| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DDX5 (p68) – a multifunctional DEAD-box RNA helicase and master regulator oncoprotein. FL118 binds directly to DDX5 with high affinity (KD = 34.4 nM) and induces its dephosphorylation and degradation via the ubiquitin-proteasome pathway. This leads to downstream inhibition of survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2, c-Myc, and mutant Kras [3].
Cytoglobin (CYGB) – FL118 upregulates CYGB expression, which mediates its anti-proliferative and anti-migratory effects in ovarian cancer cells [4]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性： FL118抑制A549（肺癌）、MDA-MB-231（乳腺癌）和RM-1（小鼠前列腺癌）细胞的增殖，IC50值范围为2.32 nM至4.53 μM。在A549细胞中，IC50 = 8.94 ± 1.54 nM；在MDA-MB-231细胞中，IC50 = 24.73 ± 13.82 nM；在RM-1细胞中，IC50 = 69.19 ± 8.34 nM。相比之下，伊立替康的IC50值为9.14 μM（A549）和7.82 μM（MDA-MB-231）[2]。
在卵巢癌ES-2和SK-OV-3细胞中，FL118以剂量和时间依赖性方式抑制细胞增殖和迁移。在100 nM浓度下，FL118在24-72小时后显著降低细胞活力和迁移距离。FL118以剂量依赖性方式上调胞红蛋白的mRNA和蛋白表达，CYGB敲低可部分逆转FL118的抗增殖和抗迁移作用。FL118还抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路（增加p-AKT和p-mTOR）并调节EMT标志物（增加E-cadherin，减少vimentin）[4]。 在HCT-8结肠癌细胞中，FL118（1-100 nM）抑制survivin、Mcl-1、XIAP、cIAP2和c-Myc表达。其抑制细胞生长和集落形成的效力比拓扑替康强约25倍。FL118不是P-gp/MDR1或ABCG2外排泵的底物，其疗效不受这些转运体的影响。FL118具有高Caco-2通透性（Papp = 6.76-8.86 × 10⁻⁶ cm/s）和极低的外排比（1.0-1.2）[1]。 (R)-FL118 在 B16、MCF-7、HS578T、DU145 和 MPC3 细胞中的 IC50 值分别为 392.7、32.53、129.3、138.7 和 92.51 ng/mL，抑制黑色素瘤、乳腺癌和前列腺癌细胞系。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内活性： 在携带伊立替康耐药FaDu头颈癌肿瘤的小鼠中，FL118（1.5 mg/kg腹腔注射，隔日一次×5）有效消除了耐药肿瘤；部分消退后复发的肿瘤对第二个FL118治疗周期仍有反应 [1]。
在携带拓扑替康耐药FaDu肿瘤的小鼠中，FL118（1-1.5 mg/kg腹腔注射，隔日一次×5）有效消除了耐药肿瘤 [1]。 在HCT116结肠癌异种移植瘤中，FL118（10 mg/kg腹腔注射，每日一次，连续14天）抑制肿瘤体积76%，优于5-FU（41%抑制）和伏立诺他（26%抑制）[1]。 在人PDAC患者来源异种移植瘤模型中，FL118（2.5 mg/kg口服，每周一次×4）使高DDX5表达的PDX19015和PDX17624肿瘤消退，而低DDX5表达的PDX12872敏感性较低。与低剂量吉西他滨（40 mg/kg）联用可消除PDX12872肿瘤 [3]。 在CRC异种移植瘤中，FL118（5 mg/kg口服，每周一次×4）有效抑制高DDX5表达的SW620和SW837肿瘤生长，而低DDX5表达的SW480和SW948肿瘤敏感性较差 [3]。 在ES-2卵巢癌异种移植瘤中，FL118（5或10 mg/kg口服，每周一次，连续20天）的抗肿瘤活性优于拓扑替康（2 mg/kg，每周5次）。10 mg/kg剂量下，60%的肿瘤完全消失。FL118上调肿瘤组织中的CYGB表达 [4]。 在小鼠气管内药效模型中，FL118抑制IL-6诱导的肺pSTAT3（JAK1/JAK2），ED50约为3 μg/只动物 [1]。 在小鼠耳部皮肤模型中，4%的局部FL118在11天内使IL-23诱导的耳肿胀减少48% [1]。 |
| 酶活实验 |
对于FL118与DDX5的结合，使用纯化的Flag-DDX5蛋白（10 μM）和FL118（100 μM）在含8% DMSO的1× PBS（pH 7.4）中进行等温滴定量热法测定。在25°C下，通过20次注射（每次3分钟）将化合物滴定到蛋白池中。结合亲和力（KD）计算为34.4 nM。对Top1的KD为315 nM；未检测到与BSA的结合 [3]。
对于FL118亲和纯化，通过Mannich反应将FL118通过二氨基二丙胺连接子偶联到琼脂糖树脂珠上。将癌细胞裂解液平行通过FL118亲和柱和对照柱。经过严格洗涤后，用8 M尿素洗脱结合蛋白，浓缩后通过SDS-PAGE分离。通过质谱鉴定~70 kDa蛋白条带为DDX5 [3]。 对于Caco-2通透性实验，将Caco-2细胞单层培养在胶原包被的聚碳酸酯膜上。将FL118（1 μM）加入顶端或基底侧，加或不加维拉帕米（valspodar，1 μM，P-gp抑制剂）。在120分钟时取样，通过LC-MS/MS分析。计算表观通透性和外排比。FL118显示出高通透性（Papp = 6.76-8.86 × 10⁻⁶ cm/s）和低外排比（1.0-1.2）[1]。 |
| 细胞实验 |
对于细胞毒性实验，将细胞接种于96孔板（2,000-7,000个/孔），用不同浓度的FL118处理24-72小时，通过MTT或刃天青法测定细胞活力。使用Logit方法计算IC50值 [1][2][4]。
对于集落形成实验，将HCT-8细胞（100个/孔，12孔板）用FL118或拓扑替康处理2或6小时，然后洗涤并培养2周。用结晶紫染色并计数集落 [1]。 对于蛋白质印迹实验，用RIPA缓冲液裂解细胞，通过SDS-PAGE分离蛋白质，转移至硝酸纤维素或PVDF膜，用针对DDX5、survivin、Mcl-1、XIAP、cIAP2、c-Myc、突变型Kras、p-AKT、p-mTOR、E-cadherin、vimentin、PARP、caspase-3以及上样对照（肌动蛋白、GAPDH、微管蛋白）的抗体进行检测。通过ECL显影 [1][3][4]。 对于siRNA敲低实验，使用Lipofectamine RNAiMAX将CYGB特异性siRNA或阴性对照转染细胞。48小时后，用FL118（100 nM）处理细胞，分析增殖（MTT）和迁移（划痕实验）[4]。 对于CRISPR-Cas9敲除DDX5，通过电穿孔将DDX5 sgRNA-Cas9核糖核蛋白复合物导入Panc-1和Mia Paca-2细胞。通过蛋白质印迹和PCR/T7内切酶实验验证敲除克隆 [3]。 对于划痕实验，将细胞接种于6孔板，生长至80-90%融合，用200 μL移液器吸头划痕，PBS洗涤，用含1% FBS的FL118（10-100 nM）处理24小时，测量迁移距离 [4]。 |
| 动物实验 |
对于药代动力学研究，给携带FaDu或SW620肿瘤（800 mm³）的SCID小鼠单次静脉注射FL118（1.5 mg/kg）。在10分钟、1、4、12、24和48小时收集血液和肿瘤组织。用酸化甲醇提取FL118，通过UPLC-荧光检测（Ex 370 nm，Em 510 nm）分析。以伊立替康为内标 [1]。
对于伊立替康/拓扑替康耐药模型，给携带已建立SW620或FaDu肿瘤的SCID小鼠用伊立替康（100 mg/kg腹腔注射，每周一次）或拓扑替康（4 mg/kg腹腔注射，每日一次×5）治疗，直至肿瘤获得耐药性。然后用FL118（0.75-1.5 mg/kg腹腔注射，隔日一次×5每周期）治疗耐药肿瘤 [1]。 对于异种移植瘤疗效研究，给SCID小鼠皮下接种癌细胞（1-3 × 10⁶）或肿瘤碎片（30-50 mg）。当肿瘤达到100-200 mm³（第0天）时，口服FL118（2.5-10 mg/kg，每周一次×4），或腹腔注射（0.75-10 mg/kg，隔日一次×5或每日一次×14天）。每周两次用卡尺测量肿瘤体积。制剂：FL118（0.1-0.5 mg/mL）、DMSO（0-5%）、羟丙基-β-环糊精（0.1-0.5%）、丙二醇（2.5%）、PEG400（2.5%）溶于生理盐水 [1][3][4]。 对于PDX模型，将人PDAC肿瘤碎片（30-40 mg）皮下移植到SCID小鼠中。当肿瘤达到100-200 mm³时开始治疗。口服给予FL118 2.5 mg/kg（1/4 MTD），每周一次×4。吉西他滨（40 mg/kg腹腔注射）用于联合治疗 [3]。 对于DDX5 KO肿瘤模型，将DDX5 KO Panc-1或Mia Paca-2细胞（2 × 10⁶）皮下注射到SCID小鼠中，监测肿瘤生长随时间的变化 [3]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在SCID小鼠中单次静脉注射FL118（1.5 mg/kg）后，FL118在肿瘤组织中快速积累并具有长半衰期（FaDu肿瘤中6.85小时，SW620肿瘤中12.75小时），但从循环中快速清除（血浆半衰期=1.788小时）。肿瘤中Cmax为1154 ng/g（FaDu）和1588 ng/g（SW620）；血浆中Cmax为438 ng/mL。肿瘤AUC为3448-4289 hr·ng/g；血浆AUC为1042 hr·ng/mL。注射后10分钟，肿瘤组织中FL118浓度是血浆的2.5倍以上 [1]。
FL118的cLogP为4.4，log D为3.9（摇瓶法）。含有一个弱碱性咪唑基团（pKa = 4.5）和一个弱酸性氟酚基团（pKa = 8.7）。TPSA = 126 Ų [1]。 在大鼠中，静脉注射（0.5 mg/kg）：CL = 48 mL/min/kg，CLunbound >48,000 mL/min/kg，Vss = 0.8 L/kg，终末T1/2 = 2.1小时，口服生物利用度<5%。在犬中，静脉注射（0.1 mg/kg输注）：CL = 18 mL/min/kg，CLunbound >18,000 mL/min/kg，Vss = 1.0 L/kg，终末T1/2 = 2.0小时。血浆蛋白结合率≥99.9% [1]。 在人肝细胞中的体外代谢：主要代谢物通过直接葡萄糖醛酸化和P450代谢产生；酚类结合代谢物不显示JAK抑制。在大鼠和犬中结果一致 [1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
FL118在小鼠中每日一次×5或隔日一次×5方案的最大耐受剂量约为1.5 mg/kg。对于每周一次×4方案，MTD为10 mg/kg [1][3]。
在大鼠和犬的7天静脉注射探索性毒理学研究中，未观察到与受试物相关的不良发现。基于预测的人体临床肺部剂量（200 μg），大鼠总血浆AUC达到了36倍安全窗口，犬血浆AUC达到了55倍安全窗口。BioLum Ames试验显示，无论有无代谢活化，均无遗传毒性；CHO体外微核试验也为阴性。1 μM时无hERG抑制（<1%抑制）。在小鼠Aδ纤维感觉神经制备物中，高达2 mg剂量未检测到咳嗽信号 [1]。 在卵巢癌异种移植研究中，FL118 10 mg/kg（口服，每周一次×4）与对照组相比引起显著的体重下降，而5 mg/kg组无统计学差异。拓扑替康（2 mg/kg，每周5次）也引起体重下降，但与对照组相比无统计学差异 [4]。 在PDX模型中，FL118 2.5 mg/kg（1/4 MTD）耐受性良好，体重变化极小。与吉西他滨（40 mg/kg）联用未增加毒性 [3]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
FL118是一种新型喜树碱类似物，在A环的10和11位含有一个独特的亚甲二氧基。它是通过使用survivin启动子驱动的荧光素酶报告系统进行高通量筛选发现的。与伊立替康/SN-38和拓扑替康不同，FL118不是ABCG2/BCRP或P-gp/MDR1外排泵的底物，其抗肿瘤活性不依赖于Top1表达。FL118选择性抑制多种癌症相关抗凋亡蛋白（survivin、Mcl-1、XIAP、cIAP2），并作为“分子胶降解剂”通过蛋白酶体途径结合、去磷酸化和降解DDX5癌蛋白，而不影响DDX5 mRNA。DDX5是控制survivin、Mcl-1、XIAP、cIAP2、c-Myc和突变型Kras的主调控因子 [3]。
FL118对结肠癌、头颈癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌等多种癌症具有广谱临床前抗肿瘤活性。它能在人肿瘤异种移植模型中克服伊立替康和拓扑替康耐药性。FL118目前正处于临床开发阶段 [1][3]。 |
| 分子式 |
C21H16N2O6
|
|---|---|
| 分子量 |
392.361545562744
|
| 精确质量 |
392.101
|
| 元素分析 |
C, 64.28; H, 4.11; N, 7.14; O, 24.47
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| CAS号 |
151636-76-9
|
| 相关CAS号 |
FL118;135415-73-5
|
| PubChem CID |
486154
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| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid powder
|
| LogP |
1.808
|
| tPSA |
99.88
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
852
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
CC[C@]1(C2=C(COC1=O)C(=O)N3CC4=C(C3=C2)N=C5C=C6C(=CC5=C4)OCO6)O
|
| InChi Key |
RPFYDENHBPRCTN-OAQYLSRUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H16N2O6/c1-2-21(26)13-5-15-18-11(7-23(15)19(24)12(13)8-27-20(21)25)3-10-4-16-17(29-9-28-16)6-14(10)22-18/h3-6,26H,2,7-9H2,1H3/t21-/m1/s1
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| 化学名 |
(4R)-4-Ethyl-4-hydroxy-8,9-methylenedioxy-1H-pyrano[3',4'
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| 别名 |
(R)-FL118; FL118; (R)-FL-118; FL 118; FL-118
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~2.7 mg/mL (~6.88 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5487 mL | 12.7434 mL | 25.4868 mL | |
| 5 mM | 0.5097 mL | 2.5487 mL | 5.0974 mL | |
| 10 mM | 0.2549 mL | 1.2743 mL | 2.5487 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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