| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor, glycine site
The primary target of (R)-(+)-HA-966 is the strychnine-insensitive glycine binding site of the NMDA receptor complex. By acting as a competitive antagonist at this modulatory site, it inhibits NMDA receptor activation without directly blocking the glutamate binding site. This selectivity distinguishes it from other NMDA receptor antagonists that may produce psychotomimetic side effects. It also selectively blocks the activation of the mesolimbic dopamine system by amphetamine. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外研究表明，(R)-(+)-HA-966 能以 12.5 μM 的 IC₅₀ 抑制士的宁不敏感的 [³H]甘氨酸与大鼠大脑皮层突触膜的结合，并以 13 μM 的 IC₅₀ 抑制培养的大脑皮层切片中甘氨酸增强的 NMDA 反应。在电生理实验中，HA-966 选择性地阻断大鼠皮层切片中的 NMDA 反应，在 250 μM 时达到最大拮抗作用；这种拮抗作用可被甘氨酸 (1 mM) 或 D-丝氨酸 (100 μM) 逆转。在豚鼠回肠标本中，(R)-(+)-HA-966 以 150 μM 的 IC₅₀ 抑制谷氨酸诱发的收缩。
体外研究表明，(R)-(+)-HA-966 在 NMDA 受体复合物的甘氨酸调节位点发挥部分激动剂/拮抗剂的作用。它不直接影响谷氨酸识别位点，因此与竞争性 NMDA 拮抗剂相比，其副作用较少。体外实验已证实该化合物能够选择性地阻断苯丙胺对中脑边缘多巴胺系统的激活。其分子式为 C4H₈N2O2，分子量为 116.12 g/mol。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
(R)-(+)-HA-966（(+)-HA-966；静脉注射；10 mg/kg）可显著降低全身性NMDA（125、250、500和1000 mg/kg；静脉注射）引起的剂量依赖性升压反应和相关心动过速反应[3]。(+)-HA-966（30、100 mg/kg；腹腔注射）不影响雄性BKTO纹状体中的多巴胺合成，但能以剂量依赖的方式阻断苯丙胺诱导的伏隔核多巴胺合成增加。体重20-30克的小鼠未表现出任何反应。 [1]
1. 我们评估了N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体复合物甘氨酸位点的功能性拮抗剂(+)-(1-羟基-3-氨基吡咯烷-2-酮) ((+)-HA966)在慢性坐骨神经压迫损伤引起的神经性疼痛大鼠模型中调节全身性吗啡镇痛作用的能力。采用机械刺激（后爪压力引起的叫声阈值）和热刺激（后爪浸入水浴引起的挣扎潜伏期）进行测试。2. 在机械刺激测试中，单独静脉注射吗啡（0.05、0.1和0.3 mg kg⁻¹）在神经性疼痛大鼠和未受伤大鼠中均产生剂量依赖性效应。同样，吗啡（0.1、0.3 和 1 mg kg⁻¹，静脉注射）呈剂量依赖性地延长了热刺激（46℃）测试中神经损伤后爪的挣扎潜伏期，但在非伤害性温刺激（44℃）和冷刺激（10℃）测试中无效。3. 预先皮下注射 (+)-HA966（2.5 mg kg⁻¹）呈剂量依赖性地增强了吗啡在机械测试中的作用，其相对效力为：神经损伤后爪 > 对侧后爪 > 未损伤大鼠。4. 同样，(+)-HA966 呈剂量依赖性地增强了吗啡对热刺激（46℃）的作用，并且与吗啡联用时，对温刺激（44℃）也产生了剂量依赖性作用。在寒冷（10℃）测试中，(+)-HA966逆转了最高剂量吗啡的无效性。5. 纳洛酮在所有测试中均阻断了(+)-HA966与吗啡联合用药的效果。该药物组合在转棒测试中未引起动物的运动功能障碍。6. 这些发现表明，联合使用作用于NMDA受体复合物甘氨酸位点的拮抗剂和吗啡可能是治疗神经性疼痛和急性疼痛的一种有前景的方法[3]。 体内实验表明，(R)-(+)-HA-966（10 mg/kg；静脉注射）可显著减弱全身性NMDA（125-1000 mg/kg；静脉注射）引起的剂量依赖性升压反应和相关的心动过速反应。腹腔注射30-100 mg/kg时，该化合物可剂量依赖性地阻断苯丙胺诱导的伏隔核多巴胺合成增强，但对纹状体多巴胺合成无影响。该化合物可穿过血脑屏障，并在与吗啡联用时，在周围神经病变动物模型中显示出镇痛作用。由于其对NMDA受体的拮抗作用，该化合物在体内表现出抗惊厥活性。 |
| 酶活实验 |
采用放射性配体结合实验评估HA-966与NMDA受体甘氨酸位点的亲和力。制备大鼠大脑皮层突触膜，并将其与0.5-2 nM [³H]甘氨酸（或选择性配体[³H]MDL 105,519）和不同浓度的HA-966（0.1-1000 μM）在50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）中于4°C孵育30-60分钟。使用1 mM甘氨酸或10 mM D-丝氨酸来检测非特异性结合。反应通过Whatman GF/B玻璃纤维滤膜快速真空过滤终止，随后用冰冷的缓冲液洗涤三次。滤膜干燥后，使用液体闪烁计数器测量保留的放射性，以计算特异性结合抑制百分比，并通过非线性回归拟合竞争结合曲线来获得 IC₅₀ 和 Ki 值。
为进行放射性配体结合实验以评估NMDA受体甘氨酸位点的结合，请使用大鼠脑皮层或海马膜。将膜（100-200 ug蛋白）与10 nM [3H]-MDL105,519（甘氨酸位点拮抗剂）或20 nM [3H]-甘氨酸在50 mM Tris-乙酸缓冲液（pH 7.4）中于4℃孵育30-60分钟。加入不同浓度的(R)-(+)-HA-966（0.1 nM至10 uM）并继续孵育。通过快速过滤浸有0.5%聚乙烯亚胺的GF/B滤膜终止反应。用冰冷的缓冲液洗涤三次，并通过闪烁计数法测量放射性。计算IC₅0和Ki值。对于功能测定，使用双电极电压钳测量表达 NMDA 受体的非洲爪蟾卵母细胞中 NMDA 诱导的电流。 |
| 细胞实验 |
将新生大鼠原代皮层神经元以 1-2×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于 24 孔板中，在添加了 B27 补充剂的 Neurobasal 培养基中培养 10-14 天。进行全细胞膜片钳记录时，外液不含 Mg²⁺，并通过快速灌注系统施加 NMDA (10-100 μM) 和甘氨酸 (1-10 μM)。预先施加不同浓度的 HA-966 (1-1000 μM) 1-2 分钟，以评估其对 NMDA 诱发电流的抑制作用。或者，对于 cAMP 检测，将表达重组 NMDA 受体的 HEK293 细胞接种于 96 孔板中，用不同浓度的 HA-966 处理 15-30 分钟，裂解细胞，并通过 ELISA 法测定细胞内 cAMP 的积累量。
将原代大鼠皮层或海马神经元（或表达NMDA受体的细胞系）在37℃、5% CO₂的条件下，于Neurobasal培养基中培养。进行神经毒性保护实验时，先用(R)-(+)-HA-966（0.1-100 μM）预处理细胞30分钟，然后用NMDA（10-100 μM）和甘氨酸（1-10 μM）处理5-10分钟。孵育24小时后，通过LDH释放、MTT法或碘化丙啶染色评估细胞活力。进行钙成像时，用Fluo-4 AM标记神经元，在有或无(R)-(+)-HA-966的情况下灌注NMDA/甘氨酸溶液，并测量荧光变化。进行电生理实验时，对培养的神经元进行全细胞膜片钳记录，分别在有或无HA-966的情况下施加NMDA/甘氨酸溶液。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： SD（Sprague-Dawley）大鼠（11至12周龄）[3]
剂量： 10 mg/kg 给药途径： 静脉注射 实验结果： 显著减弱了全身性NMDA诱导的剂量依赖性升压反应和相关的心动过速反应。 1. 已在小鼠和大鼠中测定了甘氨酸/NMDA受体拮抗剂(+)-HA-966对苯丙胺神经化学和行为反应的影响。2. 在载体处理的对照小鼠中，(+)-HA-966（30-100 mg kg-1）不影响伏隔核或纹状体中的多巴胺合成，并且对自发运动活性没有明显影响。 3. 在小鼠中，(+)-HA-966（30 和 100 mg kg⁻¹）呈剂量依赖性地阻断了苯丙胺诱导的伏隔核多巴胺合成增加，但对纹状体多巴胺合成的增加没有影响。4. 在小鼠脑室内注射甘氨酸/NMDA 受体拮抗剂 5,7-二氯犬尿酸（10 μg）也显著减弱了苯丙胺增强的伏隔核多巴胺积累，但对纹状体多巴胺积累没有影响。5. 多巴胺受体激动剂阿扑吗啡诱导的纹状体和伏隔核多巴胺合成减少不受 (+)-HA-966（100 mg kg⁻¹）的影响。 6. (+)-HA-966 (30 mg kg-1) 未能减轻小鼠全身注射苯丙胺引起的活动过度，但完全阻止了大鼠伏隔核注射苯丙胺后出现的活动过度。相反，(+)-HA-966 (30 mg kg-1) 预处理并未改变大鼠纹状体注射苯丙胺引起的刻板行为。7. 这些结果与甘氨酸/NMDA受体对中脑边缘多巴胺能神经元的选择性促进作用相一致。[1] 体内研究采用雄性Sprague-Dawley大鼠（250-350 g）或CD-1小鼠（25-30 g）。将(R)-(+)-HA-966溶于生理盐水（pH值调至7.0）或PBS中，分别以1-30 mg/kg的剂量经尾静脉、10-100 mg/kg的剂量腹腔注射或以较低剂量（10-100 μg）脑室内注射给药。在大鼠NMDA升压反应研究中，使用氨基甲酸乙酯麻醉大鼠，插入动脉和静脉导管，静脉注射NMDA（125-1000 μg/kg），并在HA-966预处理后评估血压和心率的变化。在安非他明诱导多巴胺合成的研究中，腹腔注射安非他明（1 mg/kg），并在使用 NSD-1015 抑制脱羧酶后测量多巴胺的积累量。收集脑组织样本，用于高效液相色谱法（HPLC）分析多巴胺及其代谢物。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
早期研究表明，静脉注射HA-966后，其作用存在明显的延迟（数分钟），且在肝切除小鼠中作用显著减弱，提示该化合物可能需要肝脏代谢为活性代谢物才能充分发挥其药理作用。口服生物利用度和详细的血浆半衰期等参数尚未得到系统报道。该化合物通常通过腹腔注射、皮下注射或静脉注射给药，动物实验表明，给药后15-60分钟内通常可观察到明显的药效学效应。
(R)-(+)-HA-966 的分子量为 116.12 g/mol，分子式为 C4H₈N2O2。溶解度数据显示，该化合物可溶于生理盐水或 PBS 缓冲液中，用于静脉注射。在体内研究中，该化合物可溶于生理盐水（pH 值调至 7.0）或溶于其他溶剂中，例如 10% DMSO + 90% 生理盐水。粉末状化合物应储存于 -20℃，溶液可在 -80℃ 下保存长达 6 个月。该化合物能够穿过血脑屏障，这对于其在中枢神经系统 (CNS) 中的活性至关重要。在典型的研究剂量（10 mg/kg 静脉注射）下，该化合物显示出良好的脑渗透性。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据现有研究数据，HA-966 的毒性表现出异构体选择性。在行为毒性方面，(R)-(+)-HA-966 在有效抗惊厥剂量（例如，小鼠腹腔注射 30-100 mg/kg）下不会引起明显的镇静或共济失调，转棒试验结果正常。相反，(S)-(-)-HA-966 在较低剂量（3-5 mg/kg，腹腔注射）下即可产生镇静作用，而高剂量（5 mg/kg，腹腔注射）则会抑制体重增加。外消旋 HA-966 的镇静/共济失调作用主要归因于 (S)-(-)-异构体。现有文献中尚未报道 HA-966 在实验剂量范围内具有致死毒性的数据。该化合物仅供科学研究使用，不得用于人类治疗。
(R)-(+)-HA-966 是一种选择性 NMDA 受体甘氨酸位点拮抗剂，其作用机制基于此，在研究剂量下通常具有良好的耐受性。应遵循标准实验室预防措施：使用个人防护装备，包括手套、实验服和护目镜；避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物仅供研究使用，不得用于人类或兽医用途。目前尚无该化合物的致畸性、致突变性或致癌性数据。操作前请查阅安全数据表。废物处理应符合当地法规。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体复合物上的甘氨酸结合位点对士的宁不敏感，是多种治疗药物的研发靶点，包括抗焦虑药、抗抑郁药、抗癫痫药、抗缺血药和认知增强剂。本研究探讨了无效的甘氨酸结合位点部分激动剂(+)-HA-966 [R-(+)-3-氨基-1-羟基吡咯烷酮-2-酮]的辨别性刺激作用。雄性Swiss-Webster小鼠在T迷宫中接受训练，以区分(+)-HA-966（170 mg/kg，腹腔注射）和生理盐水，并通过食物控制其行为。其他甘氨酸部分激动剂，例如 1-氨基-1-环丙烷羧酸和 D-环丝氨酸，虽然已知在其他药理作用方面与 (+)-HA-966 不同，但能够完全替代 (+)-HA-966 的辨别性刺激作用。甘氨酸位点拮抗剂 7-氯犬尿酸不能替代 (+)-HA-966。同样，其他作用于NMDA受体非甘氨酸位点的功能性NMDA拮抗剂也不能替代(+)-HA-966：无论是高亲和力离子通道阻滞剂（地佐西德）还是低亲和力离子通道阻滞剂（伊贝格林），竞争性拮抗剂NPC 17742 [2R,4R,5S-2-氨基-4,5-(1,2-环己基)-7-膦杂庚酸]，以及多胺拮抗剂异芬普罗地尔都不能替代(+)-HA-966。虽然完全激动剂甘氨酸不能替代(+)-HA-966，但该化合物能完全阻断(+)-HA-966的辨别性刺激作用。在另一组经过训练以区分0.17 mg/kg地佐头孢哌酮和生理盐水的实验小鼠中，(+)-HA-966最多只能产生50%的地佐头孢哌酮相关反应。这些数据表明，(+)-HA-966 的辨别刺激是基于其在士的宁不敏感的甘氨酸位点上的部分激动剂效应。[2]
(R)-(+)-HA-966 是一种专门用于研究 NMDA 受体功能（特别是甘氨酸调节位点）的研究工具化合物。其主要应用包括：1) 研究 NMDA 受体在突触可塑性、长时程增强 (LTP) 和学习/记忆中的作用；2) 研究缺血、中风和创伤性脑损伤模型中的神经保护机制；3) 探索精神和神经系统疾病，例如精神分裂症、疼痛和神经退行性疾病；4) 研究 NMDA 受体在多巴胺系统调节和成瘾中的作用；5) 作为甘氨酸位点拮抗剂药物开发的工具化合物。该化合物尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C₄H₈N₂O₂
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|---|---|
| 分子量 |
116.12
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| 精确质量 |
116.059
|
| CAS号 |
123931-04-4
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| 相关CAS号 |
42585-88-6 (HCl); 75195-65-2 (hydrate); 111821-58-0 (S-isomer)； 123931-04-4 (R-isomer)
|
| PubChem CID |
6603720
|
| 外观&性状 |
Typically exists as Off-white to light yellow solids at room temperature
|
| 密度 |
1.436g/cm3
|
| 沸点 |
258.6ºC at 760mmHg
|
| 闪点 |
110.2ºC
|
| 蒸汽压 |
0.002mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.59
|
| LogP |
-1.5
|
| tPSA |
66.56
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
8
|
| 分子复杂度/Complexity |
115
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
N[C@@H]1CCN(O)C1=O
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| InChi Key |
HCKUBNLZMKAEIN-GSVOUGTGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C4H8N2O2/c5-3-1-2-6(8)4(3)7/h3,8H,1-2,5H2/t3-/m1/s1
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| 化学名 |
(3R)-3-amino-1-hydroxypyrrolidin-2-one
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| 别名 |
(R)(+)HA966; (R) (+) HA 966; (R)-(+)-HA-966; 123931-04-4; (3R)-3-amino-1-hydroxypyrrolidin-2-one; (+)-HA-966; (R)-HA-966; R(+)-HA-966; 2N9Q4C7WMT; R(+)-3-Amino-1-hydroxy-2-pyrrolidinone;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~861.18 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 8.6118 mL | 43.0589 mL | 86.1178 mL | |
| 5 mM | 1.7224 mL | 8.6118 mL | 17.2236 mL | |
| 10 mM | 0.8612 mL | 4.3059 mL | 8.6118 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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