。它为浅黄色至黄色固体，纯度≥98%，应储存于-20°C。
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| 分子式 |
C11H19CL2N7O
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|---|---|
| 分子量 |
336.220858812332
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| 精确质量 |
335.1
|
| 元素分析 |
C, 39.30; H, 5.70; Cl, 21.09; N, 29.16; O, 4.76
|
| CAS号 |
1345839-28-2
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| 相关CAS号 |
EIPA;1154-25-2
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| PubChem CID |
56935648
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| 外观&性状 |
Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature
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| tPSA |
137Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
372
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCN(C1=NC(=C(N=C1Cl)C(=O)N=C(N)N)N)C(C)C.Cl
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| InChi Key |
BGHBOQNLQNKPFO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H18ClN7O.ClH/c1-4-19(5(2)3)9-7(12)16-6(8(13)17-9)10(20)18-11(14)15;/h5H,4H2,1-3H3,(H2,13,17)(H4,14,15,18,20);1H
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| 化学名 |
3-amino-6-chloro-N-(diaminomethylidene)-5-[ethyl(propan-2-yl)amino]pyrazine-2-carboxamide;hydrochloride
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| 别名 |
EIPA hydrochloride; EIPA (hydrochloride); 1345839-28-2; CHEMBL1909809; 3-amino-6-chloro-N-(diaminomethylidene)-5-[ethyl(propan-2-yl)amino]pyrazine-2-carboxamide;hydrochloride; L593754 hydrochloride; 5-(N-Ethyl-N-isopropyl)amiloridehydrochloride; MH 12-43 hydrochloride; .
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~130 mg/mL (~386.65 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9742 mL | 14.8712 mL | 29.7424 mL | |
| 5 mM | 0.5948 mL | 2.9742 mL | 5.9485 mL | |
| 10 mM | 0.2974 mL | 1.4871 mL | 2.9742 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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