| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CCR2
(s)-PF-4136309 is an inactive isomer that does not bind effectively to the chemokine receptor CCR2 (C-C chemokine receptor type 2). CCR2 is a G-protein-coupled receptor (GPCR) expressed on monocytes and macrophages, and it is a key mediator of inflammation. Its endogenous ligand is MCP-1 (CCL2). The active (R)-enantiomer acts as a potent, reversible, and competitive antagonist of CCR2, blocking the recruitment of inflammatory cells. Because the (S)-enantiomer cannot form the necessary stereospecific interactions with the receptor's orthosteric binding pocket, it is considered an inactive control compound and does not inhibit MCP-1-induced chemotaxis, calcium flux, or ERK phosphorylation. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：PF-4136309 在人趋化活性（IC50 = 3.9 nM）和全血趋化活性（IC50 = 19 nM）中均表现出活性。在小鼠和大鼠趋化活性测定中，其 IC50 值分别为 16 nM 和 2.8 nM。PF-4136309 对 CCR2 介导的信号通路（包括细胞内钙动员和 ERK（细胞外信号调节激酶）磷酸化）具有强效抑制作用，其 IC50 值分别为 3.3 nM 和 0.5 nM。在 hERG 膜片钳实验中，PF-4136309 以 20 μM 的 IC50 值抑制 hERG 钾电流。 PF-4136309 对五种主要 CYP 同工酶 CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 和 CYP3A4 的 IC50 值均大于 30 μM，因此它不是细胞色素 P450 (CYP) 抑制剂。此外，在浓度高达 30 μM 时，PF-4136309 也不是 CYP 诱导剂[1]。
活性(R)-对映体(PF-4136309)表现出强效的体外活性，在基于膜的结合实验中，其对人、小鼠和大鼠CCR2的IC50值分别为5.2 nM、17 nM和13 nM。它还能有效抑制人单核细胞(IC50 = 3.9 nM)和全血(IC50 = 19 nM)中MCP-1诱导的趋化作用。在基于细胞的功能性实验中，它能阻断CCR2介导的细胞内钙动员(IC50 = 3.3 nM)和ERK磷酸化(IC50 = 0.5 nM)。据报道，(S)-对映体无活性(IC50 > 10 uM)，用作阴性对照，以验证观察到的生物学效应是由特异性靶点结合而非非特异性化合物相互作用引起的。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PF-4136309（2 mg/kg）在两种动物中静脉注射后均表现出中等的半衰期（分别为 2.5 小时和 2.4 小时）。口服 PF-4136309（10 mg/kg）后吸收迅速，大鼠和犬的血药峰浓度时间（Tmax）分别为 1.2 小时和 0.25 小时。两种动物静脉注射和口服给药后，半衰期相似。PF-4136309 在两种动物中均表现出较高的口服生物利用度，为 78%[1]。
活性(R)-对映体已在多种炎症性疾病的体内模型中进行了评估。在迟发型超敏反应(DTH)小鼠模型中，口服PF-4136309可有效抑制耳肿胀（ED50 = 4.5 mg/kg）。在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型中，PF-4136309显著减轻了爪肿胀并降低了疾病评分。此外，PF-4136309在多发性硬化症(EAE)和同种异体移植排斥反应模型中也显示出疗效。该化合物具有良好的口服生物利用度，目前已进入治疗胰腺肿瘤和多种炎症性疾病的人体临床试验阶段。(S)-对映体在这些模型中无活性，可作为重要的阴性对照。 |
| 酶活实验 |
采用标准放射性配体结合试验测定活性对映体与CCR2的结合亲和力。将表达人、小鼠或大鼠CCR2的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞膜与[125I]-MCP-1或放射性标记的小分子拮抗剂在不同浓度的待测化合物存在下孵育。室温孵育1-2小时后，通过快速过滤到玻璃纤维滤膜上终止反应。洗涤滤膜并计数残留放射性。采用竞争性结合模型，通过非线性回归计算IC50和Ki值。为保持化合物溶解度，试验中DMSO的最终浓度为1%。对于(S)-对映体，饱和结合实验证实，即使在最高测试浓度（高达30 uM）下，放射性配体的置换也微乎其微。
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| 细胞实验 |
为评估 CCR2 拮抗作用，可进行体外细胞功能性检测。最常用的方法是趋化性检测，使用人外周血单核细胞 (PBMC) 或 THP-1 细胞。将细胞与荧光染料结合，置于 Transwell 小室（孔径 5 um）的上室。下室含有 10 nM MCP-1 (CCL2) 和不同浓度的待测化合物的缓冲液。在 37℃ 下孵育 1-2 小时后，使用荧光酶标仪定量迁移至下室的细胞数量。IC50 值由剂量反应曲线计算得出。另一种功能性检测方法是测量 MCP-1 诱导的细胞内钙离子流。将细胞与钙敏感染料（例如 Fluo-4 AM）结合，在有或无待测化合物的情况下，加入激动剂后，使用荧光成像酶标仪 (FLIPR) 实时监测荧光信号。
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| 动物实验 |
体内疗效通常使用活性 (R)-对映体在硫代乙醇酸盐诱导的小鼠腹膜炎模型中进行测试。雌性 BALB/c 小鼠腹腔注射 (ip) 1 mL 4% 无菌硫代乙醇酸盐溶液。4 小时后，小鼠经口灌胃给予测试化合物或溶剂对照。20 小时后，处死小鼠，并用 5 mL PBS 灌洗腹腔。收集灌洗液，通过流式细胞术分析浸润的单核细胞/巨噬细胞 (CD11b+) 的数量。计算抑制单核细胞募集的 ED50 值。对于肿瘤模型，将人胰腺癌细胞（例如 BxPC-3、MIAPaCa-2）原位或皮下植入免疫缺陷小鼠体内，并每日口服给药。通过监测肿瘤体积、转移情况和生存期来评估疗效。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
体外ADME（吸收、分布、代谢和排泄）分析表明，化合物17（INCB8761/PF-4136309）在Caco-2单层细胞上具有中等渗透性，渗透系数为3.1 × 10⁻⁶ cm/s。在蛋白结合试验中，化合物17在人血清中的游离分数为23%。与人肝微粒体孵育后，化合物17表现出中等的固有清除率，半衰期（t₁/₂）为89分钟。在有或无NADPH和辅因子谷胱甘肽的情况下，化合物17与人S9蛋白孵育时均未检测到谷胱甘肽加合物。化合物 17 不是细胞色素 P450 (CYP) 抑制剂，其对五种主要 CYP 同工酶 CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 和 CYP3A4 的 IC50 值均大于 30 μM。化合物 17 在浓度高达 30 μM 时也不是 CYP 诱导剂。[1] 在大鼠和犬中评估了化合物 17 (INCB8761/PF-4136309) 的药代动力学（表 4）。静脉注射化合物 17 后，大鼠的总系统清除率中等，而犬的总系统清除率较低。表观稳态分布容积 (Vss) 与清除率的变化趋势相同，大鼠的 Vss 较高，犬的 Vss 较低。因此，静脉注射后，化合物 17 在两种动物中均表现出中等的半衰期（分别为 2.5 小时和 2.4 小时）。口服给药后，化合物 17 被迅速吸收，大鼠和犬的达峰时间 (Tmax) 分别为 1.2 小时和 0.25 小时。静脉注射和口服给药的半衰期在两种动物中相似。化合物 17 吸收良好，两种动物的口服生物利用度均为 78%。[1]
活性(R)-对映体表现出优异的药代动力学性质：在水性缓冲液中溶解度高（>10 mg/mL），在人血浆中具有较高的游离药物比例（23%），且代谢稳定。在小鼠体内，该化合物的血浆半衰期(t1/2)为2.6小时，清除率(Cl)为23 mL/min/kg，口服生物利用度(F%)为46%。它并非主要CYP450同工酶的强效抑制剂(IC50 > 30 μM)或诱导剂，从而降低了药物相互作用的风险。预计非活性(s)-PF-4136309异构体具有非常相似的吸收和分布特性，但缺乏驱动其(R)-对映体药理活性的特异性靶点结合。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该化合物的毒性特征源自其活性对映体。PF-4136309 具有良好的临床前安全性，无显著的脱靶活性。它对其他趋化因子受体（CCR1、CCR3、CCR5、CXCR4）具有很高的选择性（>100倍）。在 hERG（人醚-a-go-go 相关基因）膜片钳实验中，其 IC50 为 20 μM，表明在治疗剂量下 QT 间期延长的风险较低。该化合物在 Ames 试验中未显示遗传毒性，且在浓度高达 30 μM 时对正常人细胞系也未显示显著的细胞毒性。由于其化学结构相似，非活性 (S)-对映体预计具有良好的毒性特征，不具有拮抗剂的机制性毒性。作为对照化合物，它在标准实验室安全条件下进行操作。
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| 参考文献 |
[1]. Xue CB, et al. Discovery of INCB8761/PF-4136309, a Potent, Selective, and Orally Bioavailable CCR2 Antagonist. ACS Med. Chem. Lett., 2011, 2 (12), pp 913-918.
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| 其他信息 |
已发现一类新型的(S)-3-氨基吡咯烷类CCR2拮抗剂。对该系列化合物进行了构效关系研究，最终筛选出化合物17（INCB8761/PF-4136309），该化合物具有强效的CCR2拮抗活性、高选择性、弱hERG活性以及优异的体外和体内ADMET性质。INCB8761/PF-4136309已进入人体临床试验阶段。[1]
(s)-PF-4136309 是一种用于解析 CCR2 信号通路作用的研究工具。其活性 (R)-对映体 PF-4136309（也称为 INCB8761）是一种首创的高效选择性 CCR2 小分子拮抗剂。它已被开发用于治疗炎症性疾病、神经性疼痛和多种癌症（特别是胰腺癌和转移性乳腺癌）。PF-4136309 已完成 I 期和 II 期临床试验。尽管其作为抗癌单药疗法的开发有限，但它仍然是一种有价值的研究工具，并可用于联合治疗方案。该对映体对于确认观察到的生物活性是由特异性 CCR2 拮抗作用而非非特异性化合物相关效应引起的至关重要。本产品为研究级化合物，不可用于临床。 |
| 分子式 |
C29H31F3N6O3
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|---|---|
| 分子量 |
568.59
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| 精确质量 |
568.24
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| 元素分析 |
C, 61.26; H, 5.50; F, 10.02; N, 14.78; O, 8.44
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| CAS号 |
1372407-07-2
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| 相关CAS号 |
PF-4136309;1341224-83-6;(Rac)-PF-4136309;857679-55-1
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| PubChem CID |
11192346
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
712.2±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
384.5±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.626
|
| LogP |
2.1
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| tPSA |
120
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
41
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| 分子复杂度/Complexity |
894
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
FC(C1=CC=CC(=C1)C(NCC(N1CCC(C1)NC1CCC(C2C=CC(C3N=CC=CN=3)=CN=2)(CC1)O)=O)=O)(F)F
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| InChi Key |
ZNSVOHSYDRPBGI-CBQRAPNFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H31F3N6O3/c30-29(31,32)21-4-1-3-19(15-21)27(40)36-17-25(39)38-14-9-23(18-38)37-22-7-10-28(41,11-8-22)24-6-5-20(16-35-24)26-33-12-2-13-34-26/h1-6,12-13,15-16,22-23,37,41H,7-11,14,17-18H2,(H,36,40)/t22?,23-,28?/m0/s1
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| 化学名 |
N-[2-[(3S)-3-[[4-hydroxy-4-(5-pyrimidin-2-ylpyridin-2-yl)cyclohexyl]amino]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]-3-(trifluoromethyl)benzamide
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| 别名 |
1341224-83-6; PF-4136309; INCB8761; 1372407-07-2; INCB8761(PF-4136309); 857679-55-1; INCB-8761; PF4136309;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7587 mL | 8.7937 mL | 17.5874 mL | |
| 5 mM | 0.3517 mL | 1.7587 mL | 3.5175 mL | |
| 10 mM | 0.1759 mL | 0.8794 mL | 1.7587 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Lalistat 2
D-(-)-3-Phosphoglyceric acid disodium (3-Phospho-D-glyceric acid disodium)
STC-15
TSR-033
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