Antihelminthic; STAT3 (IC50 = 0.25 μM in HeLa cells); ROS; NF-κB; mTORC1; Wnt/β-catenin; Notch;
Niclosamide monohydrate targets STAT3, a transcription factor involved in cell proliferation, survival, and immune response. It inhibits STAT3 with an IC50 of 0.25 μM in HeLa cells. In parasites, it targets mitochondrial oxidative phosphorylation, inhibiting energy metabolism.

尼克酰胺一水合物（0.6 nM-46 µM）处理可降低BD140A、SW-13和NCI-H295R细胞中肾上腺皮质癌细胞的增殖[3]。尼克酰胺一水合物（0.05-5 μM，24小时）处理可抑制HeLa细胞中STAT3介导的荧光素酶报告基因活性[4]。尼克酰胺一水合物（10 μM）处理可降低Vero E6细胞中的病毒复制[5]。体外实验表明，尼克酰胺一水合物对HeLa细胞中STAT3的抑制IC50为0.25 μM。它还能抑制无细胞实验中的DNA复制。其抗寄生虫活性源于对绦虫线粒体能量代谢的抑制。

尼克酰胺（100 mg/kg、200 mg/kg；每周一次；持续 8 周）灌胃给药可抑制体内肾上腺皮质癌肿瘤的形成[3]。

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尼克酰胺可抑制体内肾上腺皮质癌肿瘤的生长[3]
为了验证我们的体外观察结果，我们评估了尼克酰胺治疗在肾上腺皮质癌异种移植模型中的效果。两种剂量（100 mg/kg 和 200 mg/kg）的尼克酰胺治疗均耐受良好，小鼠未观察到毒性或副作用。各组间体重无显著差异（图 5）。治疗 4 周后，与溶剂对照组相比，接受 100 mg/kg 和 200 mg/kg 尼克酰胺治疗的小鼠肿瘤生长分别抑制了 60% 和 80%（两组的 P 值均 < 0.01）（图 5）。相同的治疗方案持续8周，此时，与对照组相比，两个治疗组的肿瘤生长抑制率均超过90%。
在体内，尼克酰胺一水合物是一种口服有效的驱虫药，用于治疗绦虫感染。它能使绦虫在胃肠道内崩解并排出体外。由于其对STAT3的抑制作用，目前也在研究其抗癌活性。

蛋白激酶谱分析（表S1）：委托一家合同研究机构（CRO）对22种不同的蛋白激酶进行了分析。所有蛋白激酶均在Sf9昆虫细胞或大肠杆菌中表达为重组GST融合蛋白或His标签蛋白。蛋白激酶采用GSH-琼脂糖或Ni_NTH-琼脂糖亲和层析法进行纯化。使用放射性蛋白激酶活性测定法测定了这22种蛋白激酶的激酶活性。简而言之，对于每种蛋白激酶，50 μl 反应混合物包含 60 mM HEPES-NaOH、3 mM MgCl2、3 mM MnCl2、3 μM 原钒酸钠、1.2 mM DTT、50 0.02 0.2 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 药物浓度(μM) 相对菌落数（占对照组的百分比） IC50：0.1μM S9 μg/ml PEG20000、1 μM [γ-33P]-ATP（约 6×1005cpm）、测试化合物、适量的酶及其底物。 PKC-α 检测体系中还包含 1 mM CaCl₂、4 mM EDTA、5 μg/ml 磷脂酰丝氨酸和 1 μg/ml 1,2-二油酰甘油。反应混合物在 37℃ 下孵育 60 分钟，并用 50 μl 2% (v/v) H₃PO₄ 终止反应。使用微孔板闪烁计数器测定 ³³Pi 的掺入量。活性和 IC₅₀ 值使用 Quattro Workflow V2.28[4] 计算。总之，尼克酰胺（一种 FDA 批准的驱虫药）被鉴定为 STAT3 信号通路的新型小分子抑制剂。该药物能有效抑制STAT3的激活、核转位和转录激活，但对密切相关的STAT1和STAT5蛋白、上游JAK1、JAK2和Src激酶或其他受体酪氨酸激酶无明显影响。此外，尼克酰胺能抑制STAT3靶基因的转录，并诱导组成型激活STAT3的癌细胞发生细胞生长抑制、凋亡和细胞周期阻滞。尽管尼克酰胺作为抗绦虫药物在人体内药代动力学特征并不理想（例如，口服生物利用度低），但它是一种新型的、具有水杨酰胺骨架的强效先导化合物，可用于开发STAT3通路抑制剂，作为新型分子靶向抗癌药物。尼克酰胺的进一步结构优化和广泛的机制研究正在进行中，相关结果将适时公布。[4]
尼克酰胺一水合物的体外STAT3抑制试验采用HeLa细胞或其他表达STAT3的细胞系进行。细胞用浓度范围为0.01至10 µM的化合物处理1-24小时。STAT3磷酸化水平通过Western blotting或ELISA进行检测。

细胞活力测定 [4]
细胞类型： Hela 细胞
测试浓度： 0.05-5 μM
孵育时间： 24 小时
实验结果： 抑制 STAT3 介导的荧光素酶报告基因活性，IC50 为 0.25 μM。

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细胞活力检测[5]
细胞类型： Vero E6 细胞
测试浓度： 10 μM
孵育时间： 2 天
实验结果： 抑制 Vero E6 细胞中 SARS-CoV 病毒抗原的合成。

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细胞增殖检测[3]
根据细胞系的不同，将 3 × 10³ 或 6 × 10³ 个细胞接种于 96 孔板中。加入 100 µL 含有药物或溶剂的新鲜培养基。使用 CyQuant 试剂盒，按照制造商的说明进行细胞计数，并使用 SpectraMax M5 微孔板读数仪（激发波长 485 nm/发射波长 538 nm）测量细胞数量。所有检测均进行四次重复，实验重复三次。

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NCI-H295R 和 SW-13 细胞（可形成多细胞聚集体 (MCA) 或球状体）根据细胞系的不同，以 1 × 10⁵ 个细胞/0.5 mL 或 6 × 10⁴ 个细胞/0.5 mL 的密度接种于超低聚集 24 孔板中。球状体在 37°C、5% CO₂ 的条件下培养一至两周，每周更换两次培养基。球状体用不同浓度的氯硝柳胺或溶剂处理，并每周成像。

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Caspase 3/7 活性检测[3]
将细胞接种于 96 孔板中，并用氯硝柳胺或溶剂处理。根据制造商说明，使用 Caspase-Glo 3/7 检测试剂盒测定 Caspase 3/7 活性。

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细胞周期分析[3]
将细胞接种于六孔板中，并用氯硝柳胺或溶剂处理。48 小时后，将细胞在 4°C 下用 70% 乙醇固定 30 分钟，然后用含有 100 mg/mL 核糖核酸酶 A 的 50 µg/mL 碘化丙啶染色。使用 Canto I 流式细胞仪和 CellQuest 软件进行流式细胞术分析。每个样本至少生成 20,000 个事件的数据，并使用 Modfit 软件进行分析。

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细胞迁移实验[3]
将 NCI-H295R 和 SW-13 细胞接种于六孔板中，并用不同浓度的氯硝柳胺或溶剂处理 24 小时。细胞经胰蛋白酶消化后，以每0.5 mL 1 × 10⁵个细胞的密度接种于Transwell小室中。下室加入含10% FBS的DMEM培养基作为趋化因子。根据细胞系的不同，细胞迁移培养24小时或48小时后，进行固定和Diff-Quik染色。每个孔随机选取三个视野进行成像和计数，所有实验均重复三次。对于BD140A细胞（该细胞在Boyden小室模型中不迁移），在伤口愈合实验中，将细胞接种于六孔板中直至汇合，然后用氯硝柳胺或溶剂对照处理。使用无菌移液器吸头划伤细胞，并在不同时间点拍照。
氯硝柳胺一水合物的细胞实验使用HeLa细胞或其他癌细胞系进行。将细胞置于浓度为 0.01 至 10 µM 的化合物溶液中处理 24 至 72 小时。采用 MTT 或 CCK-8 法评估细胞活力。通过检测 STAT3 靶基因的表达来测定 STAT3 活性。

动物/疾病模型： 注射 NCI-H295R 细胞的 Nu+/Nu+ 小鼠 [3]
剂量： 100 mg/kg，200 mg/kg
给药途径： 灌胃（po）；100 mg/kg，200 mg/kg；每周一次；持续 8 周
实验结果： 与对照组相比，肿瘤生长抑制了 60%-80%。

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体内小鼠研究[3] 动物实验已获得美国国家癌症研究所动物护理和使用委员会的批准。小鼠的饲养和饲养均符合美国国立卫生研究院 (NIH) 动物研究咨询委员会 (ARAC) 的指导原则。将 5 × 10⁶ 个 NCI-H295R 细胞注射到 Nu+/Nu+ 小鼠的侧腹部。肿瘤生长后，将小鼠随机分为三组（每组8只）。小鼠每日通过灌胃给予100 mg/kg尼克酰胺、200 mg/kg尼克酰胺或赋形剂（PEG500）。每周用游标卡尺测量肿瘤大小并记录。
尼克酰胺一水合物的体内动物研究在寄生虫感染或癌症的啮齿动物模型中进行。在抗寄生虫研究中，动物感染绦虫后口服该化合物。通过虫体数量和粪便虫卵计数评估疗效。在抗癌研究中，使用肿瘤异种移植模型。

尼克酰胺一水合物在胃肠道的吸收率很低，全身吸收率低于10%。它几乎不溶于水，但溶于乙醇。由于全身吸收率低，其应用仅限于局部胃肠道治疗。

尼克酰胺一水合物在治疗剂量下通常耐受性良好。常见副作用包括胃肠道不适。对该药物过敏者禁用。

[1]. The biology and toxicology of molluscicides, Bayluscide. Pharmacol Ther. 1982;19(2):245-95.

[2]. Niclosamide: Beyond an antihelminthic drug. Cell Signal. 2018 Jan;41:89-96.

[3]. Identification of Niclosamide as a Novel Anticancer Agent for Adrenocortical Carcinoma. Clin Cancer Res. 2016 Jul 15;22(14):3458-66.

[4]. Identification of Niclosamide as a New Small-Molecule Inhibitor of the STAT3 Signaling Pathway. ACS Med Chem Lett. 2010 Sep 7;1(9):454-9.

[5]. Inhibition of severe acute respiratory syndrome coronavirus replication by niclosamide. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Jul;48(7):2693-6.

尼可洛沙胺是一种仲酰胺，由5-氯水杨酸的羧基与2-氯-4-硝基苯胺的氨基缩合而成。它是一种口服驱虫药，获准用于治疗绦虫感染。尼可洛沙胺具有多种药理作用，包括杀鱼、杀软体动物、抗寄生虫、抗冠状病毒、驱虫、诱导细胞凋亡和抑制STAT3。它属于一氯苯、水杨酰苯胺、C-硝基化合物、仲酰胺和苯甲酰胺类化合物。其结构与5-氯水杨酸相关。尼可洛沙胺是一种用于治疗绦虫感染的驱虫药。线虫是多细胞生物，可以感染大量人群并引起多种疾病。超过10亿人感染肠道线虫，另有数百万人感染丝虫、吸虫和绦虫。这些寄生虫对牲畜构成更大的威胁。尼古丁酰胺曾以尼洛西德（Nilocide）的商品名在美国销售，但拜耳公司于1996年主动将其撤出市场。尼古丁酰胺是一种高生物利用度的口服氯水杨酸苯胺类药物，具有驱虫和潜在的抗肿瘤活性。口服后，烟酸通过蛋白酶体介导的途径特异性地诱导雄激素受体（AR）变体V7（AR-V7）的降解。这会下调AR变体的表达，抑制AR-V7介导的转录活性，并减少AR-V7与前列腺特异性抗原（PSA）基因启动子的结合。尼古丁酰胺还能阻断AR-V7介导的STAT3磷酸化和激活。这抑制了AR/STAT3介导的信号通路，并阻止了STAT3靶基因的表达。总之，这可能抑制AR-V7过表达癌细胞的生长。AR-V7变体由AR外显子1/2/3/CE3的顺序剪接编码，在多种癌细胞类型中表达上调，并与癌症进展和对AR靶向疗法的耐药性相关。烟酰胺用于治疗大多数绦虫感染。线虫是多细胞生物，可感染大量人群并引起多种疾病。超过10亿人感染肠道线虫，另有数百万人感染丝虫、吸虫和绦虫。它们对牲畜构成更大的威胁。烟酰胺是一种对大多数绦虫有效的驱虫药。

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用于治疗绦虫和肠道吸虫感染：牛带绦虫（Taenia saginata）、猪带绦虫（Taenia solium）、阔节裂头绦虫（Diphyllobothrium latum）、布氏片吸虫（Fasciolopsis buski）。烟酰胺也可作为杀软体动物剂用于控制血吸虫病。

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治疗用途：烟酰胺仅以游离碱形式使用，主要用作绦虫杀灭剂，其次用作吸虫杀灭剂。本品为咀嚼片，每片含500毫克烟磺胺。对猪带绦虫（Taenia solium）、猪带绦虫（Taenia suis）和阔节裂头绦虫（C. broadenum）引起的绦虫感染非常有效；然而，对微小膜壳绦虫（Hymenolepis minimus）、矮膜壳绦虫（Hymenolepis dwarfusus）和犬复孔绦虫（Dipylidium canis）等绦虫的治疗较为困难。对于由猪带绦虫（Taenia solium）、猪绦虫（Taenia suis）和宽腹腔绦虫（C. broadenum）引起的感染，推荐的单次口服剂量为：成人2克，体重超过34公斤的儿童1.5克，体重11-34公斤的儿童1.0克。其他绦虫感染可能需要重复治疗，例如：成人每日一次，每次2克，连续7天；体重超过34公斤的儿童每日一次，每次1.5克，之后每日一次，每次1克，连续6天；体重11-34公斤的儿童每日一次，每次1克，之后每日一次，每次500毫克，连续6天。该药对2岁以下儿童的安全性尚未确定。由于氯硝柳胺仅对肠道绦虫有效，因此对囊虫病无效。作为一种吸虫，氯硝柳胺主要对肠道吸虫（例如布氏肝吸虫）有效。

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药效学
烟酰胺是一种用于治疗绦虫感染的驱虫药。其作用机制可能涉及将电子传递链与ATP合酶解偶联。这一关键代谢途径的破坏会阻止三磷酸腺苷（ATP）的生成，而ATP是为代谢提供能量的必需分子。

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吸收
烟酰胺在胃肠道中的吸收似乎极少——在血液或尿液中检测不到该药物及其代谢物。
胃肠道吸收极少……Gilman, AG, TW Rall, AS Nies, and P. Taylor (eds.). Pharmacological Basis of Therapeutic Drugs, Goodman and Gilman. 8th ed. New York, NY. Pergamon Press, 1990, p. 965. 将虹鳟鱼暴露于 (14)C-拜耳 73 后，胆汁与水中 (14)C 的比例达到 10,000:1。暴露 24 小时后，对鱼的未分级胆汁进行薄层色谱分析，结果显示只有一个主要的放射性峰。胆汁中发现了未改变的拜耳 73。

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代谢物/代谢物
驱虫药烟酰胺……可被小鼠和绵羊的肝酶以及绦虫和线虫的酶还原为相应的氨基衍生物。……烟酰胺不能被哺乳动物和蠕虫的酶或完整的蠕虫水解。

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作用机制
烟酰胺通过接触杀死绦虫发挥作用。成虫（但不包括虫卵）会被迅速杀死，这可能是由于氧化磷酸化解偶联或ATPase活性增强所致。被杀死的虫体随后随粪便排出，有时会在肠道内被破坏。尼可沙星可能通过与DNA结合并破坏DNA发挥其杀软体动物作用。
尼可酰胺对大多数感染人类的绦虫具有显著的活性；蛲虫（Enterobius (Oxyuris) vermicularis）也对其敏感。低浓度的尼可酰胺可刺激微小膜壳绦虫的氧气吸收，但高浓度则会抑制呼吸作用并阻断葡萄糖吸收。该药物的主要作用可能是抑制寄生虫线粒体中二磷酸腺苷（ADP）的无氧磷酸化，这是一个依赖于二氧化碳固定的能量产生过程……Gilman, AG, TW Rall, AS Nies, and P. Taylor (eds.). 《治疗药物的药理学基础》（第8版），古德曼和吉尔曼著，佩加蒙出版社，纽约，1990年，第965页。
烟酰胺的烟碱活性源于其对绦虫葡萄糖摄取的抑制以及对绦虫线粒体氧化磷酸化的解偶联。由此导致的克雷布斯循环阻滞会引起乳酸积累，从而杀死绦虫。……线粒体腺苷三磷酸酶（ATPase）活性的过度刺激可能与烟酰胺的绦虫杀灭作用有关。

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毒性概述
烟酰胺的作用机制是接触杀灭绦虫。成虫（而非虫卵）会被迅速杀死，这可能是由于氧化磷酸化的解偶联或ATPase活性的刺激所致。被杀死的蠕虫随后随粪便排出，有时会在肠道内被破坏。烟酰胺可能通过与DNA结合并损伤DNA发挥其杀软体动物作用。我们鉴定了21种活性化合物，它们在所有三种细胞系中的疗效均>80%。其中，烟酰胺比已知的抗腺样囊性癌（ACC）药物更有效，且IC50值更低。我们随后验证了烟酰胺对所有三种ACC细胞系增殖的抑制作用。接下来，我们研究了烟酰胺抑制ACC细胞增殖的机制，发现它能诱导caspase依赖性细胞凋亡和G1期细胞周期阻滞。烟酰胺还能降低细胞迁移，并减少上皮-间质转化（EMT）介质（如N-钙黏蛋白和波形蛋白）的水平。此外，烟酰胺处理导致β-连环蛋白表达降低。我们还评估了烟酰胺对腺样囊性癌（ACC）细胞系能量代谢的影响，发现其可导致线粒体解偶联。烟酰胺治疗抑制了小鼠ACC肿瘤的生长，且未观察到毒性。结论：我们的结果表明，烟酰胺通过抑制ACC中多种异常的细胞通路和细胞代谢发挥其抗ACC活性。我们的结果为在ACC临床试验中评估烟酰胺疗法提供了临床前基础。[3] 抑制信号转导和转录激活因子3（STAT3）信号通路被认为是治疗组成型激活的STAT3介导的人类癌症的一种新型治疗策略。在本研究中，我们报道了烟酰胺（一种FDA批准的驱虫药）作为一种新型小分子STAT3信号通路抑制剂的发现。该化合物能有效抑制STAT3的激活和转录功能，从而诱导STAT3持续激活的癌细胞发生细胞生长抑制、凋亡和细胞周期阻滞。我们的研究提供了一种新型且有前景的先导化合物，其具有水杨酰胺骨架，可用于开发STAT3通路抑制剂，作为新型分子靶向抗癌药物。[4]
尼克酰胺一水合物（BAY2353）是一种口服有效的驱虫药，用于治疗绦虫感染。它也是一种强效的STAT3抑制剂（在HeLa细胞中IC50 = 0.25 μM）。它是FDA批准的驱虫药。

C13H8N2O4CL2.H2O

345.1349

343.997

C, 45.24; H, 2.92; Cl, 20.54; N, 8.12; O, 23.18

73360-56-2

Niclosamide;50-65-7;Niclosamide olamine;1420-04-8;Niclosamide sodium;40321-86-6;Niclosamide-13C6 monohydrate;1325559-12-3;Niclosamide;50-65-7; 36466-48-5 (piperazine); 73360-56-2 (hydrate);

12296604

Typically exists as solid at room temperature

224-229ºC

4.702

107.87

3

5

2

22

404

0

O=C(NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1Cl)C2=CC(Cl)=CC=C2O.O

ZBXRPLQCPHTHLM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H8Cl2N2O4.H2O/c14-7-1-4-12(18)9(5-7)13(19)16-11-3-2-8(17(20)21)6-10(11)15;/h1-6,18H,(H,16,19);1H2

5-chloro-N-(2-chloro-4-nitrophenyl)-2-hydroxybenzamide;hydrate

5-Chloro-N-(2-chloro-4-nitrophenyl)-2-hydroxybenzamide monohydrate; Niclosamide (monohydrate); BAY2353 monohydrate; UNII-20Z25R1145; 2',5-Dichloro-4'-nitrosalicylanilide monohydrate; Niclosamide monohydrate; 20Z25R1145;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。