| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The N-terminal active site of Angiotensin I-Converting Enzyme (ACE) is identified as the primary and specific site for the hydrolysis of N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro (AcSDKP) (Km = 31 µM, kcat = 16 s⁻¹, kcat/Km = 0.5 µM⁻¹·s⁻¹). The C-terminal active site of ACE also hydrolyzes AcSDKP but with a much lower catalytic efficiency (Km = 39 µM, kcat = 0.40 s⁻¹, kcat/Km = 0.01 µM⁻¹·s⁻¹). [1]
TGFβ1/Smad2 signaling pathway (inhibition of Smad2 phosphorylation and nuclear translocation). [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
N-乙酰基-Ser-Asp-Lys-Pro 特别容易被 ACE 破坏，并且其血浆水平随着 ACE 抑制剂的治疗而显着增加。用 N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro 处理的大鼠心脏成纤维细胞的流式细胞术表明，细胞从细胞周期的 G0/G1 期到 S 期的进展明显减慢。此外，在用 N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro 处理的心脏成纤维细胞中，Smad2 磷酸化和核转位有所减少 [1]。 N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸似乎通过抑制干细胞特异性增殖刺激剂的作用并优先作用于静止祖细胞来发挥此功能[2]。 N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro 抑制胶原酶表达，其激活与 TIMP-1 和 TIMP-2 产量增加有关。 N-乙酰基-Ser-Asp-Lys-Pro 使 IL-1β 介导的 MMP-2 和 MMP-9 活性以及 MMP-13 表达增加正常化 [3]。
使用重组人ACE酶（野生型、N功能域突变体、C功能域突变体）的动力学研究表明，AcSDKP可被ACE的N端和C端活性位点水解。然而，N端活性位点的催化效率 (kcat/Km) 比C端活性位点高约50倍，确立了其作为AcSDKP裂解的主要位点。[1] ACE对AcSDKP的水解依赖于pH和氯离子。所有三种酶形式（野生型、N域和C域突变体）的最适活性均在pH 6.5。野生型ACE和N域突变体的活性在约50 mM NaCl时最佳，并在更高氯离子浓度下受到抑制，而C域突变体在约300 mM NaCl时达到最佳活性。磷酸根离子强烈抑制所有酶形式对AcSDKP的水解。[1] 一种特异性针对ACE N端活性位点的单克隆抗体 (i2H4) 能完全抑制N域突变体和野生型ACE对AcSDKP的水解，但对C域突变体的水解影响极小，证实了AcSDKP对N端位点的特异性。[1] ACE抑制剂卡托普利和赖诺普利抑制AcSDKP的水解。对于野生型ACE和N域突变体，两种抑制剂的IC₅₀值约为2 nM。对于C域突变体，IC₅₀值约为30 nM，表明对两个活性位点的抑制效力不同。[1] AcSDKP（0.01 与 1 nmol/L）显著抑制血清刺激的新生大鼠心脏成纤维细胞增殖（MTS法检测，吸光度分别从 0.445±0.009 降至 0.379±0.009 与 0.371±0.005；P<0.001）。 AcSDKP（1 nmol/L）抑制 TGFβ1 刺激的心脏成纤维细胞增殖（吸光度从 0.393±0.009 降至 0.358±0.012）。 AcSDKP（0.01 与 1 nmol/L）抑制心脏成纤维细胞从 G0/G1 期向 S 期转换（流式细胞术显示，G0/G1 期细胞比例保持在 82.4±0.4% 与 83.7±0.5%，而血清刺激对照组为 75±1.4%）。 AcSDKP（1 nmol/L）在转染 Smad 敏感荧光素酶报告基因的心脏成纤维细胞中，使 TGFβ1 诱导的 Smad 结合元件启动子活性降低 55.3±9.7%。[2] AcSDKP 以剂量依赖性方式降低 TGFβ1 刺激的心脏成纤维细胞中 Smad2 的磷酸化水平（Western blot 验证）。[2] AcSDKP（1 与 100 nmol/L）降低 TGFβ1 刺激的心脏成纤维细胞中 Smad2 的核转位（核染色阳性细胞比例从 72±4.9% 降至 58±3.4% 与 56±4.04%）。[2] AcSDKP（1 nmol/L）在 5% 胎牛血清存在下刺激大鼠主动脉平滑肌细胞增殖（细胞数从 42,375±7,368 增加至 79,240±3,488 个/mL）。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro 抑制高血压引起的去氧肾上腺素下调、白蛋白尿、胶原蛋白沉积和炎症细胞浸润。在高血压小鼠中，这可能具有肾脏保护特性 [4]。
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| 酶活实验 |
AcSDKP水解的标准酶学实验在37°C下，在含有Tris-马来酸盐、ZnSO₄和NaCl的缓冲液中进行，设三复孔。将酶（野生型或突变体重组ACE）与一系列浓度未标记的AcSDKP（掺入痕量氚标记AcSDKP，[³H]AcSDKP）孵育。通过冷冻终止反应。加入载体肽，混合物进行高压纸电泳以分离底物和放射性二肽产物 ([³H]Lys-Pro)。通过闪烁计数定量每个斑点的放射性，以计算水解百分比和初始反应速率。[1]
为研究pH依赖性，将酶与AcSDKP在不同pH（5.0-9.0）的缓冲液中孵育。固定孵育时间后测定活性。[1] 为研究氯离子激活，将酶与AcSDKP在含有不同浓度NaCl（0-600 mM）的缓冲液中孵育，并测定活性。[1] 对于单克隆抗体抑制实验，将酶与不同摩尔比的抗N域抗体i2H4在4°C下预孵育过夜。然后测定其对AcSDKP的残留酶活性。[1] 对于ACE抑制剂研究，将酶与不同浓度的卡托普利或赖诺普利在37°C下预孵育30分钟。然后测定其对AcSDKP的残留活性。为了比较，在类似预孵育条件下，也评估了这些抑制剂对另一个底物Hip-His-Leu（主要由C端活性位点裂解的底物）水解的抑制作用。[1] |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验（MTS法）： 将心脏成纤维细胞接种于96孔板，用低血清培养基同步化24小时后，用10%胎牛血清或TGFβ1刺激，并加入或不加入AcSDKP。24小时后加入MTS试剂，孵育4小时，于490 nm测量吸光度。[2]
细胞周期分析（流式细胞术）： 处理心脏成纤维细胞后，用胰酶消化，洗涤，碘化丙啶染色，流式细胞仪分析细胞周期分布。[2] 荧光素酶报告基因实验： 将心脏成纤维细胞转染Smad敏感荧光素酶报告质粒与对照质粒。24小时后，用TGFβ1刺激，并在刺激前15分钟加入AcSDKP。24小时后用双荧光素酶系统检测活性。[2] Western blot 分析： 处理细胞后裂解，提取总蛋白，使用特异性抗体检测Smad2、磷酸化Smad2、Smad4、Smad7及GAPDH，化学发光法显影。[2] 免疫细胞化学： 细胞固定、透化、封闭后，与Smad2抗体4°C孵育过夜，再与HRP标记的二抗及链霉亲和素-HRP孵育，DAB显色观察核内Smad2定位。[2] 平滑肌细胞增殖实验（细胞计数仪）： 将PAC1细胞血清饥饿24小时后，用5%胎牛血清刺激，并加入或不加入AcSDKP。24小时后用细胞计数仪计数。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
AcSDKP是一种内源性四肽，由血管紧张素转换酶（ACE）特异性降解。在ACE抑制剂治疗期间，AcSDKP的血浆水平可升高至20 nmol/L。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
戈拉肽是一种四肽，其序列为Ser-Asp-Lys-Pro，N端氨基连接一个乙酰基。它选择性抑制原始造血细胞增殖，并具有抗炎、抗纤维化和促血管生成特性。它可作为抗炎剂和促血管生成剂发挥作用。其功能与Ser-Asp-Lys-Pro相关。它是戈拉肽(1-)的共轭酸。
N-乙酰基-Ser-Asp-Lys-Pro (AcSDKP)是一种最初从胎牛骨髓中分离得到的四肽。它通过阻止造血干细胞进入细胞周期的S期，发挥造血干细胞增殖的负调控作用（血液调节肽）。 [1] 该研究发现，AcSDKP是首个已知的天然且高度特异性的ACE N端活性位点底物，其动力学常数处于生理范围内。这表明ACE可能通过其N端结构域参与体内局部AcSDKP浓度的调节。[1] 作者提出，ACE N端活性位点的特异性抑制剂可能用于提高AcSDKP的体内稳定性和生理浓度。这可能有利于癌症治疗，通过可逆地维持正常造血干细胞处于静止状态，从而在细胞毒性化疗期间保护这些细胞，同时不干扰ACE C端活性位点的血压调节功能。[1] AcSDKP是ACE N端活性位点的特异性底物，并被ACE灭活。 [2] 在ACE抑制剂治疗期间，AcSDKP水平显著升高，提示ACE抑制剂可能通过一条新的途径（不依赖于血管紧张素II）抑制心脏纤维化。[2] AcSDKP抑制心脏成纤维细胞增殖，但刺激血管平滑肌细胞增殖，表明其具有细胞类型特异性效应。[2] |
| 分子式 |
C20H33N5O9
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|---|---|
| 分子量 |
487.50412
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| 精确质量 |
487.227
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| CAS号 |
127103-11-1
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| 相关CAS号 |
N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro acetate;N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro TFA
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| PubChem CID |
65938
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
992.0±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
553.7±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.565
|
| LogP |
-1.91
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| tPSA |
238.93
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| 氢键供体(HBD)数目 |
7
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
14
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
776
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
CC(NC(C(NC(C(NC(C(N1CCCC1C(O)=O)=O)CCCCN)=O)CC(O)=O)=O)CO)=O
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| InChi Key |
HJDRXEQUFWLOGJ-AJNGGQMLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H33N5O9/c1-11(27)22-14(10-26)18(31)24-13(9-16(28)29)17(30)23-12(5-2-3-7-21)19(32)25-8-4-6-15(25)20(33)34/h12-15,26H,2-10,21H2,1H3,(H,22,27)(H,23,30)(H,24,31)(H,28,29)(H,33,34)/t12-,13-,14-,15-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-acetamido-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0513 mL | 10.2564 mL | 20.5128 mL | |
| 5 mM | 0.4103 mL | 2.0513 mL | 4.1026 mL | |
| 10 mM | 0.2051 mL | 1.0256 mL | 2.0513 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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