IC50: 0.37 nM (Aurora B)

Barasertib-HQPA（3 μM，3 小时）可显著降低新鲜分离的白血病细胞中组蛋白 H3 磷酸化形式的表达[1]。Barasertib-羟基喹唑啉吡唑苯胺 (HQPA)] 在血浆中迅速转化为活性 Barasertib-HQPA[2]。Barasertib-HQPA 诱导显著的抗增殖作用，并伴有多倍体群体的出现，在大多数情况下会导致细胞凋亡[3]。

Barasertib (AZD1152, 25 mg/kg) 显著抑制了 AZD1152 二盐酸盐治疗的肿瘤的生长和重量[1]。Barasertib (AZD1152, 5 mg/kg) 增强了长春新碱或柔红霉素抑制人类 MOLM13 白血病异种移植瘤增殖的能力[1]。Barasertib (AZD1152, 10-150 mg/kg/d) 有效抑制了免疫缺陷小鼠中人类结肠、肺和血液肿瘤异种移植瘤的生长（平均肿瘤生长抑制范围为 55% 至 100%；P < 0.05）[2]。

体外研究。[2] 通过高含量图像分析筛选确定磷酸化组蛋白H3（PhH3）抑制。接种在96孔板中的SW620细胞与AZD1152-HQPA一起孵育24小时，然后在3.7%甲醛中固定30分钟。然后用PBS洗涤细胞，用0.5%Triton X-100渗透，并在室温下用兔抗PhH3（Ser10）抗体（1:100）染色1小时。用PBS洗涤后，将细胞与Alexa Fluor 488山羊抗兔抗体（1:200）和赫斯特染色（1:10000）在室温下孵育1小时。使用靶激活算法在阵列扫描II上分析PhH3的细胞水平，以计算PhH3阳性细胞的百分比。在Origin（7.5版）中计算单个IC50值，并使用几何平均值（即转换回基数10的对数值的平均值）对数据进行总结。

细胞增殖测定[1]。
细胞类型： AML 系（HL-60、NB4、MOLM13）、ALL 系（PALL-2）、双表型白血病（MV4-11）、急性嗜酸性粒细胞白血病（EOL-1）、以及慢性粒细胞白血病K562细胞的急变。
测试浓度：0-100 nM。 (Barasertib -HQPA)
孵育时间： 48 小时。
实验结果：IC50值范围为3 nM至40 nM。

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集落形成试验[1]
如前所述，通过使用甲基纤维素培养基H4534的集落形成试验评估AZD1152对白血病细胞以及正常骨髓单核细胞的集落生长的影响。

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流式细胞术细胞周期分析[1]
在12孔板中，以5×105个细胞/mL的浓度用AZD1152-HQPA（1-10nM）孵育2天的白血病细胞进行细胞周期分析。

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细胞凋亡检测[1]
根据制造商的说明，通过膜联蛋白V-FITC凋亡检测试剂盒测量AZD1152-HQPA诱导白血病细胞凋亡的能力。

小鼠[1]
4 周龄的雌性免疫缺陷 BALB/c 裸鼠饲养于无特定病原体 (SPF) 条件下，喂以辐照饲料。每只小鼠双侧皮下注射 2 × 10⁶ 个 MOLM13 细胞/肿瘤（溶于 0.1 mL Matrigel 中），或隔天注射一次。在为期 2 周的治疗期间，小鼠腹腔注射柔红霉素 (1 mg/kg) 6 次，可单独使用或与 AZD1152 (5 mg/kg) 联合使用。这些药物的剂量由我们的初步研究确定（数据未显示）。未治疗的对照组小鼠注射对照稀释剂。每周测量两次体重和肿瘤大小。肿瘤大小通过以下方法计算：公式：a × b × c，其中“a”为长度，“b”为宽度，“c”为高度，单位为毫米。

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体内研究。雄性瑞士裸鼠（nu/nu基因型）、SCID-bg小鼠（CB17/Icr.Cg.PrkdcSCIDLystbg/Crl）或裸鼠（Nude:Hsd Han:RNU-rnu；阿斯利康）饲养于负压隔离器或独立通风笼系统中。实验对象为8至12周龄的动物。通过在侧腹部皮下注射100至200 μL肿瘤细胞（1 × 10⁶至1 × 10⁷个细胞与Matrigel基质胶以50:50的比例混合；贝克顿·迪金森公司）建立人源肿瘤异种移植模型。当肿瘤达到预定大小时，将动物随机分为治疗组（每组n = 8-11）。肿瘤大小可触及（小鼠为 0.2-0.3 cm³，大鼠为 0.5-1 cm³）。AZD1152 用 Tris 缓冲液（pH 9）配制，并按照制造商的说明，通过单次注射（静脉或腹腔）或皮下植入渗透泵（两个 24 小时泵依次植入）进行 48 小时持续输注给药。每周最多三次使用游标卡尺测量肿瘤大小，计算肿瘤体积，并使用各组的几何平均值绘制肿瘤体积随时间变化的曲线图。肿瘤体积和肿瘤生长抑制率的计算方法如前所述。肿瘤体积变化的统计分析采用单尾 Student's t 检验（P 值 < 0.05 被认为具有统计学意义）[2]。
在药效学时间进程研究中，携带已建立的 SW620 肿瘤异种移植瘤的裸鼠接受了 AZD1152 治疗。给予赋形剂或AZD1152（25 mg/kg/d）每日静脉推注，连续4天（第1-4天）。在给药后的多个时间点（第0、5、9、12、16和19天），分别从赋形剂组和AZD1152治疗组中各随机选取两组动物（每组n=3），实施安乐死，并切取肿瘤组织和正常增殖组织（包括骨髓），采用流式细胞术、组织学或免疫组织化学分析评估其药效学效应。[2]

溶于 pH 9.0 的 3M Tris 缓冲液，浓度为 2.5 mg/mL；5、25 mg/kg；腹腔注射

border-color: rgb(238, 238, 238);">皮下注射 MOLM13 细胞的雌性免疫缺陷 BALB/c 裸鼠

[1]. AZD1152, a novel and selective aurora B kinase inhibitor, induces growth arrest, apoptosis, and sensitization for tubulin depolymerizing agent or topoisomerase II inhibitor in human acute leukemia cells in vitro and in vivo.Blood. 2007 Sep 15;110(6):2034-40.

[2]. AZD1152, a selective inhibitor of Aurora B kinase, inhibits human tumor xenograft growth by inducing apoptosis. Clin Cancer Res. 2007 Jun 15;13(12):3682-8.

[3]. The selective Aurora B kinase inhibitor AZD1152 is a potential new treatment for multiple myeloma. Br J Haematol. 2008 Feb;140(3):295-302.

[4]. AZD1152 rapidly and negatively affects the growth and survival of human acute myeloid leukemia cells in vitro and in vivo. Cancer Res. 2009 May 15;69(10):4150-8.

AZD-1152 是一种喹唑啉类化合物，其化学名称为 4-氨基喹唑啉-7-醇，其中 4 位氨基被 5-[2-(3-氟苯胺基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-3-基取代，7 位羟基被相应的 3-[乙基(2-羟乙基)氨基丙基]醚取代。它是一种抗肿瘤药物和 Aurora 激酶抑制剂。AZD-1152 属于喹唑啉类、仲酰胺类、叔胺类、仲胺类、吡唑类、伯醇类、单氟苯类和苯胺类化合物。
Defosbarasertib 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶 Aurora B 的小分子抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，地福巴拉塞替尼特异性结合并抑制Aurora激酶B，从而破坏纺锤体检查点功能和染色体排列，导致染色体分离和胞质分裂受阻。这会抑制细胞分裂和增殖，并诱导Aurora激酶B过表达的肿瘤细胞凋亡。Aurora激酶B是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其功能是将有丝分裂纺锤体连接到着丝粒上，在多种癌细胞类型中均有过表达。

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Aurora激酶在有丝分裂过程中的染色体排列、分离和胞质分裂中发挥着重要作用。我们近期发现，包括急性髓系白血病 (AML) 和急性淋巴细胞白血病 (ALL) 在内的造血系统恶性细胞异常表达 Aurora A 和 B 激酶，而强效的 Aurora 激酶抑制剂 ZM447439 能有效诱导多种白血病细胞的生长停滞和凋亡。本研究探讨了高选择性 Aurora B 激酶抑制剂 AZD1152 对多种人类白血病细胞的影响。 AZD1152抑制了急性髓系白血病（AML）细胞系（HL-60、NB4、MOLM13）、急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞系（PALL-2）、双表型白血病（MV4-11）、急性嗜酸性粒细胞白血病（EOL-1）以及慢性粒细胞白血病K562细胞急变期的增殖，IC50值范围为3 nM至40 nM，该值通过培养第2天的胸苷摄取测定。这些细胞的DNA含量为4N/8N，随后发生凋亡，分别通过细胞周期分析和膜联蛋白V染色进行检测。值得注意的是，AZD1152在体外与长春新碱（一种微管蛋白解聚剂）和柔红霉素（一种拓扑异构酶II抑制剂）协同增强了其对MOLM13和PALL-2细胞的抗增殖活性。此外，AZD1152 在 MOLM13 小鼠异种移植模型中增强了长春新碱和柔红霉素的作用。综上所述，AZD1152 是一种有前景的治疗白血病的新药。AZD1152 与传统化疗药物联合用于治疗白血病患者值得进一步研究。[1]

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目的：本研究旨在探讨 AZD1152（一种新型特异性 Aurora 激酶抑制剂，对 Aurora B 具有选择性）的体内作用。实验设计：在多种人肿瘤异种移植模型中测定了 AZD1152 的药效学效应和疗效。 AZD1152通过多种肠外途径（皮下渗透泵、腹腔注射和静脉注射）给药。结果：AZD1152能有效抑制免疫缺陷小鼠体内人结肠癌、肺癌和血液肿瘤异种移植瘤的生长（平均肿瘤生长抑制率范围为55%至≥100%；P<0.05）。对携带SW620结直肠癌肿瘤的无胸腺大鼠进行AZD1152静脉注射治疗后，详细的药效学分析揭示了肿瘤表型事件的时间顺序：首先是组蛋白H3磷酸化的短暂抑制，随后是细胞内4N DNA的积累（比对照组高2.4倍），接着是多倍体细胞比例的增加（>4N DNA，比对照组高2.3倍）。组织学分析显示，AZD1152治疗的肿瘤中存在异常细胞分裂，并伴有细胞凋亡的增加。骨髓分析显示，该药物可引起短暂的骨髓抑制，停用AZD1152治疗后骨髓抑制完全可逆。结论：这些数据表明，选择性靶向Aurora B激酶可能是一种有前景的治疗多种恶性肿瘤的方法。除了抑制组蛋白H3磷酸化外，肿瘤细胞多倍体和凋亡的检测也可能是此类治疗药物的有用生物标志物。AZD1152目前正在进行I期临床试验。[2]

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前列腺癌是男性最常见的非皮肤肿瘤，死亡率很高。前列腺肿瘤细胞具有不同的雄激素受体状态。雄激素受体在前列腺癌的进展和治疗中起着重要作用。Aurora B激酶具有致癌潜能，参与染色体分离和胞质分裂，抑制Aurora B激酶是一种有前景的抗癌疗法。本研究旨在探讨Aurora B抑制剂AZD1152-HQPA对雄激素受体（AR）阳性前列腺癌细胞存活和增殖的影响。我们采用LNCaP作为雄激素依赖性前列腺癌细胞系。研究了AZD1152-HQPA对细胞活力、DNA含量、微核形成以及凋亡和细胞周期相关基因表达的影响。此外，我们还检测了23例良性前列腺增生和38例前列腺癌标本中Aurora B和AR的表达。AZD1152-HQPA处理可诱导LNCaP细胞存活缺陷、多倍体化和细胞死亡。荧光原位杂交（FISH）着丝粒标记显示，整条染色体的缺失是微核的来源，表明AZD1152-HQPA具有非整倍体诱导作用。 AZD1152-HQPA 处理降低了 AR 的表达。此外，我们发现良性前列腺增生和前列腺癌标本中 Aurora B 和 AR 的表达呈弱正相关（r = 0.25，r = 0.41）。这是首次证明 AZD1152-HQPA 可作为治疗雄激素依赖性前列腺癌细胞系的有效治疗策略。AZD1152-HQPA 可诱导微核的非整倍体机制。综上所述，本研究为克服前列腺癌治疗障碍提供了新的思路。[3]

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Aurora 激酶在调节有丝分裂和细胞分裂中起着关键作用，其过表达与人类癌细胞的存活和增殖有关。本研究报告了化合物AZD1152（一种对Aurora B激酶具有选择性的化合物）在急性髓系白血病（AML）细胞系、原代AML样本和脐带血细胞中的体外和体内活性。AZD1152在所有研究的细胞系中均表现出抗增殖或细胞毒性作用，以剂量依赖的方式抑制组蛋白H3 Ser10位点的磷酸化（pHis H3），并导致细胞DNA含量>4N。与在其他细胞系中观察到的凋亡反应相反，AZD1152处理的THP-1细胞积累为多倍体状态，并表现出衰老反应。相应地，AZD1152显著影响了AML细胞系和原代AML在体内异种移植模型中的生长。然而，在体外和体内分析人脐带血和原代谱系阴性干细胞和祖细胞时，也观察到了浓度依赖性对细胞生长、凋亡和细胞周期进程的影响。这些数据表明，抑制 Aurora B 激酶可能是治疗 AML 的一种有效治疗策略，并且有必要在临床试验中进一步探索剂量和治疗方案。[4]

C26H33CL2FN7O6P

660.46

659.159

C, 47.28; H, 5.04; Cl, 10.73; F, 2.88; N, 14.85; O, 14.53; P, 4.69

722543-50-2

722543-31-9 (free acid); 722543-50-2 (2HCl); 957104-91-5

16221572

Typically exists as solid at room temperature

5.292

191.35

7

12

15

43

859

0

PEVRMFUIHQMEHQ-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C26H31FN7O6P.2ClH/c1-2-34(10-12-40-41(36,37)38)9-4-11-39-21-7-8-22-23(16-21)28-17-29-26(22)31-24-14-20(32-33-24)15-25(35)30-19-6-3-5-18(27)13-19;;/h3,5-8,13-14,16-17H,2,4,9-12,15H2,1H3,(H,30,35)(H2,36,37,38)(H2,28,29,31,32,33);2*1H

2-[ethyl-[3-[4-[[5-[2-(3-fluoroanilino)-2-oxoethyl]-1H-pyrazol-3-yl]amino]quinazolin-7-yl]oxypropyl]amino]ethyl dihydrogen phosphate;dihydrochloride

AZD1152 dihydrochloride; Barasertib dihydrochloride; 722543-50-2; 5-[[7-[3-[ethyl[2-(phosphonooxy)ethyl]amino]propoxy]-4-quinazolinyl]amino]-n-(3-fluorophenyl)-1h-pyrazole-3-acetamide dihydrochloride; H3T2NXF7ZK; Barasertib (dihydrochloride); AZD 1152 (hydrochloride); 2-[ethyl-[3-[4-[[5-[2-(3-fluoroanilino)-2-oxoethyl]-1H-pyrazol-3-yl]amino]quinazolin-7-yl]oxypropyl]amino]ethyl dihydrogen phosphate;dihydrochloride; 1H-Pyrazole-3-acetamide, 5-((7-(3-(ethyl(2-(phosphonooxy)ethyl)amino)propoxy)-4-quinazolinyl)amino)-N-(3-fluorophenyl)-, hydrochloride (1:2);

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。