| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
6-Bnz-cAMP sodium salt selectively targets the cyclic AMP-binding domains of protein kinase A (PKA) regulatory subunits (RI and RII). Upon binding, it induces a conformational change that leads to dissociation of the catalytic subunits, which then phosphorylate Ser/Thr residues on downstream protein targets. It has negligible affinity for Epac1 and Epac2, the other major cAMP-binding proteins. This exquisite selectivity makes it the standard pharmacological tool for specifically activating PKA in cells without engaging Epac-mediated pathways. It does not target adenosine receptors.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明,6-Bnz-cAMP钠盐在无细胞体系中能选择性地激活PKA,其EC50值在低微摩尔范围内(通常为1-10 uM)。在以纯化PKA全酶(50 nM)为底物的无细胞激酶活性测定中,6-Bnz-cAMP(10 uM)可将其催化活性提高10倍以上,与cAMP相当。相反,在核苷酸交换实验(使用Epac特异性FRET传感器)中,6-Bnz-cAMP并未激活Epac蛋白。即使浓度高达500 uM,也未观察到Epac的激活,证实了其极高的选择性。此外,该化合物与8-CPT-2Me-cAMP(一种Epac激活剂)联用时,还能抑制血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖,表明其对细胞生长具有协同作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
6-Bnz-cAMP钠盐通常不作为体内治疗药物使用,但在动物研究中,它已被用作激活PKA和研究生理过程的研究工具。例如,在心肌梗死大鼠模型中,冠状动脉内注射6-Bnz-cAMP(10 uM)可通过增加PKA介导的磷蛋白磷酸化来改善左心室功能,从而增强心肌收缩力。在小鼠中,腹腔注射50 mg/kg 6-Bnz-cAMP可增加海马中CREB的磷酸化,并被用于研究记忆巩固。该化合物具有快速的细胞渗透性,使其适用于离体组织研究。
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| 酶活实验 |
该化合物不用于纯化酶结合测定受体占有率。取而代之的是,采用标准的PKA活性测定方法。对于cAMP依赖性PKA激活测定,采用非放射性方法:配制反应混合物,其中包含50 mM Tris-HCl(pH 7.5)、10 mM MgCl2、0.1 mM ATP、50 uM kemptide底物(LRRASLG)和0.1 ug PKA全酶。加入0.1-100 uM 6-Bnz-cAMP钠盐。在30℃孵育10分钟。使用PKA激酶活性试剂盒,通过ELISA或ADP-Glo发光法检测磷酸化肽,该试剂盒使用针对磷酸化kemptide的特异性抗体。测定激活的EC50值。使用cAMP(1-100 uM)作为完全激活的阳性对照。可以使用基于 FRET 的 EPAC 传感器在单独的检测中评估 Epac 激活情况。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测:将HEK293T、HeLa或原代心肌细胞接种于6孔板(1×10⁶个细胞/孔),培养至70-80%汇合度。细胞在无血清培养基中过夜饥饿。然后,用6-Bnz-cAMP钠盐(1-500 uM)或溶剂(对照)处理细胞15-60分钟。通过Western blotting检测磷酸化CREB(p-CREB Ser133)来评估PKA的激活情况。对于功能研究,在处理前24小时将含有CRE-荧光素酶的报告质粒转染到细胞中。处理6小时后,裂解细胞并测量荧光素酶活性。或者,将细胞与基于FRET的PKA活性报告分子(例如AKAR3)孵育。实时FRET成像可以捕捉PKA激活的动力学过程。与 PKA 抑制剂 H-89 (10 uM) 共同治疗证实了其特异性。
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| 动物实验 |
对于啮齿动物体内研究:使用雄性C57BL/6小鼠(8-10周龄)。将6-Bnz-cAMP钠盐溶解于无菌PBS或生理盐水中,浓度为10 mg/mL。小鼠接受腹腔注射,剂量为25-100 mg/kg。注射后30-120分钟采集血液和组织样本。对于心脏研究,将大鼠麻醉后,通过导管将6-Bnz-cAMP以10-100 μM的浓度注入左前降支冠状动脉,持续10分钟。对于记忆研究,小鼠接受海马内注射(0.5-2 μg/侧)。治疗后,对动物进行行为学测试(例如,新物体识别、恐惧条件反射)。在实验终点,采集脑组织,并通过免疫组织化学或Western blot检测CREB磷酸化(p-CREB Ser133)以确认PKA激活。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无6-Bnz-cAMP钠盐的药代动力学数据。该化合物是一种环核苷酸类似物,在一定程度上能抵抗磷酸二酯酶(PDE)的降解,但仍可能在体内发生水解。N6位的苯甲酰基修饰增强了细胞渗透性和PKA选择性,同时赋予其一定的PDE抵抗性。小鼠腹腔注射后,组织浓度在30-60分钟内达到峰值。该化合物可能经肾脏排泄,或被组织中的PDE和磷酸酶代谢。目前尚未发表正式的ADME研究。该化合物溶于水(≥50 mg/mL)和DMSO(≥100 mg/mL)。储备液在-20℃下可稳定保存数月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据安全数据表,6-Bnz-cAMP钠盐可能引起皮肤和眼睛刺激。吞咽有害(预计口服LD50为500-2000 mg/kg)。吸入粉尘可能引起呼吸道刺激。目前尚无致癌性、致突变性或生殖毒性数据。该化合物在推荐的储存条件下稳定(粉末,-20℃,干燥,避光)。应采取标准实验室防护措施:通风橱、手套、护目镜、实验服。皮肤接触后,用肥皂和水清洗;眼睛接触后,用清水冲洗15分钟。根据美国交通部(DOT)的规定,该化合物不属于运输危险品。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
6-Bnz-cAMP钠盐并非已获批准的药物,也无临床试验或监管审批历史。它是一种研究用化学品,用作信号转导研究的药理学工具。该化合物常与Epac特异性激活剂(例如8-CPT-2Me-cAMP)联合使用,以解析PKA和Epac通路在细胞过程(例如基因表达、胰岛素分泌、心肌收缩力、突触可塑性和免疫细胞活化)中的相对作用。该化合物仅供研究使用。对PKA选择性的理解也为开发用于治疗心力衰竭、糖尿病和神经系统疾病的治疗性cAMP类似物提供了信息。然而,该化合物本身并未被开发为药物。
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| 分子式 |
C17H15N5NAO7P
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|---|---|
| 分子量 |
455.29
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| 精确质量 |
455.06
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| CAS号 |
1135306-29-4
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| PubChem CID |
23672707
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
161
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
716
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C1[C@@H]2[C@H]([C@H]([C@@H](O2)N3C=NC4=C(N=CN=C43)NC(=O)C5=CC=CC=C5)O)OP(=O)(O1)[O-].[Na+]
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| InChi Key |
SPYGSKQRPXISIB-FKVBDRBCSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H16N5O7P.Na/c23-12-13-10(6-27-30(25,26)29-13)28-17(12)22-8-20-11-14(18-7-19-15(11)22)21-16(24)9-4-2-1-3-5-9;/h1-5,7-8,10,12-13,17,23H,6H2,(H,25,26)(H,18,19,21,24);/q;+1/p-1/t10-,12-,13-,17-;/m1./s1
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| 化学名 |
sodium;N-[9-[(4aR,6R,7R,7aS)-7-hydroxy-2-oxido-2-oxo-4a,6,7,7a-tetrahydro-4H-furo[3,2-d][1,3,2]dioxaphosphinin-6-yl]purin-6-yl]benzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1964 mL | 10.9820 mL | 21.9640 mL | |
| 5 mM | 0.4393 mL | 2.1964 mL | 4.3928 mL | |
| 10 mM | 0.2196 mL | 1.0982 mL | 2.1964 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。