| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DNMT1
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK-3685032（6天）的中位生长IC50值为0.64 μM，这表明它抑制大多数癌细胞系的发育[1]。由于在整个 6 天持续时间内生长 IC50 降低，GSK-3685032（0.1-1000 nM，第 1-6 天）在 3 天后表现出生长抑制 [1]。 GSK3685032（10-1000 nM，第 4 天）可增加免疫相关基因转录，呈剂量依赖性[1]。 DNMT1 蛋白的表达被 GSK3685032（3.2-10,000 nM，2 天）抑制 [1]。 GSK3685032 诱导 DNA 低甲基化和基因激活 [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
GSK3685032对DNMT1的抑制显示出体内疗效。[1]
当对小鼠施用GSK3685032时，其清除率低，分布量适中，血液半衰期>1.8小时，剂量比例暴露量为1至45 mg kg−1（扩展数据图6a-c）。基于这些体内吸收、分布、代谢和排泄特性，每天两次皮下给药GSK3685032可实现长期靶点参与（扩展数据图6d）。该给药方案耐受性良好，剂量高达至少45 mg kg−1，持续≥4周，对体重或行为和仪容没有明显不良影响（扩展数据图7a，b）。另一方面，一旦配制，DAC在化学上不稳定，在给药前立即重新配制。此外，由于胞苷脱氨酶的自发水解切割和快速代谢，它表现出较差的药代动力学特性16,17。此外，为了尽量减少重复给药后的毒性，使用了间歇给药方案来实现长期耐受的治疗方案。 MV4-11和SKM-1的皮下异种移植物模型显示，在≥30 mg kg−1 GSK3685032时，肿瘤生长抑制具有统计学意义的剂量依赖性，且明显消退（图8a、b和扩展数据图7c–f）。此外，在给药结束后的4周观察期后，这些动物中的大多数（≥60%）在停药期间肿瘤体积保持在≤200 mm3（图8c、d和扩展数据图7g、h）。关注MV4-11模型中45 mg kg-1 GSK3685032组，10只动物中有5只在给药的最后一天（第35天）肿瘤体积≤50 mm3。停药30天后，这五只动物的肿瘤体积保持在≤50 mm3，这表明在治疗期间退化的肿瘤子集在治疗停止后显示出持久的反应（扩展数据图7g）。相比之下，DAC仅实现了中度肿瘤生长抑制（在SKM-1和MV4-11中分别为18%和57%，与载体对照组相比），这在两种模型中都没有统计学意义（图8a、b和扩展数据图7c–f）。为了更好地复制AML疾病生理学，还探索了一种弥散性AML模型。给药30天后，GSK3685032在15、30和45 mg kg−1的剂量下以及DAC治疗下观察到统计学上显著的生存益处（图8e）。虽然DAC比赋形剂显示出13天的生存益处，但GSK3685032显示出>43天的生存效益，50%的小鼠在给药结束后存活了近7周。[1] 给药8天后，在SKM-1模型中评估药效作用。在所有剂量的GSK3685032中，肿瘤中都观察到剂量依赖性的DNA低甲基化，45 mg kg−1组的最大损失为46%（图8f）。相比之下，DAC的最大耐受剂量为每周三次，在药效学活性和肿瘤生长抑制方面更接近1 mg kg-1 GSK3685032剂量（图8b，f）。鉴于观察到的DAC临床毒性，包括中性粒细胞减少症、贫血和血小板减少症37，在小鼠中检查了给药对外周血的影响。在第28天给药结束时收集样本，并在27天的恢复期（第55天）后再次收集样本。虽然DAC诱导中性粒细胞、红细胞、血小板和许多其他血细胞成分在统计学上显著减少，但GSK3685032（1或5 mg kg−1）的剂量没有观察到统计学上的显著变化，尽管实现了类似的DNA低甲基化和肿瘤生长抑制（图8g和扩展数据图8a，b）。虽然更高剂量的GSK3685032显示中性粒细胞和红细胞减少，但尽管这些剂量显示出明显更大的DNA低甲基化和肿瘤生长抑制/消退，但效果仍然明显小于DAC观察到的效果。重要的是，在4周的给药假期后重新评估时，GSK3685032治疗动物的所有血液参数均恢复正常（扩展数据图8c）[1]。 |
| 酶活实验 |
荧光耦合破碎光分析。[1]
如前所述，使用半甲基化发夹寡核苷酸检查DNMT的活性39。最终测定浓度由125 nM DNA寡核苷酸和（1）40 nM全长DNMT1、2μM SAM组成；（2） 600 nM DNMT3A/3L，2.5μM SAM；或（3）300 nM DNMT3B/3L，0.15μM SAM。DNMT1的反应在40分钟（26°C）后淬灭，DNMT3A/3L和DNMT3B/3L的反应在120分钟（37°C）后淬灭。将化合物（10点，三倍连续稀释，100%二甲亚砜）预先印在黑色反应板上（最终2%二甲基亚砜）。通过用1:4比例的全甲基/半甲基化发夹寡核苷酸（ATDBio定制合成的5-FAM-ATCTAG5-me-dCG5me-dCATCAGTTTTCTGATG5me-dCTAGA-Dabcyl-3和5-FAM-ATCSAG5-me-dCATCAGTTTCTGATG 5me-dCG5me-dcTAGA-Daccyl-3）代替DNMT反应，进行Gla1计数器筛选。对于可逆性研究，在DNMT1与化合物（10×IC50）预孵育20分钟后，加入底物后，复合物迅速稀释100倍。通过稀释后不同时间点的淬灭，在70分钟内评估DNMT1活性的恢复情况。如Ariazi等人所述，数据符合固定的稳态速度方程。
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| 动物实验 |
GSK-3685032 或赋形剂（10% Captisol，用 1 M 乙酸调节 pH 至 4.5–5，4 °C 下保存最多 1 周）皮下注射，每日两次，每次剂量为 10 ml kg−1（每 20 g 体重 0.2 ml）。DAC（Sun Pharmaceutical Industries）腹腔注射，每周三次，每次剂量为 10 ml kg−1。DAC 用适量的厂家稀释剂（10 ml 水中含 68 mg 磷酸二氢钾和 11.6 mg 氢氧化钠）溶解，配制成浓度为 0.04 mg ml−1 的给药溶液，并在给药前立即使用（最终剂量为 0.4 mg kg−1）。[1]在查尔斯河实验室，我们评估了GSK-3685032在MV4-11人源性系统性急性髓系白血病（AML）模型（雌性NOD.CB17-Prkdcscid/NCrCrl小鼠）中的疗效。为了清除骨髓，在小鼠（10周龄）尾静脉注射MV4-11细胞前3天开始给予环磷酰胺（150 mg kg⁻¹）。注射后21天，根据体重和给药方案进行随机分组。在30天的研究期间，每组10只小鼠（共70只）接受给药，GSK-3685032或赋形剂每日皮下注射两次，而DAC每周腹腔注射两次。每周测量三次体重。如果单次观察到体重下降超过30%，或连续测量到体重下降超过25%，则对动物实施安乐死。与肿瘤进展相关的临床症状，例如后肢功能障碍或眼球突出，也导致了安乐死。研究终点为76天。[1] 另一项药代动力学研究在未经处理的动物（每组3只小鼠，共9只）中进行，小鼠分别接受单次静脉注射或皮下注射2 mg kg⁻¹（静脉注射，雄性CD-1小鼠）、2 mg kg⁻¹（皮下注射，雄性C57/BL6小鼠）或30 mg kg⁻¹（皮下注射，雌性Nu/Nu小鼠）的GSK-3685032，并在给药后24小时内采集混合血样。采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定血药浓度，并使用Phoenix WinNonlin v.6.3（Certara）软件，通过非房室模型分析，根据平均血药浓度-时间曲线估算药代动力学参数。采用线性梯形法则计算血药浓度-时间曲线下面积，直至达到最大浓度（Cmax），之后采用线性或对数插值法则计算每个递增梯形下的面积。剂量归一化曲线下面积（AUC）通过将AUC0-8 h除以剂量计算得出。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DNA甲基化是转录沉默的关键表观遗传驱动因素，在癌症中普遍存在异常调控。使用去甲基化药物（例如胞苷类似物地西他滨或阿扎胞苷）逆转DNA甲基化，已在血液系统恶性肿瘤中显示出临床疗效。这些核苷类似物可掺入复制中的DNA，并通过不可逆的共价相互作用抑制DNA胞嘧啶甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B。这些药物对正常血细胞具有显著毒性，因此限制了其临床剂量。本文报道了GSK3685032的发现，这是一种高效的首创DNMT1选择性抑制剂。晶体学研究表明，GSK3685032可与DNMT1的活性位点环竞争，从而进入两个CpG碱基对之间的半甲基化DNA区域。 GSK3685032 在体外可显著降低 DNA 甲基化水平，激活转录，并抑制癌细胞生长。与地西他滨相比，GSK3685032 具有更好的体内耐受性，因此在急性髓系白血病小鼠模型中可显著改善肿瘤消退和延长生存期。
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| 分子式 |
C22H24N6OS
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|---|---|
| 分子量 |
420.530562400818
|
| 精确质量 |
420.173
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| 元素分析 |
C, 62.83; H, 5.75; N, 19.98; O, 3.80; S, 7.62
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| CAS号 |
2170142-58-0
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| 相关CAS号 |
GSK-3685032;2170137-61-6;(R)-GSK-3685032;2170140-50-6
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| PubChem CID |
132233898
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to off-white solid at room temperature
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| LogP |
2.6
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| tPSA |
158
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
684
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CCC1=C(C(=NC(=C1C#N)S[C@@H](C2=CC=CC=C2)C(=O)N)N3CCC(CC3)N)C#N
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| InChi Key |
KNKHRZYILDZLRE-IBGZPJMESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H24N6OS/c1-2-16-17(12-23)21(28-10-8-15(25)9-11-28)27-22(18(16)13-24)30-19(20(26)29)14-6-4-3-5-7-14/h3-7,15,19H,2,8-11,25H2,1H3,(H2,26,29)/t19-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-[6-(4-aminopiperidin-1-yl)-3,5-dicyano-4-ethylpyridin-2-yl]sulfanyl-2-phenylacetamide
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| 别名 |
(S)-GSK-3685032; 2170142-58-0; SCHEMBL19717691; BDBM491622; US10975056, Example 605;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3780 mL | 11.8898 mL | 23.7795 mL | |
| 5 mM | 0.4756 mL | 2.3780 mL | 4.7559 mL | |
| 10 mM | 0.2378 mL | 1.1890 mL | 2.3780 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Lalistat 2
D-(-)-3-Phosphoglyceric acid disodium (3-Phospho-D-glyceric acid disodium)
STC-15
TSR-033
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