| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HSF1 (heat shock factor 1)
Heat shock factor 1 (HSF1) pathway inhibitor. The compound binds to pirin (putative transcription factor regulator) with a K_D of 44 nM [2]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
NXP800（实施例169）（IC50=0.056μM）降低U20S细胞的活力。
CCT361814/NXP800 对一组9种遗传背景不同的人卵巢癌细胞系表现出强效的抗增殖活性（几何平均pGI50 >7.3）。其对SK-OV-3细胞的游离GI50为3.7 nM (fu,a = 0.43) [2]。 在一项替代生物标志物实验中，CCT361814/NXP800 在SK-OV-3细胞中阻断了HSP90抑制剂17-AAG诱导的HSP72表达，IC50为94 nM (pIC50 = 7.03 ± 0.07, n=40)，证实了其对HSF1通路的拮抗作用 [2]。 在经CCT361814/NXP800处理的癌细胞系和肿瘤异种移植物中进行的基因表达谱分析显示，热整合应激反应基因特征受到抑制，而相关的整合应激反应特征被激活。具体来说，处理增加了CHAC1 mRNA的表达，降低了HSPA1A mRNA的表达 [2]。 基于细胞的实验表明，CCT361814/NXP800 的P-糖蛋白（P-gp）介导的外排风险较低，表现为较低的CH1doxR/CH1WT外排比 [2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
药代动力学分析 [2] 物种途径 剂量 (mg/kg) Tmax (h) AUClast (ng·h/mL) Cltb (mL/min/kg) t1/2 (h) F (%) AUCu0-t ( h·nM) ) 游离 Cav0-24h (nM) Clu (mL/min/kg) 大鼠 口服/IV 5/1 6.0 2600（口服） 24 (iv) 3.1 45（口服） 86 3.7 730 (iv) 狗 口服/IV 2.5/0.5 2.0 250（口头） 21（IV） 1.4 9.1（PO） 35 1.9 150（IV）
在携带已建立的SK-OV-3人卵巢癌实体瘤异种移植物的免疫缺陷无胸腺裸鼠模型中，以35 mg/kg的剂量每日一次口服给予CCT361814/NXP800，连续20天，显示出显著的抗肿瘤活性。相对于对照组，肿瘤生长抑制率（TGI）为120%，10个肿瘤中有8个出现消退。基于最终平均肿瘤重量的T/C值为对照组的37% (p = 0.0008) [2]。 在同一模型中进行单剂量PK/PD研究（50 mg/kg 口服）表明，CCT361814/NXP800的游离肿瘤浓度超过其体外游离GI50的时间达21小时。肿瘤中PD生物标志物CHAC1蛋白的诱导和HSPA1A mRNA的减少与肿瘤游离药物浓度相关，证实了其对靶点通路的调节作用 [2]。 |
| 酶活实验 |
CH1doxR/CH1wt多药耐药性检测[2]
使用之前使用CellTiter Blue活力测定法描述的相同方法，在CH1wt和CH1doxR细胞中评估了化合物如NXP-800（CCT361814）的抗增殖活性。通过用2µM（R）-（+）-维拉帕米单盐酸盐水合物处理细胞，证实了CH1doxR细胞系抗增殖活性的挽救(http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/v106?lang=en®ion=GB，2017年2月）和双酰胺类似物。然后使用Student t检验和Welch校正比较CH1wt和CH1doxR细胞中每个细胞中至少n=3个生物重复的几何平均pGI50值（pGI50=-log GI50（M））；当p<0.05时，该化合物被认为是MDR底物（GraphPad Prism 7.01）。CH1doxR和CH1wt中几何平均GI50s的比率被定义为MDR比率[2]。 针对87个潜在高风险脱靶蛋白（Cerep面板）进行了竞争性结合实验。CCT361814/NXP800 显示出对腺苷A2A受体的拮抗作用，IC50为2.0 µM，这约比其有效游离浓度高100倍 [2]。 评估了细胞色素P450（CYP）抑制活性。CCT361814/NXP800 未显示出显著的CYP抑制（IC50 > 10 µM） [2]。 评估了hERG通道抑制活性。CCT361814/NXP800 未显示出hERG毒性（IC50 > 30 µM） [2]。 |
| 细胞实验 |
体外细胞活力测定[2]
CellTiter Blue活性测定提供了一种均匀的荧光法来估算活细胞的数量。它使用深蓝色指示染料刃天青来测量细胞的代谢能力，这是细胞存活率的指标。活细胞能够将刃天青还原为高度荧光的resorufin（粉红色）。简而言之，将细胞（约6 x 103个细胞/mL）接种到384孔板中，并孵育24小时。使用ECHO 550液体处理器加入不同浓度的化合物（例如NXP-800（CCT361814）），然后在37℃下放置96小时。向每个孔中加入滴定蓝试剂，并在37℃上放置3-4小时。使用Envision机器测量荧光。50%生长抑制浓度（GI50）是通过使用非线性回归将数据无限制地拟合到剂量反应曲线上来确定的。每种浓度测试两次[2]。 使用CellTiter-Blue细胞活力测定法确定抗增殖活性（GI50）。将细胞接种在96孔板中，用化合物处理96小时，然后测量荧光强度。通过拟合log[抑制剂]与反应-可变斜率（四参数）模型来估算GI50值 [2]。 使用配对的卵巢癌细胞系（CH1WT和获得性多柔比星耐药的CH1doxR）建立基于细胞的实验，作为评估P-gp介导外排的替代方法。计算CH1doxR和CH1WT细胞之间几何平均GI50值的倍数差异。显著性差异（p < 0.05，学生t检验）表明具有P-gp底物活性 [2]。 对于HSF1通路抑制生物标志物实验，用HSP90抑制剂17-AAG处理SK-OV-3细胞以诱导HSF1活性和随后的HSP72表达。与CCT361814/NXP800共处理可阻断这种诱导作用。使用基于细胞的ELISA法定量HSP72蛋白水平 [2]。 通过免疫印迹法证实，在经CCT361814/NXP800处理（19 nM，5倍游离GI50）的SK-OV-3细胞中，CHAC1蛋白被诱导表达 [2]。 |
| 动物实验 |
体内研究[2]
化合物22（NXP-800 (CCT361814)）溶于10% DMSO，并用90%无菌溶剂（25% w/v羟丙基-β-环糊精，溶于50 mM柠檬酸钠缓冲液，pH 5）稀释，使小鼠每10 g体重接受0.1 mL最终溶液，剂量为所需剂量。对照组仅接受等体积的溶剂。在多剂量耐受性研究中，NCr无胸腺小鼠（每组n=2）每天口服50 mg/kg或100 mg/kg的化合物22（NXP-800 (CCT361814)），连续5天。每日监测小鼠的痛苦迹象并测量体重，直至观察到小鼠完全恢复。化合物 22（NXP-800 (CCT361814)）以 100 mg/kg 的剂量给药时，小鼠无法耐受，因此在第 4 天终止了试验。在疗效研究中，将 SK-OV-3 细胞（每点 500 万个）皮下注射到 6 至 8 周龄雌性 NCr 无胸腺小鼠（n=20）的侧腹部。当肿瘤形成良好（直径约 5-6 mm）时开始给药。肿瘤体积的测定方法如前所述。试验结束后，采集血样，分离血浆并储存于 -80 ℃。[2] CHAC1 Western Blot 和 MSD 检测：将肿瘤组织快速冷冻于液氮中，并储存于 -80 ℃ 直至进行后续处理。将肿瘤组织裂解于 50 mM Tris-HCl (pH 7.4)、1 mM NaCl、1 mM EDTA、1% Triton X-100、1 mM NaF、1 mM 钒酸钠（活化）、10 µg/mL Nα-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基酮盐酸盐、5 µM 氰戊酸酯、5 µM bpVphen、1 mM 苯甲基磺酰氟、1:100 蛋白酶混合物和 1:50 磷酸酶抑制剂 2 和 3 中。使用 Direct Detect® 红外光谱仪测定蛋白质浓度。将各裂解液进行SDS-PAGE电泳分离，电转印至PVDF膜上，用5%脱脂奶粉封闭，然后用特异性一抗CHAC1（1:100稀释）和辣根过氧化物酶标记的二抗（1:1000）进行孵育。使用增强型化学发光试剂检测信号。甘油醛-3-磷酸脱氢酶（1:20000稀释）用作上样对照。所有试剂均购自[此处应填写公司名称]。为了在免疫缺陷的无胸腺小鼠中进行疗效研究，将SK-OV-3人卵巢癌细胞皮下植入小鼠体内。当肿瘤达到预定大小后，将小鼠随机分组。CCT361814/NXP800以35 mg/kg的剂量，每日一次口服（po），连续给药20天，期间不间断给药。定期监测肿瘤体积和体重[2]。 在BALB/c小鼠中进行药代动力学(PK)研究时，分别采用静脉注射(iv)和口服(po)给药CCT361814/NXP800。在24小时内采集血样。采用非房室模型分析，从血药浓度-时间曲线中得出PK参数[2]。 在野生型(CF1WT)和P-gp基因敲除(CF1PGK-KO)小鼠中进行了比较PK研究，以评估P-gp外排对清除率的贡献[2]。 在携带SK-OV-3异种移植瘤的无胸腺小鼠中进行了单剂量PK/PD研究。小鼠单次口服50 mg/kg CCT361814/NXP800。在多个时间点采集血浆和肿瘤样本，用于药物浓度分析和生物标志物（采用MSD法检测CHAC1蛋白，采用qPCR法检测HSPA1A mRNA）评估[2]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
化合物 22/NXP-800 (CCT361814) 的小鼠体内 CLu 与 MHeps 测定的预测值一致，并且与甲基类似物 16 相当（表 2，条目 1）。尽管亲脂性降低，但 CH1doxR/CH1WT 预测的 P-gp 介导的外排比率较低，氟双酰胺 22 在小鼠中显示出良好的口服生物利用度 (42%)，其总血清除率适中 (CLtb = 10 mL/min/kg，提取率 = 11%，Fmax = 89%)。22 由于这些有利的数据，选择氟双酰胺 22 来评估其在无胸腺免疫缺陷小鼠中对已建立的 SK-OV-3 人卵巢癌实体瘤异种移植瘤的体内疗效（表 5）。[1] 氟 MMP，化合物 22/NXP-800 (CCT361814)，令人满意地显示出所需的亲脂性降低（表 3，条目 6），这与体外 MLM (15 μL/min/mg) 和小鼠肝细胞 CLint 的降低相关；在保持优异的抗增殖活性（游离GI50 = 3.7 nM，fua = 0.43；表S4）39和可接受的KS值（50 μM）的同时，氟双酰胺22被提交进行体内小鼠药代动力学研究（表4，条目1）。
在免疫功能正常的BALB/c小鼠中，静脉注射5 mg/kg剂量后，CCT361814/NXP800的总血清除率（CLtb）为10 mL/min/kg，末端半衰期（t1/2）为4.0小时，分布容积（Vss）未明确说明。口服给药（5 mg/kg po）后，AUC0-6h为6000 hM，Tmax为2.0小时，口服生物利用度(F)为42%。血药游离分数(fub)为0.012，导致游离清除率(CLu)为830 mL/min/kg [2]。 在Sprague-Dawley大鼠中，静脉注射5 mg/kg后，CLtb为24 mL/min/kg，t1/2为3.1小时。口服给药（5 mg/kg po）后，AUC0-∞为2600 hM，生物利用度为45%。 fub为0.033，CLu为730 mL/min/kg [2]。 在比格犬中，静脉注射0.5 mg/kg后，CLtb为21 mL/min/kg，t1/2为1.4小时。口服给药（2.5 mg/kg）后，AUC0-∞为250 hnM，Tmax为2.0小时，生物利用度为9.1%。游离清除率 (fub) 为 0.14，游离清除率 (CLu) 为 150 mL/min/kg [2]。 CCT361814/NXP800 在 Caco-2 细胞试验中表现出中等的被动渗透性 (AB = 7.7 x 10-6 cm/s)，且外排比低 (2.8) [2]。 该化合物在模拟胃液中溶解度高，在模拟肠液中溶解度中等 [2]。 在小鼠、大鼠和人肝微粒体及肝细胞中评估了其体外代谢稳定性。预测的人肝细胞体内游离清除率用于人体剂量估算 [2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在免疫功能正常的BALB/c小鼠中，静脉注射5 mg/kg CCT361814/NXP800后，其总血药清除率（CLtb）为10 mL/min/kg，末端半衰期（t1/2）为4.0小时，分布容积（Vss）未明确测定。口服给药（5 mg/kg po）后，其AUC0-6h为6000 hM，Tmax为2.0小时，口服生物利用度（F）为42%。血液中游离药物分数 (fub) 为 0.012，导致游离清除率 (CLu) 为 830 mL/min/kg [2]。
在 Sprague-Dawley 大鼠中，静脉注射 5 mg/kg 后，CLtb 为 24 mL/min/kg，t1/2 为 3.1 小时。口服给药 (5 mg/kg po) 导致 AUC0-∞ 为 2600 hM，生物利用度为 45%。 fub为0.033，CLu为730 mL/min/kg [2]。 在比格犬中，静脉注射0.5 mg/kg后，CLtb为21 mL/min/kg，t1/2为1.4小时。口服给药（2.5 mg/kg）后，AUC0-∞为250 hnM，Tmax为2.0小时，生物利用度为9.1%。游离清除率 (fub) 为 0.14，游离清除率 (CLu) 为 150 mL/min/kg [2]。 CCT361814/NXP800 在 Caco-2 细胞试验中表现出中等的被动渗透性 (AB = 7.7 x 10-6 cm/s)，且外排比低 (2.8) [2]。 该化合物在模拟胃液中溶解度高，在模拟肠液中溶解度中等 [2]。 在小鼠、大鼠和人肝微粒体及肝细胞中评估了其体外代谢稳定性。预测的人肝细胞体内游离清除率用于人体剂量估算 [2]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
CCT251236 1 是一种强效化学探针，此前通过基于细胞的表型高通量筛选 (HTS) 开发，用于发现 HSF1 介导的转录抑制剂。HSF1 是一种促进恶性肿瘤发生的转录因子。由于其对难治性人卵巢癌模型具有活性，化合物 1 被推进至先导化合物优化阶段。降低 P-糖蛋白外排成为早期化合物优化的重点；通过匹配分子对分析证实，中心环卤素取代是降低这种不利影响的有效策略。进一步的多参数优化最终设计出临床候选药物 CCT361814/NXP800 22，这是一种强效且口服生物利用度高的氟双酰胺类化合物，在人卵巢腺癌异种移植模型中可引起肿瘤消退，并具有通路生物标志物调控和良好的体外安全性。由于其对人体的剂量预测结果良好，化合物 22 目前已进入 I 期临床试验，有望成为难治性卵巢癌和其他恶性肿瘤的潜在治疗药物。[2]
CCT361814/NXP800（也称为 CCT251236 衍生物或氟双酰胺 22）是一种临床候选药物，它是通过对 HSF1 通路抑制剂进行表型筛选而开发的。它旨在成为难治性卵巢癌和其他恶性肿瘤的潜在治疗药物。[2] 该化合物被认为通过抑制 HSF1 应激通路发挥“非癌基因成瘾”作用，而 HSF1 应激通路在卵巢癌等癌症的肿瘤发生和发展中起着重要作用。[2] 虽然其分子作用机制涉及吡啶结合和 HSF1 通路抑制，但尚未完全阐明。转录组分析和化学蛋白质组学研究正在进行中[2]。 基于临床前疗效和药代动力学数据，采用异速缩放法预测CCT361814/NXP800的人体剂量低于210 mg/人/天[2]。 在成功的临床前开发之后，CCT361814/NXP800于2022年进入癌症患者的I期临床试验（NCT05226507）[2]。 |
| 分子式 |
C32H32FN5O4
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|---|---|
| 分子量 |
569.63
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| 精确质量 |
569.243
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| 元素分析 |
C, 67.47; H, 5.66; F, 3.34; N, 12.29; O, 11.23
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| CAS号 |
1693734-80-3
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| 相关CAS号 |
1693734-80-3;
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| PubChem CID |
117996795
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| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
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| LogP |
3.7
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| tPSA |
96
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
919
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
N1C2C(=CC(C(NC3=CC(NC(C4=CC=C5OCCOC5=C4)=O)=CC=C3F)=O)=CC=2)C=CC=1CN1CCN(CC)CC1
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| InChi Key |
UBALMDIKIGDHJW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H32FN5O4/c1-2-37-11-13-38(14-12-37)20-25-6-3-21-17-22(4-9-27(21)34-25)32(40)36-28-19-24(7-8-26(28)33)35-31(39)23-5-10-29-30(18-23)42-16-15-41-29/h3-10,17-19H,2,11-16,20H2,1H3,(H,35,39)(H,36,40)
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| 化学名 |
N-[5-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxine-6-carbonylamino)-2-fluorophenyl]-2-[(4-ethylpiperazin-1-yl)methyl]quinoline-6-carboxamide
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| 别名 |
CCT-361814; NPX800; CCT 361814; SCHEMBL16621389; NXP-800; BDBM610359; CCT361814; NPX 800; NPX-800
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~175.55 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7555 mL | 8.7776 mL | 17.5553 mL | |
| 5 mM | 0.3511 mL | 1.7555 mL | 3.5111 mL | |
| 10 mM | 0.1756 mL | 0.8778 mL | 1.7555 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
阿螺旋霉素盐酸盐
SNX-2112 (PF-04928473)
BIIB021
鲁明司匹
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463611831
