| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PKI 14-22 amide, myristoylated specifically targets the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase A (PKA). The peptide sequence is derived from the active region of the endogenous PKI protein (residues 14-22) and acts as a competitive inhibitor by binding to the substrate-binding site of the PKA catalytic subunit. The myristoylation (addition of a myristoyl group, C14:0 fatty acid) facilitates cellular uptake, allowing the peptide to reach its intracellular target. The compound exhibits high selectivity for PKA; at concentrations effective for PKA inhibition, it does not significantly affect other protein kinases. The Ki value is reported to be in the low nanomolar range.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，PKI 14-22 酰胺（肉豆蔻酰化 TFA）是一种强效的 PKA 抑制剂。该化合物可降低免疫细胞中 IgG 介导的吞噬反应，并抑制中性粒细胞黏附，表明其对依赖于 PKA 活性的细胞过程具有功能性影响。在使用纯化的 PKA 催化亚基和标准底物（例如 Kemptide 或肽底物）进行的激酶活性测定中，该肽对 PKA 活性的抑制作用 IC50 或 Ki 值均在低纳摩尔范围内。肉豆蔻酰化形式的细胞渗透性显著高于非肉豆蔻酰化形式，使其适用于完整细胞研究。
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| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，PKI 14-22酰胺（肉豆蔻酰化TFA）能够预防小鼠镇痛耐受性的产生，提示PKA在阿片类药物耐受机制中发挥作用。该化合物还能抑制寨卡病毒的蛋白质翻译和负链RNA合成，提示其具有潜在的抗病毒应用价值。这些结果表明，当给药剂量合适时，肉豆蔻酰化肽能够到达体内的细胞内靶点。该化合物可用于阿片类药物耐受机制和抗病毒药物研发等领域的研究。
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| 酶活实验 |
典型的体外PKA激酶活性测定采用放射性或发光法。反应混合物（25 uL）包含激酶缓冲液（40 mM Tris-HCl，pH 7.4，20 mM MgCl2，0.1 mg/mL BSA）、50 uM ATP、50 uM Kemptide底物（Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly）和1 ng纯化的PKA催化亚基。加入不同浓度（0.01-1000 nM）的PKI 14-22酰胺化肉豆蔻酰化TFA。加入酶启动反应，在30℃孵育15-30分钟，然后加入0.5%磷酸终止反应。取少量反应混合物点样于P81磷酸纤维素滤纸上。将滤纸用0.75%磷酸洗涤3次，干燥后，用液体闪烁计数法测定放射性（如果使用γ-32P-ATP）。或者，使用非放射性发光测定法（例如ADP-Glo™）；进行激酶反应后，剩余的ATP被检测试剂转化为光。IC50或Ki值根据剂量反应曲线计算。为了进行选择性筛选，将化合物在1-10 uM浓度下与一系列其他蛋白激酶（例如PKC、CaMKII、AKT）进行测试。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的吞噬作用实验：将 RAW 264.7 巨噬细胞或原代小鼠巨噬细胞接种于 24 孔板中（2×10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 DMEM。过夜培养后，用 PKI 14-22 酰胺、肉豆蔻酰化 TFA（0.1-10 uM）处理细胞，于 37℃ 孵育 1-2 小时。对于 IgG 介导的吞噬作用实验，将绵羊红细胞 (SRBC) 与亚凝集浓度的兔抗 SRBC IgG 于 37℃ 孵育 30 分钟进行调理。将调理后的 SRBC 以 20:1 的比例（SRBC：巨噬细胞）加入巨噬细胞中，于 37℃ 孵育 60 分钟。通过低渗裂解去除未被吞噬的 SRBC。细胞固定后，用吉姆萨染色或Diff-Quik染色，并计算吞噬指数（每200个巨噬细胞吞噬的绵羊红细胞数量）。中性粒细胞黏附实验：从健康供体中通过Ficoll-Histopaque梯度离心法分离人中性粒细胞。将中性粒细胞与PKI 14-22酰胺、肉豆蔻酰化三氟乙酸（0.1-10 uM）在37℃下预孵育15分钟，然后接种于纤维蛋白原包被的孔板（96孔板，5 ug/孔）。30分钟后，洗去未黏附的细胞，并通过测量髓过氧化物酶（MPO）活性或结晶紫染色（595 nm吸光度）对黏附细胞进行定量。病毒学研究：将Vero细胞或A549细胞感染寨卡病毒（MOI 0.1-1）。用肽（1-20 uM）处理细胞24-48小时。通过qRT-PCR定量上清液中的病毒RNA，并使用抗寨卡病毒抗体通过Western blot检测病毒蛋白表达。使用嘌呤霉素掺入法测定蛋白质翻译。
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| 动物实验 |
镇痛耐受模型：采用雄性ICR或C57BL/6小鼠（25-30 g，每组n=8-10）。通过皮下注射吗啡（10 mg/kg），每日两次，连续7天，诱导吗啡耐受。PKI 14-22酰胺，即肉豆蔻酰化TFA，溶于无菌PBS或5% DMSO/PBS溶液中。在每次吗啡注射前15分钟，将该化合物鞘内注射（L5-L6椎间隙，5 μL）或腹腔注射（0.5-5 mg/kg）。在第1、3、5和7天，吗啡给药后30分钟，通过甩尾试验或热板试验（55℃，观察舔舐后爪或跳跃的潜伏期）评估镇痛效果。耐受性定义为镇痛反应随时间显著降低。该肽有望延缓或阻止吗啡耐受性的产生。寨卡病毒模型：将6-8周龄的A129小鼠（IFN-α/β受体缺陷型）或AG129小鼠（IFN-α/β/γ受体缺陷型）腹腔注射寨卡病毒（10⁵ PFU）。每天一次腹腔注射PKI 14-22酰胺、肉豆蔻酰化TFA（1-5 mg/kg），持续5-7天。通过噬斑试验或 qRT-PCR 监测存活情况，并量化血液、大脑和其他组织中的病毒载量。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
肉豆蔻酰化肽（TFA盐的分子量约为1323.51 g/mol）具有细胞渗透性，这是其靶向细胞内给药的关键优势。然而，作为一种肽，由于其在血清中易被蛋白水解酶快速降解，预计其血浆半衰期非常短（可能<30分钟）。肉豆蔻酰基团可提高其细胞渗透性，但并不能显著提高肽在血浆中的稳定性，使其不易降解。因此，在体内研究中，可能需要多次给药或持续输注（例如，通过渗透泵）以维持有效浓度。TFA盐形式可确保其在水性缓冲液中的溶解性。目前尚未发表详细的定量药代动力学参数（t½、AUC、Cmax、生物利用度）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无关于 PKI 14-22 酰胺（肉豆蔻酰化 TFA）的正式毒性数据。在动物研究中，该化合物已通过鞘内注射（小鼠）和腹腔注射给药，剂量高达 5 mg/kg，未见明显的毒性或死亡报告。肉豆蔻酰基是一种天然存在的脂肪酸，通常被认为具有生物相容性。在高浓度下，该肽可能引起非特异性膜效应，但在用于 PKA 抑制的浓度范围内（体外 0.1-10 μM，体内 1-5 mg/kg），尚未报告显著不良反应。应遵循标准的实验室安全预防措施（手套、实验服、护目镜）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PKI 14-22 酰胺，肉豆蔻酰化 TFA 是一种研究级肽，尚未获准用于临床。它是一种强效的 cAMP 依赖性 PKA 抑制剂，可降低 IgG 介导的吞噬反应并抑制中性粒细胞黏附。它还可以预防小鼠镇痛耐受性的产生并抑制寨卡病毒复制。肉豆蔻酰基 (C14:0) 可促进细胞穿透，使该肽在完整细胞试验中比非肉豆蔻酰化版本更有效。TFA 盐是其标准商业形式。该化合物应以粉末形式储存于 -20℃，并防潮。复溶后的溶液应分装并储存于 -80℃；避免反复冻融。
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| 分子式 |
C55H101F3N20O14
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|---|---|
| 分子量 |
1323.51
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~1.85 mg/mL (~1.40 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7556 mL | 3.7778 mL | 7.5557 mL | |
| 5 mM | 0.1511 mL | 0.7556 mL | 1.5111 mL | |
| 10 mM | 0.0756 mL | 0.3778 mL | 0.7556 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Kiss2 peptide acetate
Rp-8-Br-cAMPS sodium
8-Bromo-cAMP
Sp-8-Br-cAMPS
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