LXW7

目录号: V33261 纯度: ≥98%
LXW7 是一种新型有效的八聚体二硫环肽,可作为 αvβ3 整合素抑制剂。
LXW7 CAS号: 1313004-77-1
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
1g
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  • LXW7 TFA
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产品描述
LXW7 是一种新型有效的八聚体二硫环肽,可作为 αvβ3 整合素抑制剂。也是内皮祖细胞 (EPC) 和内皮细胞 (EC) 的配体。
生物活性&实验参考方法
靶点
LXW7 (cGRGDdvc) is a cyclic RGD peptide that targets and binds to the αvβ3 integrin with high affinity.
IC₅₀ for inhibiting Echistatin-FITC binding to αvβ3-K562 cells: 0.68 ± 0.08 μM.
Also shows weak binding to αvβ5 and αIIbβ3 integrins, but no binding to α5β1 (K562 parent cells). [1]
体外研究 (In Vitro)
LXW7 选择性结合 αvβ3 整合素 (Kd=76±10 nM)。 LXW7 显着附着于 αvβ3-K562 细胞,与 αvβ5-K562 细胞和 αIIbβ3-K562 细胞弱结合,不与 K562 细胞结合。 LXW7 作为一种用于靶向成像和药物输送的高效肽配体具有相当大的潜力[1]。 LXW7 作为一种有效且特异性的内皮祖细胞 (EPC) 和内皮细胞 (EC) 靶向配体 [2]。
在测试的肽段(LXW1-8)中,LXW7对αvβ3整合素表现出最高的结合亲和力,在使用Echistatin-FITC的竞争性结合实验中IC₅₀为0.68 ± 0.08 μM。
生物素化的LXW7(LXW7-Bio)对αvβ3整合素显示出近乎相同的结合亲和力(IC₅₀ = 0.62 ± 0.07 μM),而其他生物素化的RGD环五肽亲和力下降了2至8倍。
LXW7与表达αvβ3整合素的肿瘤细胞系(包括U-87MG胶质母细胞瘤和A375M黑色素瘤细胞)强结合。
抗αvβ3抗体(LM609)能显著阻断生物素化LXW7与U-87MG和A375M细胞的结合,证实了其特异性。
LXW7对U-87MG、A375M和αvβ3-K562细胞的结合亲和力(Kd)相似,在72-89 nM范围内。[1]
体内研究 (In Vivo)
用 LXW7(100 μg/kg;静脉注射)治疗的大鼠脑含水量 (BWC) 和梗塞体积显着降低。 LXW7 治疗可降低促炎细胞因子的表达 [3]。
在携带U-87MG胶质母细胞瘤或A375M黑色素瘤异种移植瘤的裸鼠中,静脉注射四价成像复合物(生物素化LXW7/链霉亲和素-Cy5.5)后6小时,与单独的链霉亲和素-Cy5.5对照相比,荧光信号在肿瘤中特异性积累。
离体成像证实了基于LXW7的复合物在肿瘤中的高摄取。
在U-87MG异种移植模型中,与生物素化的环状RGD五肽(cyclo(RGDfE)、cyclo(RGDfK)、cyclo(RGDyK))相比,生物素化LXW7显示出更高的肿瘤摄取和显著更低的肝脏摄取。
U-87MG异种移植瘤冷冻切片的共聚焦显微镜检查显示,LXW7也分布于CD31阳性的新生血管中。[1]
细胞实验
流式细胞术竞争性结合实验: 为测定IC₅₀,将不同浓度的LXW7与2 μM Echistatin-FITC预混合,并与αvβ3-K562细胞在结合缓冲液(含10% FBS和1 mM MnCl₂的PBS)中于冰上孵育30分钟。用流式细胞仪分析细胞,并使用GraphPad Prism软件计算IC₅₀。
细胞染色与特异性实验: 为测试结合,将1 μM生物素化LXW7与各种整合素转染的K562细胞(αvβ3、αvβ5、αIIbβ3)及亲本K562细胞在冰上孵育30分钟。洗涤细胞后,与链霉亲和素-PE孵育,并进行流式细胞术分析。
阻断实验: 为确认特异性,将10 μg抗人αvβ3抗体(LM609)与1 μM生物素化LXW7预混合,然后与U-87MG或A375M细胞孵育,接着进行链霉亲和素-PE孵育和流式细胞术分析。[1]
动物实验
动物/疾病模型:雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(250-280 g)接受大脑中动脉闭塞(MCAO)[3]
剂量:100 μg/kg
给药途径:静脉注射(iv)
实验结果:与对照组MCAO+PBS组相比,梗死体积和BWC显著减少。
肿瘤异种移植模型建立:将5×10⁶个U-87MG或A375M肿瘤细胞悬浮于200 μL PBS中,皮下注射到5-6周龄雌性无胸腺裸鼠的右侧腹部。当肿瘤直径达到 0.5-1.0 cm 时(21-28 天后),开始进行成像研究。
体内光学成像:小鼠麻醉后,将 7.2 nmol 生物素化肽(LXW7 或对照肽)与 1.8 nmol 链霉亲和素-Cy5.5 在 PBS 中混合,于 4°C 孵育过夜,制备四价成像复合物。将 1.8 nmol 该复合物经尾静脉注射。注射后 6 小时,使用 Kodak IS2000MM 成像系统采集光学图像。
体外成像:体内成像后处死小鼠,取出器官(肿瘤、肝脏、肾脏等)进行体外荧光成像。[1]
药代性质 (ADME/PK)
体内成像数据显示,注射后6小时,LXW7-生物素/链霉亲和素-Cy5.5复合物在肿瘤中积聚,并在肾脏中也检测到。与其他RGD环五肽相比,肝脏摄取量明显较低。[1]
参考文献

[1]. The use of one-bead one-compound combinatorial library technology to discover high-affinity αvβ3 integrin and cancer targeting arginine-glycine-aspartic acid ligands with a built-in handle. Mol Cancer Ther. 2010 Oct;9(10):2714-23.

[2]. Discovery and Characterization of a Potent and Specific Peptide Ligand Targeting Endothelial Progenitor Cells and Endothelial Cells for Tissue Regeneration. ACS Chem Biol. 2017 Apr 21;12(4):1075-1086.

[3]. LXW7 ameliorates focal cerebral ischemia injury and attenuates inflammatory responses in activated microglia in rats. Braz J Med Biol Res. 2016 Aug 1;49(9):e5287.

其他信息
LXW7(环状 cGRGDdvc)是一种二硫键环化的 RGD 肽,通过对 αvβ3 整合素转染的 K562 细胞进行单珠单化合物 (OBOC) 组合筛选而发现。
其 C 端含有一个内置的“手柄”(PEG 连接子),这使得其能够与其他分子偶联(例如生物素化),而不会显著降低结合亲和力,这是其优于传统“头尾相连”环状 RGD 肽的关键优势。
分子对接模拟表明,LXW7 中 RGD 基序相邻的 D-Asp 残基与 β 亚基中的 Arg214 形成盐桥,其 C 端羰基可能与 ADMIDAS 位点中的 Ca²⁺ 配位,这可能有助于其特异性结合和计算出的有利相互作用能。
它被认为是一种有前景的分子成像靶向配体。将药物递送至表达αvβ3整合素的肿瘤和肿瘤新生血管。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C29H48N12O12S2
分子量
820.894622802734
精确质量
820.295
CAS号
1313004-77-1
相关CAS号
LXW7 TFA
PubChem CID
89667563
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
LogP
-8.5
tPSA
462
氢键供体(HBD)数目
13
氢键受体(HBA)数目
16
可旋转键数目(RBC)
10
重原子数目
55
分子复杂度/Complexity
1480
定义原子立体中心数目
6
SMILES
CC(C)[C@@H]1C(=O)N[C@H](CSSC[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C(=O)N1)CC(=O)O)CC(=O)O)CCCN=C(N)N)N)C(=O)N
InChi Key
UUJIUMRQOUEUEJ-NBJCVSNRSA-N
InChi Code
InChI=1S/C29H48N12O12S2/c1-12(2)22-28(53)40-17(23(31)48)11-55-54-10-13(30)24(49)35-8-18(42)37-14(4-3-5-34-29(32)33)25(50)36-9-19(43)38-15(6-20(44)45)26(51)39-16(7-21(46)47)27(52)41-22/h12-17,22H,3-11,30H2,1-2H3,(H2,31,48)(H,35,49)(H,36,50)(H,37,42)(H,38,43)(H,39,51)(H,40,53)(H,41,52)(H,44,45)(H,46,47)(H4,32,33,34)/t13-,14+,15+,16-,17-,22-/m1/s1
化学名
2-[(4S,7R,10R,13S,19S,25S)-25-amino-4-carbamoyl-10-(carboxymethyl)-19-[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-6,9,12,15,18,21,24-heptaoxo-7-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23-heptazacyclohexacos-13-yl]acetic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.2182 mL 6.0910 mL 12.1819 mL
5 mM 0.2436 mL 1.2182 mL 2.4364 mL
10 mM 0.1218 mL 0.6091 mL 1.2182 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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