| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Lck (IC50 = 249 nM); PAK5 (IC50 = 166 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
PRT062607 (P505-15) 是一种全新、极其有效、强效的口服 Syk 小分子抑制剂。使用两种不同的纯激酶测定来研究 PRT062607 对其靶激酶 Syk 的功效。根据 FRET 测试，半最大 Syk 抑制需要 6±0.2 nM（平均值±SEM）。放射性酶测定得出的 Syk IC50 为 2.1±0.4 nM（平均值±SEM），表明效力相似。 PRT062607 有效抑制人全血中 Fcε 受体 1 介导的嗜碱性粒细胞脱颗粒 (IC50 0.15 μM) 和 B 细胞抗原受体介导的 B 细胞信号传导和激活（IC50 分别为 0.27 和 0.28 μM）[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
当对 CAIA 模型中的小鼠口服PRT062607 (P505-15) 时，与载体对照相比，通过每日炎症评分确定，爪子炎症平均减少了 12%、44% 和 87%。研究结束时，平均血浆浓度（24 小时内的 C 平均值）确定为 0.38、0.95 和 1.47 μM。给予 30 mg/kg PRT062607 的小鼠表现出关节退化显着减少，以至于无法将小鼠与正常小鼠区分开。到研究结束时，大鼠 CIA 模型中的大多数动物（八分之七）（平均炎症评分±SEM=0.63±1.1；与媒介物相比，p<0.0001）由于高剂量的PRT062607（15 毫克/千克，每日两次）[1]。
在人全血中，PRT062607 (P505-15) 能有效抑制B细胞抗原受体介导的B细胞信号传导和激活（IC50分别为0.27和0.28 μM）和fce1受体介导的嗜碱性粒细胞脱粒（IC50分别为0.15 μM）。给药后，在小鼠体内测量了相似的体外抑制水平（Syk信号IC50 0.32 μM）。在更高的浓度下，syk独立的信号传导和激活不受影响，这表明激酶抑制在细胞系统中的特异性。口服P505-15在两种类风湿关节炎啮齿动物模型中产生剂量依赖性抗炎活性。在特异性抑制Syk活性约67%的浓度下，观察到统计学上显著的疗效。因此，特异性Syk抑制可以模拟Syk基因缺陷来调节免疫功能，为PRT062607 (P505-15) 治疗人类疾病提供了一种治疗策略。[2] |
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| 酶活实验 |
SYK Autophosphorylation/SYK自身磷酸化。[1]
采用PRT062607 (P505-15) 或不用对Ramos细胞进行预孵育30分钟（每实验107个细胞），然后用1 μg/ml抗igm在37℃下刺激30分钟。通过将细胞重悬在含有新鲜蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液（50 mM Tris 7.4, 1% NP40, 0.5%脱氧胆酸钠，150 mM NaCl, 0.5 mM EDTA）中终止信号传导，并在冰上孵育1小时。离心后，蛋白裂解物用蛋白A/G糖珠预清。裂解液与兔抗syk抗体孵育过夜（4℃），用蛋白A/G sepharose beads沉淀。洗涤珠变性，10% SDS-PAGE溶解蛋白，兔抗syk抗体免疫印迹，剥离，兔抗psyk Y526/526抗体重新印迹。 |
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| 细胞实验 |
细胞内磷酸流式细胞术。[1]
Ramos细胞（0.5 × 106）悬浮于200 μl新鲜培养基（RPMI + 10%胎牛血清）中，用载药或PRT062607 (P505-15) 预处理（37℃下30分钟）。细胞不受刺激或以1 μg/ml goat F(ab) ' 2 anti-IgM （Life Technologies）刺激10分钟。从CLL患者（n = 7）外周血中获得的Ficoll纯化（2 × 106）冷冻活CLL细胞，37℃解冻，用10 ml RPMI培养基加10%胎牛血清离心洗涤，以106细胞/ml的浓度在相同培养基中重悬。在0.3 mM H2O2刺激30分钟前，等量（200 μl）细胞用载药或PRT062607 (P505-15) 处理(Reth 2002；Irish et al., 2006) （8.8 M高汤），然后加入6 μg山羊F（ab’）2抗人IgG和抗人IgM 1:1的混合物10分钟。加入60 μl的16%多聚甲醛溶液，室温孵育10分钟，阻断信号传导。将固定的细胞在冷冻的磷酸盐缓冲盐水（PBS）中离心洗涤2次，悬浮在预冷至- 20°C的50%甲醇溶液中，4°C保存过夜。按照制造商的说明，通过在含有1% BSA的PBS中洗涤渗透化细胞两次，然后在含有各种抗体的同一缓冲液中孵育，对细胞进行细胞内磷酸流式细胞术染色。在FACS分析之前，细胞在含有1% BSA的PBS中再次洗涤，其中使用BD Biosciences FACS Calibur收集了至少2000个事件。使用FlowJo软件对数据进行分析。 细胞凋亡。[1] 采用pe偶联单克隆活性caspase-3抗体凋亡试剂盒检测细胞凋亡。将细胞悬浮在生长培养基（0.5 × 106个细胞/ml）中，并在FACS分析前用指示浓度的PRT062607 (P505-15) 或对照处理72小时。在一些实验中，将SU-DHL6 （0.5 × 106个细胞）与100µl肝素化人全血混合。样品用1µM PRT062607 (P505-15) 处理24小时，然后用抗人CD19抗体表面染色，准备用于FACS分析活性caspase-3。 |
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
鉴于其临床前活性和特异性，特别是与先前研究的SYK抑制剂相比，P505-15是一种极具吸引力的临床开发化合物。需要开展更多研究，以明确与SYK敏感性相关的生物学特征。探索P505-15的其他联合用药方案，包括化疗、单克隆抗体或靶向多个信号通路分支的新型激酶抑制剂组合，可能有助于发现更多治疗机会。一项在健康志愿者中进行的P505-15剂量探索研究已完成，该研究包括单次和多次给药方案。[1]
B细胞受体（BCR）相关激酶，包括脾酪氨酸激酶（SYK），参与B细胞恶性肿瘤的发病机制。在部分非霍奇金淋巴瘤（NHL）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）中，SYK持续磷酸化，而SYK抑制可导致下游激酶活性丧失和细胞凋亡。 P505-15（又名 PRT062607）是一种新型、高选择性且口服生物利用度高的小分子 SYK 抑制剂（SYK IC50 = 1 nM），其抗 SYK 活性至少比对其他激酶的亲和力高 80 倍。我们评估了 P505-15 在非霍奇金淋巴瘤 (NHL) 和慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 模型中的临床前特性。P505-15 成功抑制了 SYK 介导的 B 细胞受体信号传导，并降低了 NHL 和 CLL 细胞的活力。小鼠口服给药可预防 BCR 介导的脾肿大，并在异种移植模型中显著抑制 NHL 肿瘤的生长。此外，P505-15 与氟达拉滨联合治疗原代 CLL 细胞，在纳摩尔浓度下可产生协同增强的活性。我们的研究结果支持 P505-15 作为 B 细胞恶性肿瘤治疗药物的持续开发。一项针对健康志愿者的剂量探索研究已完成。[2] Syk 是一种蛋白酪氨酸激酶，它将 B 细胞受体 (BCR) 的激活与下游信号通路偶联，从而影响细胞存活和增殖。此外，Syk 还参与 BCR 非依赖性功能，例如 B 细胞迁移和黏附。在慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 中，Syk 会被组织微环境的外部信号激活，并且在首个临床试验中，Syk 被用作靶点，使用了一种相对非特异性的 Syk 抑制剂 R788（福斯他替尼）。在此，我们利用模拟 CLL 与微环境相互作用的实验，表征了两种新型高选择性 Syk 抑制剂 PRT318 和 P505-15 的活性。PRT318 和 P505-15 能有效拮抗 BCR 触发后以及在护士样细胞共培养中的 CLL 细胞存活。此外，它们还能抑制慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞中B细胞受体（BCR）依赖的趋化因子CCL3和CCL4的分泌，以及白血病细胞向组织归巢趋化因子CXCL12、CXCL13和基质细胞下方的迁移。PRT318和P505-15还能抑制BCR激活后Syk和细胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化。这些发现表明，选择性Syk抑制剂PRT318和P505-15能有效抑制CLL细胞的存活和组织归巢通路，并支持将这些药物用于治疗CLL、其他B细胞恶性肿瘤和自身免疫性疾病。[3] |
| 分子式 |
C19H23N9O.C2H4O2
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|---|---|
| 分子量 |
453.49758
|
| 精确质量 |
393.202
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| CAS号 |
1370261-96-3
|
| 相关CAS号 |
PRT062607 Hydrochloride;1370261-97-4
|
| PubChem CID |
44462758
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
707.6±70.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
381.7±35.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.783
|
| LogP |
0.74
|
| tPSA |
149.66
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
544
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
NC(C1=CN=C(N[C@H]2[C@@H](N)CCCC2)N=C1NC3=CC=CC(N4N=CC=N4)=C3)=O
|
| InChi Key |
TXGKRVFSSHPBAJ-JKSUJKDBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H23N9O/c20-15-6-1-2-7-16(15)26-19-22-11-14(17(21)29)18(27-19)25-12-4-3-5-13(10-12)28-23-8-9-24-28/h3-5,8-11,15-16H,1-2,6-7,20H2,(H2,21,29)(H2,22,25,26,27)/t15-,16+/m0/s1
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| 化学名 |
2-[[(1R,2S)-2-aminocyclohexyl]amino]-4-[3-(triazol-2-yl)anilino]pyrimidine-5-carboxamide
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| 别名 |
PRT062607; 1370261-96-3; PRT-062607; 2-[[(1R,2S)-2-aminocyclohexyl]amino]-4-[3-(triazol-2-yl)anilino]pyrimidine-5-carboxamide; K9C42672RH; P505-15; BIIB057; UNII-K9C42672RH;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2051 mL | 11.0254 mL | 22.0507 mL | |
| 5 mM | 0.4410 mL | 2.2051 mL | 4.4101 mL | |
| 10 mM | 0.2205 mL | 1.1025 mL | 2.2051 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01652937 | Withdrawn | Drug: BIIB057 Drug: Placebo |
Rheumatoid Arthritis | Biogen | August 2012 | Phase 2 |
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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