Indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) (Ki = 0.37 μM) [1]

黄连碱的 IC50 值为 6.3 μM，Ki 值为 5.8 μM，是一种高效的非竞争性 IDO 抑制剂[1]。共氧辛 (0.1-100 μM) 抑制 A549、H460、H2170、MDA-MB-231 和 HT-29 细胞的生长，IC50 值依次为 18.09、29.50、21.60、20.15 和 26.60 μM 。在 A549 细胞中，黄连碱（12.5、25 和 50 μM）浓度依赖性地导致 G2/M 停滞和细胞凋亡，下调细胞周期蛋白 B1、cdc2 和 cdc25C 的表达，并增加 pH2AX 和 p21 的表达。在 A549 细胞中，复合复合物（12.5、25、50 μM）还会导致线粒体功能障碍并触发 caspase 活性。此外，黄连碱 (50 μM) 会以时间依赖性方式（0.5、1、2、4、12 和 24 小时）升高 ROS 水平 [3]。

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- 黄连碱（0.1-10 μM）呈剂量依赖性抑制IFN-γ刺激的BV2小胶质细胞中IDO酶活性，减少KYN生成及KYN/TRP比值[1]
- 用黄连碱（1、5、10 μM）处理IFN-γ刺激的BV2细胞，可下调IDO的mRNA和蛋白表达（通过qPCR和Western blot检测）[1]
- 黄连碱（5、10、20、40 μM）以剂量和时间依赖性方式抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖（48小时IC50 = 18.7 μM，通过MTT法检测）[3]
- 黄连碱（10、20、40 μM）诱导A549细胞G2/M期周期阻滞，流式细胞术分析显示G2/M期细胞比例增加，G0/G1期细胞比例降低[3]
- 黄连碱（10、20、40 μM）诱导A549细胞产生活性氧（ROS），引发线粒体介导的凋亡：凋亡率升高（Annexin V-FITC/PI染色）、线粒体膜电位降低（JC-1染色）、Bax/Bcl-2比值上调、caspase-3、-8、-9活化（通过Western blot检测）[3]
- 用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理，可逆转黄连碱诱导的A549细胞ROS生成、线粒体功能障碍及凋亡[3]

小鼠对黄连碱的LD50值为880.18 mg/kg，其毒性随浓度增加而增加。 154mg/kg/天的剂量连续90天对SD大鼠没有引起毒性。除了不同程度地增加 HDL-c 含量并减缓 HFHC 饮食带来的体重增加之外，copoxin（23.35、46.7、70.05 mg/kg，口服）还以剂量依赖性方式增加仓鼠粪便胆固醇和 TBA 水平方式。它还降低了动物血清中的 TC、TG 和 LDL-c 水平。黄连碱（70.05 mg/kg，口服）可诱导参与胆固醇代谢的 SREBP-2、LDLR 和 CYP7A1 蛋白的表达，从而降低 HMGCR 蛋白表达水平 [2]。

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- 在APP/PS1双转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠（6月龄）中，口服给予黄连碱（20、40 mg/kg/天）连续3个月，显著改善小鼠认知功能障碍。与溶媒组相比，小鼠在Morris水迷宫测试中的逃避潜伏期延长，新物体识别测试中的辨别指数提高，被动回避测试中的穿梭潜伏期增加[1]
- 黄连碱（20、40 mg/kg/天）降低AD小鼠血清和脑（海马、皮层）中犬尿氨酸（KYN）水平及KYN/色氨酸（TRP）比值，并下调海马和皮层中IDO的mRNA和蛋白表达（通过qPCR和Western blot检测）[1]
- 黄连碱（20、40 mg/kg/天）减少AD小鼠海马和皮层中β淀粉样蛋白（Aβ）斑块数量（通过免疫组织化学检测）[1]
- 在高脂饮食（HFD）喂养的叙利亚金黄仓鼠中，口服给予黄连碱（50、100 mg/kg/天）连续4周，与HFD对照组相比，显著降低血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平[2]
- 黄连碱（50、100 mg/kg/天）降低HFD喂养仓鼠肝脏组织的TC和TG含量，并下调肝脏胆固醇合成相关基因（HMGCR、SREBP-2）和脂质蓄积相关基因（PPARγ）的mRNA表达（通过qPCR检测）[2]

- 重组人IDO蛋白与不同浓度的黄连碱（0.01-10 μM）和L-色氨酸（底物）在反应缓冲液中孵育，37°C保温1小时后终止反应，通过高效液相色谱（HPLC）检测反应产物KYN的浓度，计算IDO酶活性抑制率及Ki值[1]

- BV2小胶质细胞实验：细胞接种后，用IFN-γ（20 ng/mL）刺激24小时诱导IDO表达，再加入黄连碱（0.1-10 μM）继续培养24小时。采用qPCR检测IDO mRNA表达（以GAPDH为内参），Western blot检测IDO蛋白水平，HPLC检测细胞上清液中KYN和TRP浓度[1]
- A549细胞增殖实验：细胞接种于96孔板，用黄连碱（5-40 μM）处理24、48、72小时，加入MTT试剂，检测570 nm处吸光度值以计算细胞活力[3]
- A549细胞周期实验：细胞用黄连碱（10-40 μM）处理24小时，收集后用乙醇固定，碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析细胞周期分布[3]
- A549细胞凋亡实验：细胞用黄连碱（10-40 μM）处理24小时，Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术检测凋亡率；JC-1染色后流式细胞术检测线粒体膜电位[3]
- A549细胞Western blot实验：细胞用黄连碱（10-40 μM）处理24小时，裂解提取蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜后，用抗Bax、Bcl-2、caspase-3、-8、-9及β-肌动蛋白（β-actin）抗体孵育，显影并定量条带强度[3]
- A549细胞ROS检测：细胞负载DCFH-DA探针后，用黄连碱（10-40 μM）处理24小时（部分细胞预先用NAC处理1小时），流式细胞术检测ROS水平[3]

AD小鼠模型（APP/PS1双转基因小鼠）：将6月龄雄性小鼠随机分为载体组和黄连素治疗组（20、40 mg/kg/天，每组n=10）。黄连素溶于0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液中。小鼠每日灌胃给药，持续3个月。处死前进行认知功能测试（莫里斯水迷宫、新物体识别、被动回避）。收集血清、海马和皮层组织用于犬尿氨酸/色氨酸比值（KYN/TRP）检测、qPCR、Western blot和免疫组织化学分析[1]
- 高胆固醇血症仓鼠模型：雄性叙利亚金仓鼠喂食高脂饮食（HFD）2周以诱导高胆固醇血症，然后随机分为HFD对照组和黄连素治疗组（50、100 mg/kg/天，每组n=8）。正常饮食组作为对照组。黄连素溶于蒸馏水中，每日灌胃给药，持续4周。每周记录体重。治疗结束后，收集血清检测血脂谱（TC、TG、LDL-C、HDL-C），并收集肝组织进行TC/TG含量测定和qPCR分析[2]

吸收、分布和排泄
延胡索（Corydalis saxicola Bunting）是多种中药方剂的重要组成部分。延胡索已被证实具有多种药理活性，包括抗菌、抗病毒和抗癌活性。其活性成分包括脱氢卡维定、黄连碱、脱氢阿波卡维定和四脱氢斯科林。本研究旨在利用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）研究延胡索在大鼠体内的药代动力学和组织分布。血浆中四种活性生物碱的系统清除率超过肝血流量的93%，表明它们可能通过肝脏快速清除。静脉和口服给药后，经尿液排泄的药物不足10%，提示这四种生物碱可能在体内发生显著代谢，或者药物可能通过尿液以外的其他途径排泄。口服给药后这四种生物碱的排泄量显著低于静脉给药，提示口服给药后存在显著的首过效应。较高的表观分布容积表明这四种生物碱在大鼠体内分布广泛。我们的结果还表明，口服给药后这四种生物碱可以被吸收，尽管只有不到15%的药物被吸收进入体循环。总之，这四种活性生物碱在大鼠体内良好的口服生物利用度使得炎黄连提取物值得进一步研究以提高其口服生物利用度。
研究黄连碱氯化物（COP）和黄连红素（BRB）作为某些中药化学成分在人肠道上皮细胞中的吸收情况。本研究以Caco-2（人结肠腺癌细胞系）细胞单层为肠上皮细胞模型，考察了COP和BRB从顶端（AP侧）到基底外侧（BL侧）以及从BL侧到AP侧的通透性。采用反相高效液相色谱-紫外检测器联用技术测定了这两种生物碱的浓度。计算了转运参数和表观渗透系数（P_app），并与普萘洛尔和阿替洛尔的相应参数进行了比较。同时，还将P_app值与已报道的模型化合物（普萘洛尔和阿替洛尔）的数值进行了比较。 COP和BRB的P(app)值分别为(1.103 ± 0.162) × 10⁻⁵和(1.309 ± 0.102) × 10⁻⁵ cm·s⁻¹（从AP侧到BL侧），以及(0.300 ± 0.041) × 10⁻⁵和(1.955 ± 0.055) × 10⁻⁵ cm·s⁻¹（从BL侧到AP侧）。它们的P(app)值与普萘洛尔[(2.23 ± 0.10) × 10⁻⁵ cm·s⁻¹]（一种跨细胞转运标记物，作为高渗透性对照物质）的P(app)值相同。另一方面，BRB的外排转运比内流转运高1.49倍，P(app)值为0.67。 A-->B)/P(app B-->A)。但COP的P(app A-->B)/P(app B-->A)值为3.67，表明在Caco-2细胞单层模型中，外排转运并未参与其吸收机制。COP和BRB均可被肠上皮细胞吸收，且均为完全吸收的化合物。BRB可能参与了Caco-2细胞单层模型中从基底外侧到顶端的外排机制。
为了确定黄连中总生物碱、小檗碱、黄连碱、小檗碱和巴马汀在大鼠体内的药代动力学、分布及相互转化，将总生物碱和小檗碱喂饲大鼠后，采用反相高效液相色谱法测定其在血浆、组织和胃肠道中的含量。血液中小檗碱的峰值时间为2.0。分别为 5.0 小时（Cmax 3.7 mg·L⁻¹）和 5.0 小时（Cmax 2.8 mg·L⁻¹）。大鼠血液中的小檗碱可转化为掌叶防己碱。灌胃给予大鼠总生物碱后，胃内小檗碱含量单调下降，而黄连碱、巴马汀和掌叶防己碱含量逐渐升高，推测小檗碱可能在胃内转化为掌叶防己碱。动物实验表明，小檗碱和巴马汀主要分布于动物肺脏，其次分布于肝脏；而掌叶防己碱和黄连碱主要分布于肝脏，其次分布于肺脏。小檗碱可转化为掌叶防己碱。血液中小檗碱出现两个最大血药浓度的机制可能部分与胃肠道的推进作用有关。
吸收和转运机制本研究采用Caco-2细胞摄取和转运模型，研究了小檗碱、巴马汀、叶黄素和黄连碱的摄取和转运情况，并分别加入环孢素A和维拉帕米作为P-糖蛋白（P-gp）抑制剂，以及MK-571作为多药耐药相关蛋白2（MRP2）抑制剂。在摄取实验中，小檗碱、巴马汀、叶黄素和黄连碱均能被Caco-2细胞摄取，且在环孢素A或维拉帕米存在下，其摄取量增加。在转运实验中，小檗碱、巴马汀、叶黄素和黄连碱的表观P(AP-BL)值介于0.1至1.0×10⁶ cm/s之间，低于表观P(BL-AB)值。所有化合物的ER值均大于2。环孢素A和维拉帕米均能增加这些化合物的摄取量。 P(app) (AP-BL) 升高，但黄连素、巴马汀、肉豆蔻碱和黄连碱的 P(app) (BL-AB) 降低；ER 值降低 >50%。MK-571 对黄连素、巴马汀、肉豆蔻碱和黄连碱的跨膜转运无影响。在 1-100 μM 的浓度范围内，黄连素、巴马汀、肉豆蔻碱和黄连碱对 Rho123 的双向转运无显著影响。黄连素、巴马汀、肉豆蔻碱和黄连碱均为 P-gp 的底物；在 1-100 μM 的浓度范围内，黄连素、巴马汀、肉豆蔻碱和黄连碱对 P-gp 无抑制作用。
焦台丸 (JTW) 是一种重要的中药方剂，由黄连和肉桂粉（Cortex cinnamomi powder）是传统中医治疗失眠的著名方剂，已沿用数百年。本研究旨在比较正常大鼠和失眠大鼠体内肉桂粉主要活性成分——五种原小檗碱类生物碱（即小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和掌叶防己碱）的药代动力学特性。我们还研究了单次给药和多次给药后这五种原小檗碱类生物碱的药代动力学差异。失眠大鼠模型通过腹腔注射单剂量对氯苯丙氨酸（PCPA）建立。采用快速液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量分析大鼠血浆中五种原小檗碱类生物碱的浓度。在不同时间点采集血浆样本，绘制药物浓度-时间曲线，构建药代动力学曲线，并估算药代动力学参数。采用SPSS 17.0软件进行学生t检验。单剂量正常组的五种原小檗碱类生物碱吸收缓慢、生物利用度低，且达峰时间延迟。单剂量口服给药后，失眠大鼠体内五种成分的Cmax和Tmax与正常大鼠相比存在显著差异。多次口服给药后，失眠大鼠体内五种原小檗碱类生物碱的药代动力学参数变化较大。正常大鼠单剂量和多次口服给药的主要药代动力学参数（如Cmax和Tmax）存在显著差异（p<0.05）。失眠大鼠多次给药组的五种成分吸收优于单剂量组。尤其值得注意的是，多次给药模型组的血浆浓度曲线出现了三个峰。五种成分的药代动力学行为本文描述了原小檗碱类生物碱。在正常组和模型组中，多次给药的药代动力学行为与单次给药相比均存在显著差异；无论单次给药还是多次给药，失眠大鼠的药代动力学行为均与正常大鼠存在显著差异。多次给药可能提高失眠大鼠对JTW的吸收，从而提高其生物利用度，并发挥更积极的治疗作用。

在喂食高脂饮食的仓鼠中，连续4周口服黄连素（50、100 mg/kg/天）未引起体重、食物摄入量或器官系数（肝、肾、脾）的显著变化。血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平均在正常范围内，表明未观察到明显的肝毒性或肾毒性[2]
- 黄连素在浓度高达10 μM时未诱导BV2细胞产生明显的细胞毒性（MTT法检测）[1]

[1]. The IDO inhibitor coptisine ameliorates cognitive impairment in a mouse model of Alzheimer's disease. J Alzheimers Dis. 2015;43(1):291-302.

[2]. The safety and anti-hypercholesterolemic effect of coptisine in Syrian golden hamsters. Lipids. 2015 Feb;50(2):185-94.

[3]. Coptisine-induced cell cycle arrest at G2/M phase and reactive oxygen species-dependent mitochondria-mediated apoptosis in non-small-cell lung cancer A549 cells. Tumour Biol. 2017 Mar;39(3):1010428317694565.

黄连碱是一种生物碱，它是一种代谢产物。
据报道，黄连碱存在于峨眉黄连、紫堇以及其他有相关数据的生物体中。
另见：加拿大血根（部分）；白屈菜（Chelidonium majus）花序顶端（部分）。

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- 黄连碱是一种天然异喹啉生物碱，提取自黄连等中药材[1][2][3]
- 黄连碱改善阿尔茨海默病相关认知障碍的机制包括抑制IDO活性和表达、减少犬尿氨酸（KYN）生成以及减轻Aβ沉积[1]
- 黄连碱通过下调肝脏胆固醇合成基因（HMGCR、SREBP-2）和脂质积累基因（PPARγ）的表达发挥降胆固醇作用[2]
- 黄连碱对A549细胞的抗肿瘤作用是通过ROS依赖性线粒体凋亡途径和G2/M期细胞周期阻滞介导的[3]

C19H14NO4

320.3188

320.092

3486-66-6

Coptisine Sulfate;1198398-71-8;Coptisine chloride;6020-18-4

72322

Typically exists as solid at room temperature

212-217℃

-0.87

40.8

0

4

0

24

502

0

O1C([H])([H])OC2=C1C([H])=C1C(=C2[H])C([H])([H])C([H])([H])[N+]2C([H])=C3C4=C(C([H])=C([H])C3=C([H])C=21)OC([H])([H])O4

XYHOBCMEDLZUMP-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C19H14NO4/c1-2-16-19(24-10-21-16)14-8-20-4-3-12-6-17-18(23-9-22-17)7-13(12)15(20)5-11(1)14/h1-2,5-8H,3-4,9-10H2/q+1

5,7,17,19-tetraoxa-13-azoniahexacyclo[11.11.0.02,10.04,8.015,23.016,20]tetracosa-1(13),2,4(8),9,14,16(20),21,23-octaene

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。