Nucleoside analogue; Influenza virus

Triazavirin 对蜱传脑炎病毒的有效性是在敏感的细胞培养物中测量的。 Triazavirin 在 SKEV 细胞培养物中的浓度为 128 mcg/mL，可有效抑制蜱传脑炎病毒（Sofiin 株）的繁殖[2]。

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在第一阶段，我们研究了三氮唑核苷钠水合物（Triazavirin sodium hydrate，Riamilovir）和乙酰水杨酸对体外血小板聚集的影响。ADP诱导的兔全血对照阻抗为8.3 Ω。100 μM浓度的参比药物将血小板聚集幅度降至3.4 Ω，相当于相对于对照显著抑制了59.8%的血小板功能活性（表1）。将乙酰水杨酸浓度降至10和1 μM后，血小板聚集幅度分别降至5.5和6.6 Ω。因此，在上述浓度下，乙酰水杨酸分别抑制了23.7%和11.6%的血小板聚集。参比药物的IC50为57.5 μM。 100 μM浓度的三氮唑核苷钠（Riamilovir）将ADP诱导的血小板聚集幅度降至6.9 Ω，即抑制了17.1%的聚集过程（表1）。在全血与LPS孵育时，血小板聚集幅度从8.3显著增加至11.9 Ω，表明血小板止血系统在巨噬细胞激活后活性增强（表2）。研究药物的抗血小板活性评估基于ADP诱导的完整血小板与LPS处理血小板聚集水平差异范围。
100 μM浓度的乙酰水杨酸将血小板聚集幅度显著降至8.91 Ω，即抑制了83.2%的聚集过程（表2，图1）。10和1 μM浓度下，乙酰水杨酸分别抑制了52.4%和3.2%的活性，血小板聚集幅度分别降至10.02和11.8 Ω。乙酰水杨酸的IC50值为12.4 μM（表2）。因此，在LPS刺激巨噬细胞后，参比药物的活性比在完整血液中提高了4.6倍。
三氮唑核苷钠（Riamilovir）在LPS存在下显示出高抗血小板活性：100 μM浓度下抑制了96.3%的血小板聚集（图1），并将该过程幅度降至8.43 Ω（表2）。当riamilovir浓度降至10和1 μM时，血小板聚集幅度分别降至9.9和10.9 Ω，即分别抑制了56.1%和26.8%的血小板聚集（图1）。riamilovir的IC50为5.2 μM。因此，体外实验表明，在LPS刺激巨噬细胞的条件下，riamilovir的IC50值比乙酰水杨酸高2.4倍。[4]

研究了三氮唑核苷治疗白化小鼠实验性森林泉脑炎的有效性。研究结果表明，高剂量（200-400 mg/kg）的三氮杂韦林可以适度保护受感染的动物。测试组的动物寿命显着延长（从 4.1 天延长至 4.8 天），并且靶器官中病毒积累量显着下降[3]。

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第二阶段旨在验证三氮唑核苷（Riamilovir）在体内实验是否具有相同效应。对照组大鼠ADP诱导的血小板聚集幅度为7.9Ω。20mg/kg剂量的抗病毒药物Riamilovir使血小板聚集幅度降至5.57Ω，血小板功能活性抑制率达29.4%（表3），证实该药物在体内具有抗血小板作用。 静脉注射LPS的大鼠，其ADP诱导的血小板聚集幅度较空白对照组显著升高（达10.9Ω），表明高细胞因子血症可激活血小板。Riamilovir将血小板聚集幅度降至8.98Ω，在细胞因子中毒条件下的抗血小板活性较正常动物提高2.2倍。[4]

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两种治疗方案中，三氮唑核苷（Riamilovir）均能缩短住院周期。每日高剂量给药组患者住院时间最短。该药物可减轻疾病全身感染症状的持续时间和严重程度，其中每日1250mg、持续5天给药方案的患者发热总时长和呼吸道综合征持续时间最短，且未记录不良反应。该剂量组在治疗第6天实现100%的急性呼吸道病毒感染病原体清除率。 结论：三氮唑核苷（Riamilovir）在两种治疗方案中均表现出临床有效性和良好安全性。每日1250mg给药方案能产生更显著的临床效果，研究组在住院第6天即实现病原体完全清除。[5]

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TZV/三氮唑病毒（利阿昔洛韦）在动物模型中的抗流感活性。[6]
如表3所示，当根据治疗和预防方案给药时（感染前24和1小时以及感染后24、48和72小时），TZV保护小鼠免受A型和B型流感病毒引起的死亡。TZV以1至200mg/kg体重的剂量范围通过i.g.途径给药。确定最佳有效剂量为50至100mg/kg体重。从数据中可以明显看出，TZV和金刚乙胺对感染血清型a流感病毒（a/Aichi/2/68[H3N2]）的小鼠提供了相似水平的保护，但感染B型（B/Lee/40）并以大约相同剂量治疗的动物的存活率是金刚乙胺的三到四倍。因此，TZV可以保护65%至75%的感染A或B病毒的小鼠。当应用TZV给药的治疗（+24小时、+48小时和+72小时）或预防（-24小时和-1小时）方案时，TZV也是有效的（数据未显示）。同样值得注意的是，TZV的毒性较低：小鼠腹腔注射TZV后，LD50为1400±120mg/kg体重，肌肉注射TZV的LD50为2200±96mg/kg体重。潜在抗病毒药物的基本特征是它们的稳定性、代谢转化、药代动力学和生物利用度。

本研究依据现行《新药理学物质临床前研究手册》要求进行。三氮唑核苷（Triazavirin，Riamilovir）作为抗病毒药物被选为研究对象。体外实验中以抗血小板药物乙酰水杨酸作为对照药，选择依据是该药物作为循证等级较高的抗血小板剂被广泛应用。 三氮唑核苷（Riamilovir）使用生理盐水溶解；对照药先溶于30μl DMSO，再用生理盐水稀释至所需体积。采用Chrono-Log-700双通道发光聚集仪，通过阻抗法检测药物对血小板聚集的影响。 体外实验用兔血经耳缘静脉自由滴落法采集，用3.8%枸橼酸钠（9:1）抗凝。取450μl恒定体积全血用于研究。将100μM浓度的药物直接加入含全血的比色杯，5μM ADP作为血小板聚集诱导剂。 若显示高抗血小板活性，为计算IC50值（抑制50%血小板聚集的浓度），需追加检测10μM和1μM浓度样本。同时在高细胞因子血症条件下分析抗血小板活性：将终浓度20μM的LPS溶液（大肠杆菌O111:B4）与受试药同步加入全血样本比色杯，孵育5分钟后加入血小板聚集诱导剂。[4]

与活性药物利巴韦林相比，在敏感细胞培养物中评估了三唑韦林对蜱传脑炎病毒的疗效。在128 mcg/ml的浓度下，三唑韦灵通过在SKEV细胞培养物内积累而对蜱传乙脑病毒繁殖（Sofin株）具有抑制活性[2]。

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CAM模型中抗病毒活性的体外研究[6]
选取11-13日龄鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)剪切成约1mm³碎片，悬浮于含青霉素和硫酸链霉素的Hanks盐溶液中。将含病毒的起始尿囊液按10⁻¹至10⁻⁷梯度稀释后加入单层细胞长满的孔板，每孔悬浮液37℃孵育1小时，随后加入不同浓度的三氮唑核苷(Riamilovir)TZV水溶液。参照文献26方法，经36-37℃孵育48小时后，通过血凝素滴度测定和空斑试验评估抗病毒活性。

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三氮唑核苷(Riamilovir)在兔肝匀浆中的稳定性[6]
按类似文献方法制备兔肝匀浆，反应体系含25mg/ml蛋白和500μM TZV，37℃孵育。定时取样后立即加入预冷甲醇至66%(v/v)终止反应，10000×g离心4分钟收集沉淀。上清液经SpeedVac冷冻干燥后，残渣水溶解，通过前述HPLC方法分析产物浓度（按峰面积定量）。

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TZV/三氮唑核苷(Riamilovir)在细胞培养中的代谢[6]
将TZV水溶液加入含6×10⁶个HEK 293T肾细胞或Huh7肝细胞单层的培养皿，终浓度1mM。细胞与化合物共孵育1.5小时或24小时后，用PBS缓冲液洗涤三次，等体积PBS重悬并通过三次冻融法裂解。加入等体积6%三氟乙酸离心后取上清，用饱和Na₂CO₃调至中性pH，按上述HPLC方法分析代谢产物。

对白化小鼠实验性森林-泉脑炎中三唑韦林与活性药物利巴韦林®的治疗效果比较研究表明，高剂量（200-400 mg/kg）三唑韦林对感染动物具有中等程度的保护作用。试验组动物的寿命显著延长（从4.1天延长至4.8天），并且靶器官（脑）中病毒的积累量显著降低（p ≤ 0.05）[3]。

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体内实验采用大鼠，分为4组（每组6只）：两组未给予LPS（完整大鼠和灌胃给予三唑韦林钠水合物（利阿米洛韦）的大鼠），两组LPS中毒（对照组大鼠静脉注射LPS，实验组大鼠静脉注射LPS并灌胃利阿米洛韦）。在采血前1小时（对应于血液中药物浓度峰值），使用无创胃探针经胃内灌注给予大鼠20 mg/kg剂量的利米洛韦（相当于人类剂量，该剂量使用种间转换因子计算）。大鼠用水合氯醛（400 mg/kg，腹腔注射）麻醉，并从腹主动脉（如上所述，血液稳定剂）获取研究用生物材料。通过尾静脉注射2 mg/kg脂多糖（LPS）建立细胞因子风暴模型。在LPS给药前1小时经口给予利米洛韦，并在LPS给药后4小时采血。对照组经胃内灌注等体积的蒸馏水。使用GraphPad Prism 8.0软件进行统计分析（单因素方差分析，Bonferroni校正，p<0.05）。使用 Microsoft Excel 2020 内置函数计算各组的 IC50、均值和标准差。[4]

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目的：评估不同给药方案下抗病毒药物三氮唑韦林钠水合物（利阿米洛韦）治疗非冠状病毒（SARS-CoV-2）病因引起的急性呼吸道病毒感染（ARVI）患者的临床疗效和安全性。
材料与方法：本研究纳入 150 例年龄在 18-27 岁之间的 ARVI 患者（50 例患者接受三氮唑韦林钠水合物（利阿米洛韦）治疗，剂量为 250 mg，每日 3 次，疗程 5 天；50 例患者接受利阿米洛韦治疗，剂量为 250 mg，每日 5 次，疗程 5 天，属于超适应症用药；50 例患者仅接受抗病毒药物治疗）。治疗）。[5]

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三唑韦林（Riamilovir）在动物模型中的抗流感活性。[6]
评估了感染A/Aichi/2/68 (H3N2)或B/Lee/40流感病毒的CBA小鼠的抗病毒活性。每组小鼠包含20只。在轻度乙醚麻醉下，通过鼻内途径给予1和10个半数致死剂量（LD50）的病毒。根据以下三种方案之一，通过胃内灌注（ig）途径给予TZV水溶液（0.2 ml）：治疗和预防方案（感染前24小时和1小时[-24和-1 h]以及感染后24、48和72小时[+24、+48和+72 h]）、预防方案（-24 h和-1 h）或治疗方案（+24 h、+48 h和+72 h）。以金刚烷胺作为对照。观察动物14天，每日记录对照组和实验组的死亡情况。基于这些数据，计算TZV对动物的保护程度，并与金刚烷胺的保护程度进行比较。

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兔体内的药代动力学。 [6]
对兔子进行单次三唑韦林（Riamilovir）/TZV灌胃给药时，将动物（n = 4）用10:1的乙醚-氟烷混合物麻醉，并将聚氨酯胃肠管插入15厘米深。三唑韦林（Riamilovir）/TZV以水溶液（12毫升）的形式给药，剂量为105毫克/公斤体重。对4只兔子（n = 4）进行静脉给药时，按照参考文献11的方法，将TZV（4.3 mg/kg体重）溶于生理盐水（1 ml）中，经耳缘静脉注射1分钟。在给药后24小时内的预定时间点，从耳缘静脉自然采集血样（平均1 ml），置于含有5 μl肝素（5,000 U/ml）的微量离心管中。摇匀后，取出0.5 ml血样，加入1 ml甲醇混匀，并于-24℃保存。对照组血样在给药前采集。进行高效液相色谱（HPLC）分析前，将样品以1,500 × g离心10分钟；上清液真空蒸发；残余物溶于100 μl水中。然后，在上述条件下，采用高效液相色谱法（HPLC）分析样品。
药代动力学参数采用 Kinetica 程序计算。采用 Thermo Kinetica 程序的血管外非房室模型研究了肠内给药后的药代动力学。对于静脉给药，则采用非房室静脉输注模型。测定的参数包括：血浆浓度-时间曲线下面积（AUCtot）、表观消除半衰期（T1/2）、血浆中化合物的最大浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）和平均滞留时间（MRT）。化合物的肠内生物利用度（F）计算公式为 (AUCi.g./dosei.g.)/(AUCi.v./dosei.v.)，其中 AUCi.g. 为肠内给药后化合物的 AUC，dosei.g. 为肠内给药剂量，AUCi.v. 为静脉给药后的 AUC，dosei.v. 为静脉给药剂量。是静脉注射剂量。血浆总清除率 (CL) 计算公式为剂量/AUC。TZV 稳态分布容积 (Vss) 计算公式为 CL × MRT。

吸收、分布和排泄
在兔体内，胃内灌注三唑韦林后，血药浓度峰值 (Cmax) 为 1.1±0.1mg/L，达峰时间 (Tmax) 为 0.40±0.16h，曲线下面积 (AUC) 为 3.10±0.8mgh/L。在兔体内，静脉注射三唑韦林后，AUC 为 1.2±0.3mgh/L。在人体中，三唑韦林的血药浓度峰值 (Cmax) 为 4.8 µg/mL，达峰时间 (Tmax) 为 1-1.5 小时，曲线下面积 (AUC) 为 12.8 µg/hmL。
关于三唑韦林消除途径的数据尚不明确。
在兔体内，胃内给药三唑韦林的分布容积为 83.5 ± 19.2 L/kg，而静脉给药三唑韦林的分布容积为 1.2 ± 0.3 L/kg。
在兔体内，胃内给药三唑韦林的清除率为 37.0 ± 11.2 L/hkg，而静脉给药三唑韦林的清除率为 14.0 ± 3.7 L/hkg。三氮杂韦林的清除率为 246 mL/min。

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代谢/代谢物
关于三氮杂韦林代谢的数据尚不明确。

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生物半衰期
在兔体内，胃内灌注三氮杂韦林的半衰期为 1.1 ± 0.1 小时，而静脉注射三氮杂韦林的半衰期为 0.50 ± 0.09 小时。三氮杂韦林的半衰期为 1-1.5 小时。

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TZV/三氮杂韦林（利阿米洛韦） 兔单次静脉或胃内给药后的药代动力学参数。[6]
为了确定 TZV 的胃内生物利用度，通过胃内和静脉途径将该化合物给予兔子（n = 4）。在给药后 24 小时内的预定时间点采集血样，并用高效液相色谱法 (HPLC) 进行分析。肠内给药后10分钟内，兔血中仅观察到TZV峰，其保留时间（Tret）为22.5分钟。2小时后，出现一个新的峰（M1），其浓度随时间增加，Tret为27.5分钟。图2A显示了给药（105 mg/kg体重）后12小时内兔血中TZV和M1的浓度。TZV的血药浓度峰值（Cmax，1.1 mg/L）在0.40 ± 0.16小时达到，消除半衰期为1.1小时。TZV的清除率（CL）为37.0 ± 11.2 L/h·kg，稳态分布容积（Vss）为83.5 ± 19.2 L/kg。M1浓度在3小时内升高，随后在接下来的5小时内略有下降。兔静脉注射4.3 mg/kg剂量的TZV后，血浆中TZV浓度迅速下降，半衰期（T1/2）为0.9 h（图2B）。与肠内给药的结果相反，未检测到代谢物M1。在整个实验期间（24 h），仅观察到TZV。表4总结了TZV及其代谢物的药代动力学参数值。兔肠内TZV的生物利用度（F）计算为12.5%。

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在兔肝匀浆中生成TZV/三唑韦林（利阿米洛韦）代谢物（M1）。[6]
TZV代谢物很可能是在肝脏或肾脏中生成的。为了验证这一假设，将TZV与兔肝匀浆孵育。图 3 显示了肝脏匀浆与 500 μM TZV 孵育后的 HPLC 分析结果。如图所示，孵育 10 分钟后出现了一个新的峰，且峰强度随时间增加。该峰的保留时间与兔血中经肠内注射 TZV 后形成的代谢物的保留时间吻合良好。[6] 将 HEK 293T 或 Huh7 细胞培养物与 500 μM TZV 孵育不同时间。高效液相色谱（HPLC）分析细胞提取物显示存在TZV及其代谢物，该代谢物的保留时间与兔肝匀浆中形成的M1代谢物以及经肠内注射TZV后在兔血中检测到的代谢物的保留时间一致（图4）。

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TZV/三唑韦林（利阿米洛韦）代谢物结构。[6]
通过比较HPLC分析、紫外光谱和质谱数据的保留时间，证实了在细胞培养物和经肠内注射TZV后在兔血中以及在兔肝匀浆中孵育TZV后发现的代谢物的身份。图5显示了TZV及其与兔肝匀浆孵育后形成的代谢物的紫外光谱图。TZV和M1的光谱图明显不同：TZV有两个最大吸收峰（λmax），分别位于257 nm和360 nm，而M1的两个最大吸收峰位于249 nm和320 nm。我们推测TZV的硝基可以被还原生成2-甲基硫代-6-氨基-1,2,4-三唑并[5,1-c]-1,2,4-三嗪-7(4H)-酮（AMTZV）。我们合成了AMTZV，并证实其紫外光谱图与M1的光谱图完全一致。为了验证肝匀浆中形成的代谢物M1的结构，我们将其质谱图与合成化合物的质谱图进行了比较（图6A和B）。主要离子为[MH]−，分子量为197，与AMTZV的分子量一致。此外，还出现了TZV [MH]−离子227的峰。对于离子197和227，观察到了相应的卫星离子，分别为198 [M + 1-H]−和199 [M + 2-H]−，以及228 [M + 1-H]−和229 [M + 1-H]−。峰213对应的离子结构尚不明确。峰167可能与代谢降解产物有关，这已通过混合[M1 + AMTZV]和[M1 + 15N-AMTZV]得到证实（数据未显示）。

蛋白质结合
关于三唑病毒素的蛋白质结合数据尚不明确。

[1]. Preparation of chitosan-coated liposomes as a novel carrier system for the antiviral drug Triazavirin. Pharm Dev Technol. 2018 Apr;23(4):334-342.

[2]. Investigation of Triazavirin antiviral activity against tick-borne encephalitis pathogen in cell culture. Antibiot Khimioter. 2014;59(1-2):3-5.

[3]. Investigation of Therapeutic Efficacy of Triazavirin Against Experimental Forest-Spring Encephalitis on Albino Mice. Antibiot Khimioter. 2015;60(7-8):11-3.

[4]. Antiplatelet Activity of Riamilovir under Conditions of Lipopolysaccharide Intoxication. Bull Exp Biol Med. 2022 May 26;173(1):41–45.

[5]. Clinical efficiency and safety of riamilovir under various dosage regimens for treatment of acute respiratory viral infections in adults. Ter Arkh. 2023 Dec 22;95(11):930-936.

[6]. Antiviral properties, metabolism, and pharmacokinetics of a novel azolo-1,2,4-triazine-derived inhibitor of influenza A and B virus replication. Antimicrob Agents Chemother . 2010 May;54(5):2017-22.

Triazavirin 是一种鸟嘌呤核苷酸类似物抗病毒药物，最初由俄罗斯研发，已证实对甲型和乙型流感病毒（包括 H5N1 毒株）有效。Triazavirin 似乎在降低流感疾病严重程度及相关并发症方面展现出潜力。鉴于 SARS-CoV-2 与 H5N1 病毒的相似性，卫生官员正在研究 Triazavirin 作为对抗 SARS-CoV-2（导致 COVID-19 的冠状病毒）的一种选择。
Riamilovir 是一种合成鸟嘌呤衍生物，具有潜在的广谱抗病毒活性。Riamilovir 给药后可抑制病毒 RNA 合成，从而阻止病毒转录和复制。Riamilovir 也可能与严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 和人血管紧张素转化酶 2 (ACE2) 结合。这可能阻止SARS-CoV-2进入人体宿主细胞。

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药物适应症
三氮唑韦林在俄罗斯被开发为一种潜在的甲型和乙型流感病毒感染治疗药物。

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作用机制
三氮唑韦林是一种鸟苷酸类似物，可抑制RNA合成。

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我们开发了一种用改性壳聚糖包覆带正电荷脂质体的新方法。脂质体是通过逐步挤出法，分别使用孔径为0.2 μm和0.1 μm的无机膜（Anotop）制备的。壳聚糖衍生物是通过Ugi多组分反应合成的。我们制备了多系列脂质体组合物，并从粒径、多分散指数（PDI）、zeta电位和稳定性等方面比较了它们的性质。我们研究了各种添加剂的影响，并确定了脂质膜的最佳组成。添加不带电荷的脂肪酸酯可使挤出法制备的脂质体的直径减小至 145-150 nm，多分散指数 (PDI) 为 0.13-0.15。将制备的脂质体负载新型抗病毒药物三唑韦林，并用于测定其释放曲线。三唑韦林以盐的形式与生物相容性胆碱衍生物（限量脂肪酸）结合，包覆于脂质体层中。采用合适的脂质组成制备了大量改性壳聚糖包覆的脂质体。结果表明，脂质体与多糖层的适当组合可将胶体稳定性延长至 3 个月，并展现出广泛的表面修饰功能。[1]

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在敏感细胞培养物中，评估了三唑韦林对抗蜱传脑炎病毒的疗效，并与活性药物利巴韦林进行了比较。在浓度为 128 mcg/ml 时，三唑韦林可通过在 SKEV 细胞培养物中的积累，有效抑制蜱传脑炎病毒（Sofiin 株）的复制。[2]

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在敏感细胞培养物中，我们评估了三唑韦林对抗蜱传脑炎病毒的疗效，并与活性药物利巴韦林进行了比较。在浓度为 128 mcg/ml 时，三唑韦林可通过在 SKEV 细胞培养物中的积累，有效抑制蜱传脑炎病毒（Sofiin 株）的复制。[3]

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我们研究了抗病毒药物利阿米洛韦在有无 LPS 存在下对 ADP 诱导的血小板聚集的影响。与乙酰水杨酸（参考药物）不同，利阿米洛韦在体外未表现出抗血小板作用。然而，它显著抑制了LPS处理的血液样本中的血小板反应性，其IC50值比乙酰水杨酸高2.2倍。在体内实验中，在细胞因子风暴条件下，利阿米洛韦可抑制大鼠血小板聚集64%。[4]甲型和乙型流感病毒在人群中引起周期性大流行。目前获批用于对抗流感病毒感染的抗病毒药物种类有限。我们研究了一种新型有效的甲型和乙型流感病毒抑制剂——三氮杂维林[2-甲基硫代-6-硝基-1,2,4-三唑并[5,1-c]-1,2,4-三嗪-7(4I)-酮] (TZV)。TZV可抑制细胞培养物和鸡绒毛尿囊膜中流感病毒的复制，并能保护小鼠免受甲型和乙型流感病毒感染而死亡。 TZV 对金刚烷胺耐药的流感病毒株和禽流感 A 病毒 H5N1 株也有效。在给兔子服用 TZV 后，计算了 TZV 的药代动力学参数和生物利用度。在 IAK 293T 和 Huh7 细胞培养物、肝脏匀浆和兔血中，经胃内灌注 TZV 后，发现了 TZV 的代谢产物 AMTZV [2-甲基硫代-6-氨基-1,2,4-三唑并[5,1-s]-1,2,4-三嗪(e)-7(4I)-酮]。AMTZV 无毒，且在细胞培养中不具有抑制流感病毒的活性。该代谢产物很可能是 TZV 的代谢产物。[6]

C5H4N6O3S

232.22042

228.007

C, 26.32; H, 1.77; N, 36.83; O, 21.03; S, 14.05

123606-06-4

116061-59-7 (sodium);123606-06-4 (free);928659-17-0 (sodium hydrate);

3113817

Typically exists as solid at room temperature

2.0

147.06

1

6

1

15

435

0

CSN1CCN2N(C(N=C2N1)=O)[N+]([O-])=O

IDVQGNMSSHPZSJ-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C5H4N6O3S/c1-15-5-6-4-8-7-2(11(13)14)3(12)10(4)9-5/h1H3,(H,6,8,9)

7-(methylsulfanyl)-3-nitro[1,2,4]triazolo[5,1-c][1,2,4]triazin- 4(1H)-one

Riamilovir; Riamilovir; 123606-06-4; 7-(Methylthio)-3-nitro-[1,2,4]triazolo[5,1-c][1,2,4]triazin-4(6H)-one; Riamilovir [INN]; Triazavirin [WHO-DD]; UNII-F2HTG1MH2D; F2HTG1MH2D; Triazavirin; TZV

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。