| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Anticancer
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| 体外研究 (In Vitro) |
塞来昔布和2,5-二甲基塞来昔布（DM-Celecoxib）抑制人结肠癌细胞系HCT-116的增殖和诱导的细胞凋亡。[1]
首先，我们检测了塞来昔布和DM塞来昔布对人类结肠癌细胞系HCT–116增殖和凋亡的影响，该细胞系表达野生型APC和β连环蛋白的突变形式。这两种化合物均以剂量依赖的方式抑制HTC‐116的增殖（图1a）。正如我们之前报道的那样，塞来昔布诱导细胞凋亡，通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性测量进行评估。如图1（b）所示，DM-塞来昔布也能显著提高半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。 塞来昔布和DM塞来昔布可加速HCT-116细胞中TCF7L2的降解[1] 我们之前报道过塞来昔布诱导HCT-116细胞中TCF7L2的降解，TCF7L2是Wnt/β-catenin信号通路中的关键转录因子。如图2（a，b）所示，不仅塞来昔布，DM塞来昔布也以剂量和时间依赖的方式抑制TCF7L2的表达。由于50μM DM塞来昔布的效果几乎与100μM塞来昔布可比，我们在以下实验中主要使用这些浓度。接下来，我们研究了蛋白酶体抑制剂MG132对塞来昔布或DM诱导的TCF7L2减少的影响。细胞用或不用10μM MG132处理1小时，然后在有或没有100μM塞来昔布或50μM DM‐celecoxib的情况下孵育6小时。如图2（c）所示，用MG132预处理显著减弱了塞来昔b和DM̴celocoxib的作用，表明这两种化合物都加速了TCF7L2的蛋白酶体依赖性降解。 塞来昔布和DM塞来昔布可抑制HCT-116细胞中TCF依赖性转录[1] 由于塞来昔布和DM-塞来昔布可诱导HCT-116细胞中TCF7L2的降解，我们使用TOPflash测定法研究了塞来昔b和DM-塞来昔布对TCF依赖性转录活性的影响。塞来昔布强烈抑制TOPflash活性，而不影响FOPflash（阴性对照）活性，证实了我们之前的结果。2,5-二甲基塞来昔布也显示出类似的反应（图3a）。这些结果表明，不仅塞来昔布，DM‐celecoxib也通过TCF7L2降解抑制Wnt/β-catenin信号通路靶基因的转录活性。 塞来昔布和DM-塞来昔布对DLD-1细胞的影响[1] 接下来，我们研究了塞来昔布和DM塞来昔b是否能够抑制DLD-1细胞的细胞增殖，表达野生型β-catenin和APC的突变形式。这两种化合物都以剂量依赖的方式明显抑制细胞增殖（图4a），类似于在HCT-116细胞中观察到的情况。此外，与它们对HCT-116细胞的作用类似，这两种化合物都显著降低了DLD-1细胞中TCF7L2、细胞周期蛋白D1和存活素的表达水平（图4b）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
塞来昔布和2,5-二甲基塞来昔布对Mutyh-/-小鼠氧化应激诱导的癌症的影响[1]
然后我们进行了体内实验。首先，我们检查了口服塞来昔布和DM塞来昔b后的血浆浓度是否达到对肿瘤细胞具有抗增殖作用的水平。我们使用HPLC系统测量了野生型C57BL/6J小鼠的药物浓度。塞来昔布浓度在治疗2小时后达到最高水平（45.3±6.3μg/mL；n=3）；DM塞来昔布的浓度在治疗后1小时内更快地达到最大水平（110.7±14.3μg/mL；n=3）（图5）。由于塞来昔布和DM‐celecoxib的体外抗增殖试验计算的EC50值（图1a、4a）分别约为15-19μg/mL和12-16μg/mL，我们假设这些化合物的血浆浓度可能足够高，可以在体内诱导抗增殖作用。[1] 为了研究塞来昔布和2,5-二甲基塞来昔布的体内作用，我们使用了MUTYH（MUTYH-/-）缺陷的小鼠，MUTYH是一种防止氧化应激诱导的DNA损伤形成的酶。MUTYH缺乏症与人类结直肠腺瘤和癌的发展有关。我们之前报道过，与正常小鼠相比，Mutyh−/-小鼠小肠氧化应激诱导癌的发生率显著增加。29、35、36用0.2%KBrO3（一种强氧化剂）治疗12周后，Mutyh-/-小鼠发生了许多肠癌。为了评估这两种化合物对这些癌症的影响，将塞来昔布、DM‐celecoxib或载体口服给Mutyh−/-小鼠4周。塞来昔布或DM-塞来昔布可显著减少肠癌的数量（图6），在直径>1.0mm的大肠癌病例中更为明显（图6b）。 [1] 我们还研究了塞来昔布和2,5-二甲基塞来昔布的长期治疗是否对一般动物状况产生不良影响。为此，我们测量了小鼠的体重和外周血细胞计数，并观察了它们的总体外观和活动。塞来昔布或DM塞来昔b治疗不影响小鼠的外观、活动、白细胞计数、血小板数量或体重。塞来昔布或DM塞来昔布治疗后，红细胞计数和血红蛋白浓度趋于升高，但变化没有统计学意义（表1）。 |
| 酶活实验 |
塞来昔布和2,5-二甲基塞来昔布血浆浓度测量[1]
在指定时间通过心脏穿刺采集小鼠血液样本，并在500g下离心15分钟分离血浆。塞来昔布和DM‐塞来昔布的血浆浓度通过反相高效液相色谱系统测定，如前所述34，但略有修改。简而言之，将含有500 ng咖啡因作为内标的血浆样品（200μL）与200μL氯仿混合。混合后，将溶液在13 000g下离心5分钟，然后分离并蒸发有机相。将获得的残留物溶解在80μL流动相（甲醇：水=72:28，v/v）中，然后将等分试样（50μL）注入柱中进行分离。运行时间为10分钟，流速为1.0 mL/min。用在254 nm下工作的紫外检测器测量样品。通过绘制塞来昔布或DM-celecoxib面积与内标归一化面积的比值来制备校准曲线。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖试验[1]
将HCT-116或DLD-1细胞接种到24孔板中（5×104个细胞/孔），并在指定时间内用不同浓度的塞来昔布或2,5-二甲基塞来昔b（DM-selcoxib）处理。通过添加胰蛋白酶/EDTA收获细胞，并使用自动细胞计数器（TC10；日本东京Bio-Rad）进行计数。 半胱天冬酶-3活性测定[1] 按照制造商的说明，使用半胱氨酸蛋白酶蛋白32/capase‐3比色蛋白酶测定试剂盒测定半胱天冬酶-3活性。 蛋白质印迹分析[1] 样品用12%SDS-PAGE分离，然后使用半干转移系统转移到PVDF膜上（在12V下1小时）。在与第一和第二抗体孵育后检测感兴趣的蛋白质，并使用检测试剂进行可视化。使用ImageJ软件进行密度分析。 萤光素酶报告物测定[1] 使用TOPFlash（TCF报告质粒）和FOPFlash（TOPFlash阴性对照）。使用Lipofectamine Plus试剂将细胞与萤光素酶报告质粒和pRL-SV40（一种Renilla萤光素酶表达质粒（转染效率控制））共转染。24小时后，用塞来昔布或DM‐celecoxib在指定时间内刺激细胞。萤光素酶活性用光度计测定，并根据肾荧光素酶活性进行归一化。 |
| 动物实验 |
肠道肿瘤模型：采用先前报道的方法29, 35, 36在Mutyh-/-小鼠中诱导肠道肿瘤（腺瘤和癌）。简而言之，将浓度为2 g/L的KBrO3水溶液灌胃给4周龄小鼠，持续12周。16周龄时，将小鼠随机分为五组（雄性：雌性=1:1）。试验组小鼠每周5天口服给予悬浮于0.25%甲基纤维素溶液中的指定剂量的塞来昔布或DM-塞来昔布，持续4周。对照组小鼠仅给予溶剂（甲基纤维素）。每周监测小鼠体重。20周龄时，处死所有小鼠，采集血液和肠道样本。使用Celltac-α MEK-6358（日本光电，东京）测定血细胞计数。将肠组织固定于4%甲醛溶液中，并在显微镜下仔细观察肿瘤。使用ImageJ软件分析肿瘤图像。对于免疫组织化学分析，从甲醛固定的肠组织中切除直径为1.0–2.0 mm、距幽门远端3.0–5.0 cm的肿瘤。将样本包埋于石蜡中，并进行免疫组织化学染色。简而言之，将切片与抗TCF7L2抗体（1:1000稀释）、抗cyclin D1抗体（1:100稀释）或抗survivin抗体（1:100稀释）于4℃孵育过夜，随后与二抗（Histofine；Nichirei，东京，日本）孵育1小时。最后，使用Biozero显微镜（Keyence，大阪，日本）分析切片。对于蛋白质印迹分析，切除后立即将黏膜条带（距幽门底部2厘米处）在Laemmli氏样品缓冲液中匀浆。取等量的蛋白质进行电泳和蛋白质印迹分析。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
我们此前报道过，选择性COX-2抑制剂塞来昔布可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路，显著抑制人结肠癌细胞增殖。2,5-二甲基塞来昔布（DM-塞来昔布）是塞来昔布的类似物，不抑制COX-2，也被报道具有抗肿瘤作用。在本研究中，我们阐明了DM-塞来昔布是否抑制肠癌生长及其作用机制。首先，我们比较了DM-塞来昔布和塞来昔布对人结肠癌细胞系HCT-116和DLD-1的作用。结果表明，2,5-二甲基塞来昔布抑制细胞增殖和T细胞因子7样蛋白2（TCF7-L2）表达的强度与塞来昔布几乎相同。 2,5-二甲基塞来昔布还能抑制T细胞因子依赖性转录活性，并抑制Wnt/β-catenin靶基因产物cyclin D1和survivin的表达。随后，我们利用Mutyh-/-小鼠模型比较了塞来昔布和DM-塞来昔布的体内作用。在该模型中，氧化应激可诱导多发性肠道癌。口服塞来昔布和DM-塞来昔布后，血清浓度升高至足以抑制癌细胞增殖的水平。重复使用塞来昔布和DM-塞来昔布治疗可显著减少癌的数量和大小，且未观察到毒性反应。这些结果表明，塞来昔布衍生物抗癌作用的核心机制是抑制Wnt/β-catenin信号通路，而非抑制COX-2，并且DM-塞来昔布可能比塞来昔布更适合作为新型抗癌药物的先导化合物。[1]
我们的结果表明，塞来昔布和DM-塞来昔布均能抑制HCT-116细胞的增殖并诱导其凋亡，且该作用独立于其对COX-2的作用。因此，体外和体内实验结果清楚地表明，抑制COX-2并非塞来昔布发挥抗肿瘤作用的必要条件，并且塞来昔布和DM-塞来昔布即使在Wnt/β-catenin信号通路激活的情况下也能抑制肿瘤生长，因为它们直接抑制TCF7L2介导的转录。尽管体外实验显示DM-塞来昔布的作用略强于塞来昔布，而体内实验显示塞来昔布的作用略强，但除体外对细胞周期蛋白D1表达的影响外（图3b），相同浓度下两种药物的作用并无显著差异。因此，塞来昔布和DM-塞来昔布的结构差异可能不会显著影响这些药物通过降解TCF7L2来抑制Wnt/β-catenin信号通路的能力。需要进一步研究来阐明这些药物诱导TCF7L2降解的机制。[1] |
| 分子式 |
C18H16F3N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
395.40
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| 精确质量 |
395.091
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| 元素分析 |
C, 54.68; H, 4.08; F, 14.41; N, 10.63; O, 8.09; S, 8.11
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| CAS号 |
457639-26-8
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| 相关CAS号 |
169590-42-5
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| PubChem CID |
11545682
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
516.7±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
266.3±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.600
|
| LogP |
4.67
|
| tPSA |
86.36
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
614
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=CC(=C(C)C=C1)C2=CC(=NN2C3=CC=C(C=C3)S(=O)(=O)N)C(F)(F)F
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| InChi Key |
NTFOSUUWGCDXEF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H16F3N3O2S/c1-11-3-4-12(2)15(9-11)16-10-17(18(19,20)21)23-24(16)13-5-7-14(8-6-13)27(22,25)26/h3-10H,1-2H3,(H2,22,25,26)
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| 化学名 |
4-[5-(2,5-dimethylphenyl)-3-(trifluoromethyl)pyrazol-1-yl]benzenesulfonamide
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| 别名 |
457639-26-8; 2,5-Dimethyl Celecoxib; 2,5-dimethylcelecoxib; 2,5-dimethyl-celecoxib; 4-(5-(2,5-Dimethylphenyl)-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-1-yl)benzenesulfonamide; Dimethyl Celecoxib; 2,5-DimethylCelecoxib-d4; 4-[5-(2,5-dimethylphenyl)-3-(trifluoromethyl)pyrazol-1-yl]benzenesulfonamide;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5291 mL | 12.6454 mL | 25.2908 mL | |
| 5 mM | 0.5058 mL | 2.5291 mL | 5.0582 mL | |
| 10 mM | 0.2529 mL | 1.2645 mL | 2.5291 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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