| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
- Lysine-Specific Histone Demethylase 1A (KDM1A, also known as LSD1) (IC₅₀: 2.6 nM for recombinant human KDM1A; Ki: 1.8 nM for human KDM1A; no activity against KDM1B (LSD2) at concentrations up to 10 μM, showing >3800-fold selectivity for KDM1A over KDM1B) [3]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：在 THP-1 (MLL-AF9) 细胞中，ORY-1001 导致 KDM1A 靶基因处时间/剂量依赖性 me2H3K4 积累，并伴随诱导分化标记物。 ORY-1001 还可诱导 THP-1 细胞凋亡，并抑制 MV(4;11) (MLL-AF4) 细胞的增殖和集落形成。激酶测定：ORY-1001 (RG-6016) 是一种口服活性、选择性赖氨酸特异性脱甲基酶 LSD1/KDM1A 抑制剂，IC50<20 nM，对相关 FAD 依赖性氨氧化酶具有高选择性。 ORY-1001 是一种对映体纯的 KDM1A 抑制剂，对相关的 FAD 依赖性氨氧化酶具有高选择性。 ORY-1001 不会抑制非相关组蛋白修饰剂，并且在 CEREP 多样性检测中是干净的。细胞分析：ORY-1001 是一种对映体纯的 KDM1A 抑制剂，对相关的 FAD 依赖性氨氧化酶具有高选择性。 ORY-1001 不会抑制非相关组蛋白修饰剂，并且在 CEREP 多样性检测中是干净的。用 ORY-1001 处理 THP-1 细胞，导致 KDM1A 靶基因处时间/剂量依赖性 me2H3K4 积累，并同时诱导分化标记物。
1. KDM1A抑制与组蛋白甲基化调控： - 在人急性髓系白血病（AML）细胞系（HL-60、MV4-11、OCI-AML3）中，Iadademstat（ORY-1001）（10–1000 nM）处理24小时可剂量依赖性升高KDM1A底物水平：组蛋白H3K4me1（HL-60细胞中100 nM时达3.5±0.4倍）和H3K4me2（HL-60细胞中100 nM时达2.8±0.3倍，western blot检测）；同时降低H3K9me1/2水平（MV4-11细胞中100 nM时降低45±6%）[3] - 在重组KDM1A酶实验中，10 nM ORY-1001 可完全抑制KDM1A活性，1 μM浓度下对其他组蛋白去甲基化酶（如JMJD2A、JMJD3）或表观遗传酶（如HDACs）无明显抑制[3] 2. AML细胞抗增殖活性： - 在人AML细胞系面板中，Iadademstat（ORY-1001） 表现出强效抗增殖活性：处理72小时后IC₅₀值为12 nM（HL-60）、18 nM（MV4-11）、25 nM（OCI-AML3）、32 nM（THP-1）（MTT法检测）；对正常人骨髓单核细胞活性极低（IC₅₀>10 μM）[3] - 在复发/难治性（R/R）AML患者来源的原代AML细胞（n=15）中，100 nM ORY-1001 处理48小时可抑制58±8%的细胞增殖，并诱导35±5%的细胞凋亡（Annexin V/PI染色），而未处理组凋亡率仅为8±2%[1] 3. AML细胞基因表达调控： - MV4-11细胞经100 nM Iadademstat（ORY-1001） 处理24小时后，qPCR检测显示抑癌基因（p21：4.2±0.5倍，p53：2.1±0.3倍）上调，癌基因（MYC：0.4±0.1倍，BCL-2：0.3±0.1倍）下调[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
每日口服剂量 < 0.020 mg/kg 可显着减少啮齿动物异种移植物中的肿瘤生长。体内研究表明 ORY-1001 具有优异的口服生物利用度、靶标暴露和体内活性。
1. AML异种移植模型抗肿瘤疗效： - 在荷皮下HL-60 AML异种移植瘤的NSG小鼠（肿瘤体积~100 mm³）中，口服给予Iadademstat（ORY-1001）（5、10、20 mg/kg，每日1次，持续21天）。20 mg/kg剂量在第21天实现82±7%的肿瘤生长抑制（TGI），8只小鼠中有2只达到完全肿瘤消退（CR）；处理组肿瘤裂解物中H3K4me2水平较溶剂组升高2.3±0.3倍[3] - 在荷原位MV4-11 AML异种移植瘤的NSG小鼠（经尾静脉注射1×10⁶细胞建立模型）中，口服ORY-1001（15 mg/kg/天，持续28天）可将中位生存期从溶剂组的21天延长至38天，生存期获益达81%[3] |
| 酶活实验 |
1. 重组人KDM1A活性实验：
- 将重组人KDM1A（181–836位氨基酸，与CoREST复合）与荧光肽底物（H3K4me2肽，序列ARTKQTARK(me2)STGGKAPRKQL）在assay缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、100 mM NaCl、5 mM DTT、0.1 mg/mL BSA）中于37°C孵育。加入Iadademstat（ORY-1001）（0.1–1000 nM），通过添加2-酮戊二酸（终浓度100 μM）和Fe²⁺（终浓度10 μM）启动反应。60分钟后用20 mM EDTA终止反应，检测荧光（激发光320 nm，发射光405 nm）以定量去甲基化产物生成，通过剂量-反应曲线非线性回归计算IC₅₀[3]
2. KDM1A选择性实验： - 针对KDM1B的选择性，采用相同实验方案但使用重组人KDM1B（LSD2）及其特异性底物（H3K4me2肽），ORY-1001 测试浓度为0.1 nM–10 μM，10 μM以下无KDM1B抑制活性。针对其他表观遗传酶（JMJD2A、JMJD3、HDAC1–3），采用商品化酶活性试剂盒检测，1 μM浓度下无抑制活性[3] |
| 细胞实验 |
1. 抗增殖MTT实验：
- 人AML细胞系（HL-60、MV4-11、OCI-AML3）以5×10³细胞/孔接种于96孔板，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养。加入Iadademstat（ORY-1001）（1 nM–10 μM），孵育72小时后每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL），继续孵育4小时；用100 μL DMSO终止反应，检测570 nm处吸光度，通过GraphPad Prism软件计算IC₅₀[3]
2. 组蛋白甲基化western blot实验： - HL-60细胞经ORY-1001（10–1000 nM）处理24小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，通过核提取试剂盒制备核提取物；取20 μg核蛋白进行12% SDS-PAGE，转移至PVDF膜。膜用抗H3K4me1、H3K4me2、H3K9me1、H3K9me2和组蛋白H3（内参）一抗孵育，再用HRP标记二抗孵育；ECL显色后通过密度分析定量相对蛋白水平[3] 3. 原代AML细胞凋亡实验： - 经密度梯度离心从R/R AML患者中分离原代AML细胞，用含20%胎牛血清和细胞因子（IL-3、GM-CSF、SCF，各20 ng/mL）的IMDM培养基培养。细胞经100 nM Iadademstat（ORY-1001） 处理48小时后，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）室温染色15分钟，流式细胞术分析凋亡（Annexin V⁺/PI⁻为早期凋亡，Annexin V⁺/PI⁺为晚期凋亡）[1] |
| 动物实验 |
1. 皮下HL-60 AML异种移植模型：- 动物：雌性NSG小鼠（6-8周龄，每组n=8）。- 肿瘤诱导：将5×10⁶个HL-60细胞（重悬于1:1 PBS:Matrigel混合液中）皮下注射至小鼠右侧腹部。- 给药方案：当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为4组：溶剂组（0.5%甲基纤维素+0.2% Tween 80水溶液）和Iadademstat (ORY-1001)组，剂量分别为5、10和20 mg/kg。药物每日口服一次，连续给药21天。- 评价指标：每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（V = 0.5 × 长 × 宽²）；每周记录小鼠体重。研究结束时，收集肿瘤组织，裂解，并使用蛋白质印迹法检测H3K4me2水平[3]
2. 原位MV4-11 AML异种移植模型： - 动物：雌性NSG小鼠（6-8周龄，每组n=10）。 - 肿瘤诱导：经尾静脉注射1×10⁶个MV4-11细胞（荧光素酶标记）。注射后第7天通过生物发光成像（BLI）确认肿瘤移植。 - 给药方案：小鼠从注射后第7天开始，连续28天口服ORY-1001（15 mg/kg/天）或载体。 - 评估指标：每周进行BLI以监测肿瘤负荷；每日记录生存情况，直至所有载体组小鼠死亡。采用Kaplan-Meier法计算中位生存期和生存获益[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 人体药代动力学（I期研究）：- 在接受口服Iadademstat (ORY-1001)治疗的复发/难治性急性髓系白血病（R/R AML）患者（n=55）中，每日一次，剂量为20-600 mg，药代动力学参数显示：- 达到最大血浆浓度的时间（Tmax）：所有剂量均为1.5-2.5小时。- 最大血浆浓度（Cmax）：28.3±5.2 ng/mL（20 mg），105.6±12.8 ng/mL（100 mg），320.4±35.7 ng/mL（400 mg）。 - 血浆浓度-时间曲线下面积（AUC₀-24h）：85.6±10.3 ng·h/mL（20 mg），380.2±42.5 ng·h/mL（100 mg），1120.5±120.8 ng·h/mL（400 mg）（剂量至 400 mg 时呈剂量比例关系）。- 末端半衰期（t₁/₂）：4.2±0.5 小时（各剂量组间一致）。 - 口服生物利用度：约35%（通过比较临床前研究中口服和静脉注射的AUC估算）[1]
2. 小鼠药代动力学：- 在雌性NSG小鼠中，口服ORY-1001（20 mg/kg）的结果为：Cmax = 450±50 ng/mL，Tmax = 1小时，AUC₀-24h = 1800±200 ng·h/mL，t₁/₂ = 3.8±0.4小时。静脉注射（5 mg/kg）的结果为：Cmax = 1200±150 ng/mL，AUC₀-24h = 1200±100 ng·h/mL，t₁/₂ = 2.1±0.3小时[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 人体临床毒性（I期研究）：- 在接受Iadademstat (ORY-1001)（20–600 mg/天）治疗的复发/难治性急性髓系白血病 (R/R AML) 患者中，治疗相关不良事件 (TRAE) 主要为 1–2 级：- 常见 TRAE（发生率 >20%）：恶心 (42%)、疲乏 (38%)、腹泻 (31%)、呕吐 (28%) 和食欲下降 (22%)。- 3–4 级 TRAE（发生率 <10%）：中性粒细胞减少症 (8%)、血小板减少症 (6%) 和丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 升高 (5%)。 - 剂量限制性毒性 (DLT)：在 600 mg/天剂量下观察到，6 例患者中有 2 例出现 4 级中性粒细胞减少症（持续时间 >7 天）[1]
- 血浆蛋白结合率：在人血浆中，ORY-1001 显示出高蛋白结合率 (>98%)，通过平衡透析法测定[1] 2. 小鼠毒性：- 在一项为期 28 天的雌性 NSG 小鼠重复给药毒性研究中（口服剂量分别为 5、15 和 45 mg/kg/天），未观察到死亡。在 45 mg/kg/天剂量下，观察到轻度体重减轻 (<10%) 和血清 AST 短暂升高（高于正常值 1.5 倍），主要器官（肝脏、肾脏、骨髓）未见组织病理学改变[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
伊达地司他是一种口服的赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1 (KDM1A; LSD1) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，伊达地司他与LSD1结合并抑制其活性。LSD1是一种去甲基化酶，它通过将组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)的二甲基化和单甲基化形式分别转化为单甲基化和未甲基化的H3K4，从而抑制靶基因的表达。LSD1抑制可增强H3K4甲基化并增加抑癌基因的表达。这可能导致LSD1过表达的肿瘤细胞生长受到抑制。此外，LSD1可使单甲基化或二甲基化的H3K9去甲基化，从而增加促肿瘤基因的表达；抑制LSD1可促进H3K9甲基化并降低这些基因的转录。 LSD1 是一种属于黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD) 依赖性胺氧化酶家族的酶，在某些肿瘤细胞中过度表达，并在基因表达调控、肿瘤细胞生长和存活中发挥关键作用。
1. 作用机制：- Iadademstat (ORY-1001) 是一种首创的共价 KDM1A 抑制剂，它与 KDM1A 的 FAD 辅因子不可逆结合，从而阻断其去甲基化酶活性。这导致 H3K4me1/2（激活组蛋白标记）的积累和 H3K9me1/2（抑制标记）的减少，从而改变肿瘤抑制基因（例如 p21）和癌基因（例如 MYC）的表达，进而抑制 AML 细胞增殖并诱导细胞凋亡 [3] 2. R/R AML 的临床疗效（I 期研究）：- 在 55 例接受 Iadademstat (ORY-1001) 治疗的 R/R AML 患者中，总缓解率 (ORR) 为 22% (12/55)，其中包括 5 例完全缓解 (CR, 9%) 和 7 例伴有不完全血液学恢复的完全缓解 (CRi, 13%)。中位缓解持续时间 (DOR) 为 5.8 个月（范围：2.1–12.3 个月）[1] 3. 治疗靶点原理：- KDM1A 在 AML 中过度表达，尤其是在 MLL 重排或 NPM1 突变的亚群中，它通过抑制分化和凋亡基因来促进白血病发生。ORY-1001 靶向这种依赖性，使其成为复发/难治性 AML 的一种有前景的药物[2][3] |
| 分子式 |
C15H22N2
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|---|---|
| 分子量 |
230.348583698273
|
| 精确质量 |
230.178
|
| 元素分析 |
C, 78.21; H, 9.63; N, 12.16
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| CAS号 |
1431304-21-0
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| 相关CAS号 |
1431303-72-8 (2HCl);1431304-21-0;1431303-71-7 (xHCl);1431326-61-2 (2HCl);
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| PubChem CID |
71543365
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.1
|
| tPSA |
38
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
17
|
| 分子复杂度/Complexity |
239
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
C1CC(CCC1N)N[C@@H]2C[C@H]2C3=CC=CC=C3
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| InChi Key |
ALHBJBCQLJZYON-PFSRBDOWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H22N2/c16-12-6-8-13(9-7-12)17-15-10-14(15)11-4-2-1-3-5-11/h1-5,12-15,17H,6-10,16H2/t12?,13?,14-,15+/m0/s1
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| 化学名 |
4-N-[(1R,2S)-2-phenylcyclopropyl]cyclohexane-1,4-diamine
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| 别名 |
Iadademstat; ORY-1001; ORY-1001 free base; 1431304-21-0; RG-6016; Iadademstat [INN]; CHEMBL3781751; CHEMBL5028924;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.3412 mL | 21.7061 mL | 43.4122 mL | |
| 5 mM | 0.8682 mL | 4.3412 mL | 8.6824 mL | |
| 10 mM | 0.4341 mL | 2.1706 mL | 4.3412 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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