| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Higenamine acts as a beta2-adrenergic receptor (β2-AR) agonist, and its anti-apoptotic and cardiac protective effects are mediated by the β2-AR/PI3K/AKT signaling pathway [1].
Higenamine functions as a β2-AR agonist to antagonize bronchoconstriction [1]. The compound is also considered to be a β2-AR agonist that may stimulate lipolysis and thermogenesis [2]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在新生大鼠心室肌细胞 (NRVM) 中，通过流式细胞术的膜联蛋白 V FITC/碘化丙啶 (PI) 检测分析发现，去甲乌药碱 剂量依赖性地减弱了 H2O2 刺激的早期和晚期细胞凋亡。 去甲乌药碱以剂量依赖的方式抑制H2O2诱导的裂解型caspase-9和裂解型caspase-3的增加（测试浓度：100 μM）[1]。
在NRVMs中，去甲乌药碱（100 μM）对H2O2（250 μM，处理24 h）诱导的裂解型caspase-9和裂解型caspase-3的抑制作用在β2-肾上腺素能受体拮抗剂ICI118551（0.5 μM）存在下消失，但在β1-肾上腺素能受体拮抗剂CGP20712a（1 μM）存在下则无此作用[1]。 在成年小鼠心室肌细胞（AMVMs）中，H2O2（20 μM，处理24 h）诱导的细胞死亡（通过台盼蓝染色评估，圆细胞/杆状细胞比率）被去甲乌药碱（100 μM）显著减弱。这种保护作用可被β2-肾上腺素能受体拮抗剂ICI118551 (0.5 μM) 和PI3K抑制剂wortmannin (10 μM) 阻断，但不能被β1-肾上腺素能受体拮抗剂CGP20712a (1 μM) 阻断[1]。 在AMVMs中，TUNEL染色显示，去甲乌药碱 (100 μM) 对H2O2 (20 μM，24 h) 诱导的细胞凋亡的抗凋亡作用可被β2-肾上腺素能受体特异性抑制剂ICI118551 (0.5 μM) 阻断[1]。 去甲乌药碱刺激AMVMs中AKT在Ser473位点的磷酸化（激活），这种磷酸化可被β2-肾上腺素能受体拮抗剂或PI3K抑制剂阻断，但不受β1-肾上腺素能受体拮抗剂的影响[1]。 β2-肾上腺素能受体特异性拮抗剂布托沙明阻断了去甲乌药碱对H2O2刺激的caspase-3活性和AKT激活的影响。β2-肾上腺素能受体特异性激动剂富马酸福莫特罗降低caspase-3活性并增加AKT激活，其作用与去甲乌药碱相似，且富马酸福莫特罗与去甲乌药碱联用并未产生叠加效应[1]。在H2O2处理的NRVMs中，去甲乌药碱呈剂量依赖性地降低了裂解caspase-9和裂解caspase-3蛋白的水平（测试剂量：0、10、50、100 μM）。 100 μM 去甲乌药碱 的作用被 0.5 μM ICI118551 显著阻断，但不能被 1 μM CGP20712a 阻断 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受缺血/再灌注（I/R）损伤（左前降支结扎30分钟缺血，随后24小时再灌注）的C57BL/6J小鼠中，术前2小时腹腔注射去甲乌药碱（10 mg/kg体重）可显著降低心肌梗死面积（MI），与生理盐水处理组相比（19% vs. 51%，风险面积相似）。心脏切片的TUNEL染色显示，与载体处理的I/R心脏相比，去甲乌药碱处理的I/R心脏中凋亡细胞显著减少[1]。在离体灌注小鼠心脏（Langendorff灌注系统，30分钟无血流全局缺血，随后30分钟再灌注）中，灌注去甲乌药碱（100 μM，加入工作缓冲液）可显著降低心肌梗死面积，与载体处理组相比（11.6% vs. 42.7%）。用去甲乌药碱处理可降低裂解的 caspase-3 水平，而 β2-AR 拮抗剂 ICI118551 (0.5 μM) 可消除这种降低。 AKT磷酸化作用因去甲乌药碱而增加，而这种增加作用可被β2-肾上腺素能受体拮抗剂消除[1]。
在健康受试者（8名男性，8名女性；年龄：男性26.1±2.5岁，女性22.4±3.1岁）中，采用双盲、随机、交叉设计（两次独立的给药时间，间隔6-8天，在10小时隔夜禁食后）急性口服含有去甲乌药碱（与270毫克咖啡因和育亨宾树皮提取物组合）的膳食补充剂，导致与安慰剂相比，给药后60分钟（p=0.0004）、120分钟（p=0.0004）和180分钟（p=0.004）的血浆游离脂肪酸（FFA）水平显著升高。与安慰剂组相比，补充剂组在摄入后 60 分钟 (p=0.03) 和 120 分钟 (p=0.02) 时千卡消耗量显著更高，180 分钟时也呈现这种趋势 (p=0.07)。甘油或呼吸交换率 (RER) 未观察到统计学意义上的显著变化。与安慰剂组相比，补充剂组的心率（条件效应 p=0.03）和收缩压（条件效应 p<0.0001）均更高（总体心率升高约 3 次/分，收缩压升高约 12 mmHg）[2]。 |
| 酶活实验 |
采用蛋白质印迹法检测蛋白水平。使用冰冷的改良RIPA缓冲液（含Tris-HCl pH 7.4、NP-40、NaCl、EDTA、PMSF、原钒酸钠、NaF、抑蛋白酶、亮抑蛋白酶和胃蛋白酶抑制剂）制备细胞裂解液。将裂解液上样至SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，电泳后转移至聚偏二氟乙烯膜上。将膜在含0.01% Tween-20的PBS溶液（5%脱脂奶粉）中封闭，4℃孵育一抗过夜，然后与辣根过氧化物酶标记的二抗孵育，最后使用增强型化学发光检测试剂显色。所用一抗包括：裂解型和总caspase 3和9；磷酸化AKT和总AKT。和 GAPDH [1]。
Caspase-3 活性测定：对成年小鼠心室肌细胞进行不同处理后，按照制造商说明测定 caspase-3 活性。简而言之，将 30 μl 细胞裂解液与 80 μl 含有 caspase-3 底物 (Ac-DEVD-pNA) 的反应溶液混合，并在 37°C 下孵育 120 分钟。使用酶标仪在 405 nm 处测量吸光度。酶活性以各组蛋白质浓度标准化的吸光度表示，结果以相对于对照组的倍数表示 [1]。 游离脂肪酸测定：使用脂肪酸检测试剂盒，按照制造商说明测定血浆样品。甘油的测定采用游离甘油测定试剂盒和甘油标准品，并按照制造商的说明进行操作[2]。 间接测热法：采用间接测热法测定千卡消耗量和呼吸交换率（RER）。总耗氧量（L·min⁻¹）通过气体收集测定，并用于估算总千卡消耗量。RER 由气体收集数据（VCO₂/VO₂）测定，作为底物利用率的指标[2]。 |
| 细胞实验 |
新生大鼠心室肌细胞（NRVMs）的分离和培养：从2-3日龄大鼠幼崽中取出心脏，分离心室，并在用含II型胶原酶的HBSS溶液进行多次消化前，用Hank's平衡盐溶液冲洗。通过离心收集细胞，并将其重悬于含5%胎牛血清、5%马血清、青霉素和链霉素的DMEM培养基中。将细胞在37℃预培养1小时以去除非心肌细胞。随后将细胞在含有 10 μM 阿糖胞苷的 DMEM 培养基中于明胶包被的培养板上培养 24 小时，之后换用含有 0.2× 胰岛素-转铁蛋白-硒的无血清 DMEM 培养基 [1]。
成年小鼠心室肌细胞 (AMVM) 的分离和培养：使用 Langendorff 灌注系统，用 II 型胶原酶对小鼠心脏进行酶解。快速取出肝素化和麻醉的小鼠心脏，进行插管，并用不含 Ca²⁺ 的分离缓冲液灌注 3 分钟，然后用 II 型胶原酶混合分离缓冲液灌注直至消化完成。将心肌细胞暴露于终止缓冲液中，使Ca²⁺浓度升高至1.4 mM。将细胞接种于预先包被层粘连蛋白的培养皿中，并加入接种缓冲液。2小时后，将细胞置于预热的培养基中培养，该培养基含有BSA、HEPES、NaHCO₃、青霉素/链霉素、blebbistatin和胰岛素-硒-转铁蛋白，培养基为MEM + Earl氏盐 + L-谷氨酰胺[1]。 台盼蓝染色活力检测：将AMVMs接种于6孔板中。处理后，将细胞与台盼蓝溶液（终浓度0.04%）孵育5分钟，然后在相差倒置显微镜下计数。每个培养皿随机选取30个视野进行定量分析。死亡细胞数以占总计数细胞数的百分比表示[1]。 AMVM 的 TUNEL 染色：将贴壁细胞用 4% 多聚甲醛在室温下固定 1 小时，然后用 0.5% Triton X-100 在室温下透化 1 小时。向每个培养皿中加入 50 μL TUNEL 反应混合物，并在 37°C 下孵育 1 小时。用 PBS 中的 DAPI 在室温下孵育 5 分钟进行核染色。细胞凋亡率以 TUNEL 染色阳性细胞与 DAPI 染色阳性细胞的百分比表示[1]。 Annexin V-FITC/碘化丙啶 (PI) 染色的流式细胞术分析：收集 NRVM，用 PBS 洗涤。根据制造商的说明，使用 Annexin V/PI 检测试剂盒对细胞进行染色。将 Annexin V-FITC (5 μl) 和 PI (10 μl) 添加到 2×10⁵ 个悬浮细胞中，并在 37°C 避光孵育 30 分钟，然后使用流式细胞仪进行分析。仅 Annexin V 阳性的细胞和 Annexin V 和 PI 同时阳性的细胞分别被认为是早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞 [1]。 |
| 动物实验 |
小鼠体内缺血/再灌注损伤模型：C57BL/6J雄性小鼠通过结扎左心耳尖下方的左前降支动脉（LAD）建立缺血模型。心电图ST段抬高和颜色变化证实LAD闭塞。闭塞30分钟后，解开缝线进行再灌注，并缝合胸腔和皮肤切口。再灌注24小时后，在相同位置再次结扎LAD。用2%伊文思蓝灌注心脏以标示危险区域，并用1% 2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色心脏组织切片以显示梗死区域。术前2小时腹腔注射去甲乌药碱（10 mg/kg体重）或生理盐水[1]。
离体缺血/再灌注损伤（Langendorff灌注小鼠心脏）：C57BL/6J雄性小鼠心脏采用Langendorff灌注模式，以充氧的Krebs-Henseleit缓冲液进行灌注。心脏以4 ml/min的流速稳定20分钟，然后进行30分钟的无血流全局缺血，最后进行30分钟的再灌注。在I/R + 去甲乌药碱组中，向工作缓冲液中添加100 μM去甲乌药碱。在I/R + 去甲乌药碱 + ICI组中，向工作缓冲液中添加0.5 μM ICI118551和100 μM去甲乌药碱。采用1% TTC染色法对存活组织进行心肌坏死评估[1]。 人体研究方案：8名健康且训练有素的男性和8名女性参与了一项双盲、随机、交叉设计的研究。受试者在禁食10小时（隔夜禁食）且禁咖啡因24小时后到达实验室。测试分两次进行，两次测试间隔6-8天，均在同一时间进行。受试者服用膳食补充剂（两粒胶囊，含有270毫克去甲乌药碱、育亨宾树皮提取物和咖啡因的专利配方）或安慰剂（微晶纤维素胶囊）。服药后3小时内禁止进食，但可随意饮水，两次测试日的饮水量相同。受试者在整个3小时测试期间保持静止不动。分别在摄入前、摄入后 30、60、120 和 180 分钟，测量心率（通过 60 秒桡动脉触诊）和血压（通过听诊），采集血样，并收集 5 分钟呼吸样本。受试者被要求在每次测试日前 48 小时内不要运动或进行剧烈的体力活动，并在两次测试日前 24 小时内保持相同的食物和饮料摄入量 [2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在人体试验中，急性口服含有去甲乌药碱（与咖啡因和育亨宾树皮提取物组合）的膳食补充剂，导致心率（约3次/分）和收缩压（约12 mmHg）中度升高。受试者未出现不良反应，仅观察到心率和血压中度升高。该补充剂耐受性良好[2]。动物注射去甲乌药碱的致死剂量（LD₅₀）为50 mg/kg，表明口服的急性毒性风险较低[2]。据报道，去甲乌药碱给药实际上可以降低动物的血压，并且经急性静脉注射后，认为其对人体安全[2]。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
(RS)-去甲可卡因是一种去甲可卡因，它是(RS)-去甲可卡因的共轭碱。去甲可卡因目前正在临床试验NCT01451229（健康中国受试者中去甲可卡因的药代动力学和药效学研究）中进行研究。据报道，去甲可卡因存在于山金车花（Gnetum montanum）、小叶金车花（Gnetum parvifolium）以及其他一些具有相关数据的生物体中。
心肌细胞凋亡是缺血性心脏损伤和心力衰竭发生发展的重要因素。β-肾上腺素能受体（β-AR）信号的长期激活调节心肌细胞肥大和存活。β1-AR激活对心肌细胞具有促凋亡作用，而β2-AR激活则具有抗凋亡作用。 β2-肾上腺素能受体（β2-AR）的激活还能激活百日咳毒素敏感的Gi信号通路，进而激活PI3K/AKT信号级联，促进心肌细胞存活[1]。 去甲乌药碱已被证实对包括心肌细胞在内的多种细胞类型具有抗凋亡作用。它能减轻阿霉素诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡，并通过上调血红素加氧酶-1（HO-1）来保护心脏免受缺血/再灌注（I/R）损伤。它还能刺激PI3K/AKT/Nrf2信号通路，进而诱导HO-1表达，这对于拮抗C6诱导的细胞凋亡和缺氧诱导的脑损伤至关重要[1]。 去甲乌药碱可能通过激活β-AR信号通路发挥正性变时性和变力性作用。它作为β2-AR激动剂，可拮抗支气管收缩。该化合物还具有血管舒张作用[1]。 去甲乌药碱被用作减肥膳食补充剂的成分。β-肾上腺素能受体激动剂可增强脂肪分解和产热作用，而去甲乌药碱作为一种β-肾上腺素能受体激动剂，可被视为一种抗肥胖剂。咖啡因和育亨宾树皮提取物常与去甲乌药碱联合用于补充剂中，以增强其脂肪分解和产热作用[2]。 |
| 分子式 |
C16H17NO3
|
|---|---|
| 分子量 |
271.3111
|
| 精确质量 |
271.12
|
| CAS号 |
5843-65-2
|
| 相关CAS号 |
Higenamine hydrochloride;11041-94-4;(S)-Higenamine hydrobromide;105990-27-0;(S)-Higenamine;22672-77-1
|
| PubChem CID |
114840
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
522.4±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
208-210℃
|
| 闪点 |
209.6±20.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.666
|
| LogP |
1.41
|
| tPSA |
72.72
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
20
|
| 分子复杂度/Complexity |
317
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
WZRCQWQRFZITDX-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H17NO3/c18-12-3-1-10(2-4-12)7-14-13-9-16(20)15(19)8-11(13)5-6-17-14/h1-4,8-9,14,17-20H,5-7H2
|
| 化学名 |
1-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-6,7-diol
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6858 mL | 18.4291 mL | 36.8582 mL | |
| 5 mM | 0.7372 mL | 3.6858 mL | 7.3716 mL | |
| 10 mM | 0.3686 mL | 1.8429 mL | 3.6858 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
