| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
D4 Receptor; 5-HT1A Receptor (pIC50 = 8.87); 5-HT1A Receptor (pA2 = 9.71)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：在注入 WAY 100635 (10 nM) 的中缝背核 (DRN) 切片中，大多数推定的 5-HT 神经元的放电率增加（基线率的 13%）。此外，WAY 100635 完全防止 5-HT (3-15 μM)、8-OH-DPAT (10 nM)、5-羧酰胺色胺 (20 nM) 和来苏必通 (100 nM) 产生的放电速率降低。通过将 5-HT 浓度增加至 300 μM，可以完全克服 WAY 100635 所产生的拮抗作用，IC50 为 0.95 nM。在海马切片中，WAY 100635 (0.5 nM -10 nM) 不会改变细胞内记录的 CA1 锥体细胞的静息膜电位或膜输入电阻。然而，WAY 100635 不仅可以完全防止超极化（IC50 为 1.3 nM），而且可以降低 5-HT 和 5-羧酰胺色胺产生的膜输入电阻，IC50 分别为 22.5 μM 和 50 nM。 WAY 100635 的 IC50 为 1.35 nM，相对于一系列其他 CNS 受体，对 5-HT1A 位点的选择性高 > 100 倍。 [3H]WAY 100635 特异性结合的 Bmax 始终比激动剂放射性配体 [3H]8-OH-DPAT 高 50-60%。 Mn2+（而非鸟嘌呤核苷酸）抑制 [3H]WAY 100635 特异性结合。 WAY 100635没有5-HT1A受体激动剂作用，但剂量依赖性地阻断激动剂对海马CA1区突触后5-HT1A受体和位于中缝背侧5-HT的体树突5-HT1A受体的激动剂作用神经元。 [3H]WAY 100635 的 Kd 约为 2.5 nM。在离体豚鼠回肠中，WAY 100635 是一种有效且高浓度的 5-羧酰胺色胺 5-HT1A 受体激动剂拮抗剂，其表观 pA2 值（0.3 nM）为 9.71。细胞测定：使用填充有 2 M NaC1 (12 MΩ-15 MΩ) 的玻璃微电极进行细胞外记录。根据以下标准将细胞鉴定为 5-HT 神经元：持续时间为 2 毫秒至 3 毫秒的双相动作电位、缓慢（0.5 Hz - 2.0 Hz）和规则的放电模式。通过将 α-1 肾上腺素能激动剂去氧肾上腺素 (3 μM) 添加到超融合 ACSF 中，在原本沉默的神经元中引发放电。在使用不同药物之前至少记录 10 分钟的基线活动。电信号被馈送到高输入阻抗放大器、示波器和电子速率计，这些电子速率计由连接到 A/D 转换器和个人计算机的各个动作电位触发。使用专用软件，可以记录、计算积分发射率并将其作为连续 10 秒样本显示在图表记录仪上。通过比较 WAY 100635 应用前 2 分钟内记录的平均放电频率与 WAY 100635 作用峰值时（通常是开始应用后 2-5 分钟）记录的平均放电频率来评估激动剂的效果。当在拮抗剂存在的情况下应用激动剂时，将激动剂的效果与基线放电速率以及单独灌注拮抗剂期间记录的频率进行比较。在重新测试激动剂的作用之前，让拮抗剂平衡 10 分钟至 25 分钟。
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| 体内研究 (In Vivo) |
小鼠静脉注射后，[3H]WAY 100635 可选择性结合大脑 5-HT1A 受体。 WAY 100635 还以剂量依赖性方式阻断 8-OH-DPAT 抑制中缝背侧 5-HT 神经元放电的能力，并诱导 5-HT 综合征、体温过低、食欲过盛以及升高血浆 ACTH 水平。在小鼠明/暗盒焦虑模型中，WAY 100635 诱导类似抗焦虑的作用。 WAY 100635 对大鼠短期记忆延迟匹配位置模型中的认知没有内在影响，但逆转了 8-OH-DPAT 对运动动机表现的破坏性影响。 WAY 100635 以本身无抑制作用的剂量阻断 8-OH-DPAT 对麻醉大鼠中缝背神经元放电的抑制作用。在行为模型中，WAY 100635 本身不会引起明显的行为变化，但可有效拮抗 8-OH-DPAT 在大鼠和豚鼠中引起的行为综合征（最小有效剂量 = 0.003 mg/kg sc，ID50 = 0.01 mg/kg sc） ， 分别）。 WAY 100635 还可阻断 8-OH-DPAT 在小鼠和大鼠中引起的体温过低，皮下注射的 ID50 值为 0.01 mg/kg
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| 酶活实验 |
Sceening assay[6]
对于NIMH-PDSP在大量克隆受体和转运蛋白上的初步筛选（详见Roth等人（2002）和Shapiro等人（2003）），使用了10μM WAY-100635。在测量到显著抑制的情况下（四次测定的抑制率>50%），用6-10个浓度的未标记配体进行K i测定，并用GraphPad Prism分析数据。 饱和结合实验[6] 通过刮取培养基中的细胞，然后在1000×g下离心10分钟并吸出培养基来收集全细胞颗粒。然后将颗粒重新悬浮在冰冷的标准结合缓冲液（SBB:50 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM MgCl2和0.1 mM EDTA）中，等分，在4°C下以14000×g离心20分钟，以沉淀膜部分，吸出并储存在-80°C下供将来使用。[6] 通过在冰冷的SBB中重新悬浮来洗涤5-HT1A颗粒，并在4°C下以14000×g离心15分钟，然后吸出缓冲液。类似地洗涤hD4.2颗粒，但在冰冷的多巴胺激动剂结合缓冲液（DABB:50 mM Tris-HCl pH 7.4，5 mM KCl，2 mM MgCl2，2 mM CaCl2）中洗涤。洗涤后的5-HT1A膜在室温SSB中均化，并在10μM 5-HT存在和不存在的情况下与0.004至2.3 nM的12种浓度的[3H]WAY-100635一起孵育，以分别测定总结合和非特异性结合。同样，将洗涤过的hD4.2膜在室温DABB中进行Dounce均质化，并在10μM氯丙嗪存在和不存在的情况下，用0.004至13.4 nM的12种浓度的[3H]WAY-100635孵育，以分别测定总结合和非特异性结合。在室温下2小时后，通过在冷的0.3%PEI预浸过滤器上快速过滤来终止反应。然后在4°C 50 mM Tris-HCl（pH 6.9）中洗涤过滤器三次。然后将过滤后的材料转移到与4ml Ecoscint-A闪烁液（National Diagnostic；美国佐治亚州亚特兰大）混合的闪烁瓶中，并在Beckman LS6500闪烁计数器上计数。[6] 放射性配体结合分析。[6] 细胞在20cm平板上生长至融合。倾析生长培养基，用10ml冰冷的裂解缓冲液（1mM HEPES，pH 7.4和2mM EDTA）代替。10分钟后，从平板上刮下细胞，在30000×g和4°C下离心20分钟。使用Kinematica均质器在6的设置下将所得沉淀重新悬浮在4 ml受体结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4和4 mM MgCl）中5秒，然后将1.0 ml等分试样再次在13000×g下离心10分钟。将沉淀储存在-80°C下直至使用。[6] 然后将颗粒重新悬浮，在受体结合缓冲液（50μg蛋白质/100μl）中研磨使用，并一式两份添加到含有0.1-0.2 nM[3H]斯皮龙和适当药物的测定管中。使用（+）-丁卡醇（5μM）测定非特异性结合。如cAMP结合测定所述，在过滤前，将测定管在37°C下孵育30分钟。将滤板干燥，并向每个孔中加入30μl Packard Microscint-O闪烁液。使用Packard TopCount闪烁计数器测定每孔的放射性。[6] 还进行了放射性配体结合试验，以研究100μM鸟苷基-5′-亚氨基二磷酸（Gpp-[NH]p）对激动剂结合的影响。这些实验是在改良的受体结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，4 mM MgCl和120 mM NaCl）中使用HEK-hD4.4膜进行的。 |
| 细胞实验 |
使用已加载 2 M NaC1 (12 MΩ–15 MΩ) 的玻璃微电极进行细胞外记录。两或三毫秒双相动作电位、缓慢（0.5 Hz - 2.0 Hz）放电模式和规则放电模式是将细胞区分为 5-HT 神经元的特征。将 α-1 肾上腺素能激动剂去氧肾上腺素 (3 μM) 添加到超融合 ACSF 中，以引起原本沉默的神经元放电。在使用各种药物之前，跟踪基线活动至少十分钟。精确的动作电位耦合到 A/D 转换器和 PC 驱动单独的动作电位，从而驱动示波器、电子速率计和高输入阻抗放大器。使用专用软件测量、计算积分发射率，并将其作为连续 10 秒样本显示在图表记录器上。通过比较 WAY 100635 应用前两分钟内记录的平均放电频率与药物作用峰值时记录的频率（通常是应用开始后两到五分钟）来评估激动剂的效果。当在拮抗剂存在的情况下应用激动剂时，将激动剂的效果与在拮抗剂单次灌注期间观察到的基线放电速率和频率进行对比。在重新测试激动剂的作用之前，拮抗剂需要十到二十五分钟的时间来适应。
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| 动物实验 |
溶于 0.9% NaCl 溶液；250 μL (30.4 μCi/mL)；静脉注射。雄性 CD1 小鼠，体重 25-30 g。
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| 参考文献 |
[1]. J Pharmacol Exp Ther . 1996 Aug;278(2):679-88. [2]. Behav Brain Res . 1996;73(1-2):337-53. [3]. Brain Res . 1997 Jan 16;745(1-2):96-108. [6]. Psychopharmacology (Berl). 2006 Oct;188(2):244-51. |
| 其他信息 |
N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-(2-吡啶基)环己烷甲酰胺是哌嗪类化合物的一员。
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| 分子式 |
C29H38N4O6
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|---|---|
| 分子量 |
538.6352
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| 精确质量 |
538.279
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| CAS号 |
634908-75-1
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| 相关CAS号 |
WAY-100635;162760-96-5
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| PubChem CID |
5684
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 沸点 |
594.8ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
313.5ºC
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| LogP |
3.54
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| tPSA |
123.51
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
546
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| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H])N(C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=N1)C([H])([H])C([H])([H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2OC([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H].O([H])C(C([H])=C([H])C(=O)O[H])=O
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| InChi Key |
SBPRIAGPYFYCRT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H34N4O2/c1-31-23-12-6-5-11-22(23)28-18-15-27(16-19-28)17-20-29(24-13-7-8-14-26-24)25(30)21-9-3-2-4-10-21/h5-8,11-14,21H,2-4,9-10,15-20H2,1H3
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| 化学名 |
N-[2-[4-(2-methoxyphenyl)piperazin-1-yl]ethyl]-N-pyridin-2-ylcyclohexanecarboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8565 mL | 9.2826 mL | 18.5653 mL | |
| 5 mM | 0.3713 mL | 1.8565 mL | 3.7131 mL | |
| 10 mM | 0.1857 mL | 0.9283 mL | 1.8565 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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