VEGFR2 (IC50 = 6.5 nM); VEGFR3 (IC50 = 15 nM); EphB2 (IC50 = 24 nM); VEGFR1 (IC50 = 30 nM); PDGFRα (IC50 = 40 nM)
Tivozanib HCl hydrate targets vascular endothelial growth factor receptors (VEGFRs), which are key regulators of angiogenesis. By inhibiting VEGFR-1, -2, and -3, it blocks the signaling pathways that promote the growth of new blood vessels in tumors. This anti-angiogenic effect is the primary mechanism of its antitumor activity. It is a tyrosine kinase inhibitor (TKI).

盐酸替沃扎尼水合物可阻止 VEGFR-1、VEGFR-2 和 VEGFR-3 的磷酸化 [2]。AV-951 是一种新型的尿素和喹啉衍生物。AV-951 可抑制内皮细胞增殖和 VEGF 依赖的丝裂原活化蛋白激酶的激活 [1]。KRN951 是一种新型的 VEGFR 酪氨酸激酶抑制剂，具有抗肿瘤血管生成和抗肿瘤生长活性。KRN951 可有效抑制 VEGF 诱导的内皮细胞中 VEGFR-2 的磷酸化，其体外 IC50 值低于纳摩尔级（IC50 = 0.16 nmol/L）。它还抑制了配体诱导的血小板衍生生长因子受体β (PDGFR-β) 和 c-Kit 的磷酸化（IC50 分别为 1.72 和 1.63 nmol/L）。KRN951 阻断了 VEGF 依赖性的丝裂原活化蛋白激酶激活和内皮细胞增殖，但对 VEGF 非依赖性的丝裂原活化蛋白激酶激活和内皮细胞增殖没有影响。此外，它还抑制了 VEGF 介导的人脐静脉内皮细胞迁移。[1]
体外实验表明，盐酸替沃扎尼水合物是 VEGFR-1、-2 和 -3 的强效抑制剂，IC50 值分别为 30 nM、6.5 nM 和 15 nM。这些数值表明其对 VEGFR 家族具有高效性和选择性。其活性已通过无细胞激酶活性测定得到表征。

盐酸替沃扎尼水合物（1 mg/kg；口服；14 天）可抑制 CNV 病变的发展，并显著消退已形成的 CNV，使受累面积减少 67.7%。
体内研究表明，AV-951，特别是口服 1 mg/kg 剂量时，也能降低肿瘤异种移植模型中的微血管密度并抑制 VEGFR2 磷酸化水平。在无胸腺大鼠中，AV-951 几乎完全抑制肿瘤异种移植模型的生长（TGI>85%）。[1] 另一项使用腹膜播散性肿瘤大鼠模型的研究表明，AV-951 可将荷瘤大鼠的生存期延长至中期生存期后 53.5 天。当应用于多种人类肿瘤异种移植模型，例如肺癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胰腺癌和前列腺癌时，AV-951 均表现出抗肿瘤活性。[2]

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在对无胸腺大鼠进行口服给药后，KRN951 可降低肿瘤异种移植模型内的微血管密度，并减弱肿瘤内皮细胞中 VEGFR-2 的磷酸化水平。它还对多种人类肿瘤异种移植模型显示出抗肿瘤活性，包括肺癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胰腺癌和前列腺癌。此外，动态对比增强磁共振成像 (DCE-MRI) 分析显示，肿瘤血管高通透性的显著降低与 KRN951 的抗肿瘤活性密切相关。这些发现表明，KRN951 是一种高效的口服活性抗血管生成和抗肿瘤药物，并且 DCE-MRI 可用于在临床环境中检测 KRN951 的早期疗效。 KRN951目前正处于治疗晚期癌症患者的I期临床开发阶段。[1]
体内研究表明，盐酸替沃扎尼水合物能够抑制脉络膜新生血管（CNV）病变的发展。在动物模型中，以1 mg/kg的剂量口服给药14天，可显著消退已形成的CNV，使受累面积减少67.7%。这些结果支持其在体内的抗血管生成和抗肿瘤活性。

通过使用 1 μM ATP 进行四重复的无细胞激酶活性测定，确定了 AV-951 对各种重组受体和非受体酪氨酸激酶（例如 VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、c-Kit、PDGFRβ、Flt-3 和 FGFR1）的 IC50 值。

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激酶选择性。[1]
使用 1 μmol/L ATP 进行四重复的无细胞激酶活性测定，以确定 Tivozanib (AV951; KRN-951) 对各种重组受体和非受体酪氨酸激酶的 IC50 值。重组酶购自 ProQinase GmbH。 [1]
我们进行了基于细胞的实验，以确定Tivozanib (AV951; KRN-951)抑制配体依赖性受体酪氨酸激酶磷酸化的能力，具体方法如前所述。简而言之，将细胞在含有0.5%胎牛血清(FBS)的适宜基础培养基中饥饿过夜。加入KRN951或0.1% DMSO后，细胞孵育1小时，然后在37°C下用相应的配体刺激。除VEGFR-3（10分钟）、c-Met（10分钟）和c-Kit（15分钟）外，其他受体的磷酸化诱导时间为5分钟。实验中使用的所有配体均为人重组蛋白，VEGF-C为大鼠重组蛋白。细胞裂解后，用相应的抗体对受体进行免疫沉淀，并进行磷酸酪氨酸免疫印迹分析。印迹定量和IC50值计算按先前所述方法进行。[1]

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丝裂原活化蛋白激酶激活。[1]
评估方法如前所述。简而言之，将HUVECs在含0.5% FBS的基础培养基（EBM-2）中饥饿16小时。用Tivozanib (AV951; KRN-951)孵育1小时后，用50 ng/mL VEGF、25 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子或20 ng/mL EGF刺激HUVECs。将细胞裂解液进行SDS-PAGE电泳，然后用磷酸化p44/42丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）抗体进行磷酸化MAPK的免疫印迹分析。[1]

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通透性测定和 VEGFR-2 磷酸化检测。[2]
本研究评估了恶性腹水对内皮细胞通透性和 VEGFR-2 磷酸化的影响，以及替沃扎尼 (AV951; KRN-951) 对这些影响的抑制活性。从载体处理的腹膜播散性肿瘤模型中采集第 25 天的腹水样本，混合后取上清液进行测定。我们采用体外实验检测碘化丙啶的摄取量来评估通透性。VEGFR-2 磷酸化通过蛋白质印迹法测定。在通透性测定中，将培养至 90% 汇合度的 HUVEC 细胞在含有 0.5% 胎牛血清的基础培养基 (EBM-2) 中饥饿过夜。随后用磷酸盐缓冲液洗涤这些细胞，并在培养板中加入恶性腹水和浓度为10 nM的替沃扎尼（AV951；KRN-951）。仅含培养基或不含腹水的50 ng/mL VEGF作为内参。孵育7小时后，收集细胞并用碘化丙啶（1 µg/mL）处理，然后进行FACS分析。通过测量HUVEC对碘化丙啶的摄取量来评估通透性。对于Western blotting实验，HUVEC的处理方法相同，只是腹水刺激时间为10分钟。细胞裂解后，使用抗VEGFR-2抗体对VEGFR蛋白进行免疫沉淀，然后按照先前描述的方法[2]进行抗磷酸酪氨酸抗体免疫印迹分析。
替沃扎尼盐酸盐水合物的无细胞测定方法包括测量其对VEGFR激酶活性的抑制作用。将重组VEGFR-1、-2或-3酶与肽底物和ATP在不同浓度的化合物存在下孵育。测量磷酸盐掺入底物的量，并计算IC50值。据报道，替沃扎尼对VEGFR-1、VEGFR-2和VEGFR-3的IC50值分别为30 nM、6.5 nM和15 nM。

本研究采用基于人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 和正常人真皮成纤维细胞的检测方法，评估 AV-951 抑制酪氨酸激酶受体配体依赖性磷酸化的能力。在含有 0.5% 胎牛血清 (FBS) 的适宜基础培养基中，细胞饥饿培养一天。随后，将细胞与 AV-951 或 0.1% DMSO 孵育 1 小时，然后在 37°C 下用相应的配体刺激细胞。除 VEGFR3、c-Met 和 c-Kit 分别诱导 10 分钟和 15 分钟外，其他受体的磷酸化持续 5 分钟。VEGF-C（一种大鼠重组蛋白）是本检测中唯一一种非人源重组蛋白的配体。细胞裂解后，用相应的抗体免疫沉淀受体，然后进行磷酸酪氨酸免疫印迹分析。印迹定量和IC50值计算均已完成。

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内皮细胞增殖。[1]
将HUVECs以4000个细胞/200 μL/孔的密度接种于含5% FBS的M-199培养基中，置于胶原蛋白包被的96孔板中。24小时后，加入Tivozanib (AV951/KRN-951)，随后加入20 ng/mL VEGF或10 ng/mL bFGF，继续培养72小时。加入[3H]胸苷（1 μCi/mL），继续培养12小时。然后收集细胞，用液体闪烁计数器测量其放射性。[1]

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趋化性实验。[1]
使用96孔微室板评估HUVEC的迁移能力。细胞在含0.1%牛血清白蛋白（BSA）的EBM-2培养基中饥饿5小时。然后收集细胞，重悬于含0.1% BSA的EBM-2培养基中，并置于上室。通过在下室中加入含10 ng/mL VEGF、0.1% FBS和0.1% BSA的培养基来启动细胞迁移。如有需要，在上下室中均加入Tivozanib (AV951/KRN-951)。孵育22小时后，用4 μg/mL钙黄绿素AM的HBSS溶液对细胞进行染色。通过荧光酶标仪，在激发/发射波长为485/530 nm的条件下，直接测量穿过荧光阻断膜孔隙迁移的细胞的荧光强度。[1]

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细胞毒性试验。 [1]
这些检测方法如前所述。简而言之，将细胞接种于96孔板中，并在含10%胎牛血清（FBS）的培养基中培养。在培养开始约24小时后加入替沃扎尼（Tivozanib，AV951/KRN-951），然后继续培养72小时。使用WST-1试剂检测细胞活力。[1]
替沃扎尼盐酸盐水合物的细胞检测通常包括评估其对内皮细胞增殖和血管生成的影响。用该化合物处理细胞，并测量其抑制VEGF刺激的增殖、迁移和管状结构形成的能力。这些检测证实了其在细胞环境中的抗血管生成活性。具体方案未详细说明。

小鼠：将癌细胞皮下注射到无胸腺大鼠的右侧腹部。手术切除体积达 1500 mm³ 的肿瘤，并将较小的肿瘤组织块（20-30 mg）皮下植入接受辐射的大鼠的右侧腹部。从随机分组的第 0 天开始，口服给予 KRN951（0.2 或 1 mg/kg）或载体。使用游标卡尺测量并计算肿瘤体积，每周两次。

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肿瘤异种移植模型。使用无胸腺大鼠 (RH-rnu/rnu)。在用 γ 射线源（7 Gy，Co60）进行全身照射 24 小时后，将癌细胞皮下接种到大鼠的右侧腹部。肿瘤形成后，将体积约为 1500 mm³ 的肿瘤进行手术切除，并将较小的肿瘤碎片（20-30 mg）皮下植入经照射大鼠的右侧腹部。在随机分组当天（第 0 天），开始口服给予 Tivozanib (AV951/KRN-951)（0.2 或 1 mg/kg）或载体。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并按公式（长度 × 宽度²）× 0.5 计算。相对肿瘤体积 (RTV) 的计算公式为：第 x 天的 RTV = 第 x 天的肿瘤体积 / 第 0 天的肿瘤体积。肿瘤生长抑制率 (TGI%) 的计算方法如前所述。RTV 的统计分析采用非配对 t 检验。DCE-MRI：将新鲜的 Calu-6 肿瘤碎片皮下植入无胸腺大鼠 (RH-rnu/rnu) 体内。当肿瘤体积达到 274 至 287 mm³ 时（第 -1 天），将大鼠随机分组。随机分组后第二天（第 0 天）开始每日一次口服给予Tivozanib (AV951/KRN-951)或赋形剂，持续 2 周（第 0-13 天）。MRI 实验在配备柔性接收线圈（圆极化）的全身磁体上进行，磁场强度为 1.5 T。分别在第 -1 天（治疗开始前）、第 2 天、第 13 天和第 21 天进行 DCE-MRI 扫描。在第 2 天和第 13 天，大鼠在口服给予Tivozanib (AV951/KRN-951) 4 小时后进行成像。在将动物放入磁体之前，通过尾静脉插管注射造影剂。实验过程中，大鼠经肌注氯胺酮和赛拉嗪混合液（体积比2:1，剂量分别为70 mg/kg和15 mg/kg）麻醉。麻醉后的大鼠仰卧放置于谐振器内的摇篮状支架上。通过预扫描成像序列确定大鼠的精确位置。[1]

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肿瘤血管直径的测量。在MRI研究期间，另取三组携带Calu-6肿瘤的大鼠（RH-rnu/rnu，每组三只）用于使用荧光染料H33342（24）测量肿瘤血管直径。大鼠接受Tivozanib (AV951/KRN-951)（0.2 或 1 mg/kg）或载体治疗 14 天（从第 0 天到第 13 天），并在第 13 天静脉注射 H33342（20 mg/kg）1 分钟后处死。取出肿瘤，并从每个肿瘤的五个层面制备 10 μm 厚的冰冻切片，各层面之间至少间隔 200 μm。使用尼康落射荧光显微镜在紫外光照射下观察肿瘤切片，以识别周围环绕着荧光 H33342 标记细胞晕圈的血管。使用 Win ROOF 软件测量晕圈内的管腔直径作为血管直径。统计分析采用 Mann-Whitney 检验。[1]

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肿瘤血管平滑肌肌动蛋白阳性周细胞覆盖的组织学分析。通过皮下注射细胞，在无胸腺大鼠体内建立了Calu-6肿瘤异种移植模型。当肿瘤体积平均达到273至275 mm³时，将大鼠随机分组，然后分别口服给予Tivozanib (AV951/KRN-951)或载体，持续2周。在用抗CD31抗体对内皮细胞进行染色后，使用Cy3标记的单克隆抗α-平滑肌肌动蛋白抗体对肿瘤周细胞进行免疫荧光染色。使用LSM 510系统以100倍放大倍率采集组织图像。随机选取每个切片的六个视野（每个视野0.8489 mm²）进行分析，排除周围结缔组织和中心坏死组织。为了避免操作者偏倚，在对组织切片进行盲法编码后，使用 Win ROOF 软件对 CD31 阳性细胞及其周围 α-平滑肌肌动蛋白阳性区域内细胞的数量进行定量分析。[1]

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替沃扎尼 (AV951/KRN-951) 的药代动力学分析。无胸腺大鼠（F344/N JcL-rnu，每组 4 只雌性）口服替沃扎尼 (AV951/KRN-951)，并在给药后 72 小时内按预定时间间隔从尾静脉采集血样。向每个血清样本中加入适量的内标物 KRN633。用乙腈对血清样本进行脱蛋白处理，并用高效液相色谱-串联质谱法分析上清液。采用非房室模型分析计算药代动力学参数。按照先前描述的方法[1]模拟了重复口服0.2 mg/kg剂量后Tivozanib (AV951/KRN-951)的稳态血清浓度。

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Tivozanib (AV951/KRN-951)悬浮于溶剂（0.5%甲基纤维素水溶液）中，并储存于4°C。每周配制新鲜溶液。[2]
实验设计：接种RCN-9细胞的大鼠随机分为三组，每日口服Tivozanib (AV951/KRN-951)（1或3 mg/kg）或0.5%甲基纤维素溶剂对照。这些治疗分别在肿瘤移植后第4天或第14天开始，并分别持续10天或11天。治疗结束后，处死大鼠并评估肿瘤进展情况。还收集了腹水并测量了其体积。在显微镜下观察了肠系膜中每个被脂肪组织包围的透明窗口。然后计数了具有血管的肠系膜窗口的百分比以及肠系膜窗口上有或没有血管的肿瘤结节的数量。[2]
在随后的生存研究中，接种了RCN-9细胞的大鼠被随机分配到载体处理组或1 mg/kgTivozanib (AV951/KRN-951)处理组（每组n = 10）。分别从肿瘤接种当天或移植后14天开始进行治疗。使用Kaplan-Meier方法绘制结果图，并使用log-rank检验分析生存差异。AP值<0.05被认为具有统计学意义。[2]

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肿瘤血管成像。将接种了RCN-9细胞的大鼠（分别接受或未接受Tivozanib (AV951/KRN-951)治疗）麻醉后，经静脉注射异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖（分子量200,000）。处死动物后，用4%多聚甲醛固定肠系膜，并将其置于载玻片上。随后，在显微镜下拍摄每个肠系膜窗口相关的血管。客观记录血管连接点和路径的数量（作为血管分叉特征）、血管的面积和长度（作为血管生成密度）以及血管的迂曲度，并使用血管生成图像分析仪（Kurabo，大阪，日本）进行定量评估。每组实验使用4只大鼠，每只动物分析12-15个不同的视野。 [2]
已在脉络膜新生血管（CNV）模型中进行了盐酸替沃扎尼水合物的体内动物实验。在一项研究中，该化合物以1 mg/kg的剂量口服给药，持续14天。结果表明，它抑制了CNV病变的发展，并显著消退了已形成的CNV，使受累面积减少了67.7%。

吸收、分布和排泄
替沃扎尼的达峰时间（Tmax）中位数为10小时，但范围可从3小时到24小时不等。一项针对8名健康受试者的药代动力学研究显示，放射性标记的替沃扎尼的Cmax和AUC分别为12.1 ± 5.67 ng/mL和1084 ± 417.0 ng·h/mL。替沃扎尼的稳态浓度在正常剂量的6-7倍时达到。替沃扎尼主要经粪便排泄。健康志愿者口服1.34 mg放射性标记的替沃扎尼后，79%的给药剂量存在于粪便中（其中26%为原药），12%仅以代谢物的形式存在于尿液中。替沃扎尼的表观分布容积 (V/F) 为 123 L。
替沃扎尼的表观清除率 (CL/F) 约为 0.75 L/h。

代谢/代谢物

替沃扎尼主要通过 CYP3A4 代谢。健康志愿者口服 1.34 mg 放射性标记的替沃扎尼后，血清中检测到的放射性药物有 90% 为未代谢的替沃扎尼。

生物半衰期

根据处方信息，替沃扎尼的半衰期约为 111 小时。临床研究数据显示其半衰期为 4-5 天。

盐酸替沃扎尼水合物是一种口服活性化合物。现有资料中未提供具体的药代动力学参数，例如半衰期和生物利用度。
目前正在研究其治疗晚期肾细胞癌和其他实体瘤的疗效。

肝毒性
在已发表的替沃扎尼预注册临床试验中，血清ALT或AST水平升高的发生率在10%至29%之间，其中1%至4%的治疗患者ALT或AST水平超过正常值上限（ULN）的5倍。一些临床试验报告了具有临床意义的肝损伤病例，包括肝衰竭导致的死亡，但所有病例均归因于肝转移或其他基础肝病。自替沃扎尼获批并广泛应用于临床以来，尚未报告具有临床意义的肝损伤或肝衰竭病例，但其临床应用仍然有限。概率评分：E（未经证实但怀疑是具有临床意义的肝损伤的原因）。蛋白结合：体外研究表明，替沃扎尼主要与白蛋白结合，结合率≥99%。
现有资料中未提供替沃扎尼盐酸盐水合物的毒性数据。作为一种获得FDA批准用于治疗肾细胞癌的药物（Fotivda），其安全性已得到证实。常见不良反应包括高血压、疲劳和腹泻。目前尚无具体的毒理学信息。

[1]. Cancer Res. 2006 Sep 15;66(18):9134-42.

[2]. Cancer Sci. 2008 Mar;99(3):623-30.

盐酸替沃扎尼是替沃扎尼的盐酸盐，替沃扎尼是一种口服生物利用度高的血管内皮生长因子受体 (VEGFR) 1、2 和 3 抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。替沃扎尼与 VEGFR 1、2 和 3 结合并抑制其活性，从而抑制内皮细胞的迁移和增殖，抑制肿瘤血管生成，最终导致肿瘤细胞死亡。VEGFR 酪氨酸激酶在多种肿瘤细胞类型中经常过表达，并在血管生成中发挥关键作用。
另见：替沃扎尼（含活性成分）。
适应症
Fotivda 适用于一线治疗成人晚期肾细胞癌 (RCC) 患者，以及既往接受过细胞因子治疗后病情进展且未接受过 VEGFR 和 mTOR 通路抑制剂治疗的成人晚期 RCC 患者。它用于治疗晚期肾细胞癌。 1-[2-氯-4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-3-(5-甲基-3-异噁唑基)脲是一种芳香醚。肾细胞癌 (RCC) 占癌症病例的 3%，是成人十大常见癌症之一。平均诊断年龄在 65 至 74 岁之间。替沃扎尼（Tivozanib），也称为 FOTIVDA，是一种激酶抑制剂，用于治疗既往接受过全身治疗失败的复发或难治性晚期肾细胞癌 (RCC) 成人患者。它于 2021 年 3 月 10 日获得 FDA 批准。替沃扎尼由 Aveo Oncology 公司销售，对于其他疗法失败的 RCC 患者来说，是一种很有前景的治疗方案。替沃扎尼是一种激酶抑制剂。替沃扎尼的作用机制是作为酪氨酸激酶抑制剂。替沃扎尼是一种小分子多激酶抑制剂，用于治疗复发或难治性肾细胞癌。替沃扎尼治疗期间，血清转氨酶短暂轻度升高较为常见，但尚未有报道出现与临床显著的急性肝损伤相关的病例。替沃扎尼是一种口服生物利用度高的血管内皮生长因子受体 (VEGFR) 1、2 和 3 抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。替沃扎尼可与 VEGFR 1、2 和 3 结合并抑制其活性，从而抑制内皮细胞的迁移和增殖，抑制肿瘤血管生成，并诱导肿瘤细胞死亡。VEGFR 酪氨酸激酶在多种肿瘤细胞类型中经常过表达，并在血管生成中发挥关键作用。另见：盐酸替沃扎尼（盐形式）；无水盐酸替沃扎尼（其活性成分）。药物适应症：替沃扎尼（Tevozarib）在美国获批用于治疗既往接受过两种或两种以上全身治疗的复发或难治性肾细胞癌成人患者。在英国和其他国家，替沃扎尼获批作为一线治疗药物，用于治疗既往接受过细胞因子治疗后病情进展且未接受过VEGFR和mTOR通路抑制剂治疗的晚期肾细胞癌（RCC）成人患者。福赛替达（Fosetida）也获批作为一线治疗药物，用于治疗既往接受过细胞因子治疗后病情进展且未接受过VEGFR和mTOR通路抑制剂治疗的晚期肾细胞癌成人患者。用于治疗晚期肾细胞癌。作用机制：VHL突变-HIF上调-VEGF转录是肾细胞癌生长的主要通路。血管内皮生长因子受体（VEGFR受体）是酪氨酸激酶抑制剂的重要靶点，酪氨酸激酶抑制剂可抑制肿瘤生长。替沃扎利是一种酪氨酸激酶抑制剂，其作用机制是通过抑制血管内皮生长因子受体（VEGFR）-1、VEGFR-2 和 VEGFR-3 的磷酸化，以及抑制其他激酶，例如 c-kit 和血小板衍生生长因子 β (PDGFRβ)。上述作用可抑制肿瘤生长和进展，从而治疗肾细胞癌。血管内皮生长因子 (VEGF) 通过激活 VEGF 受体 (VEGFR) 酪氨酸激酶，刺激内皮细胞中的促血管生成信号通路，在肿瘤血管生成中发挥关键作用。因此，VEGFR 是癌症治疗中极具吸引力的靶点。在本研究中，我们发现喹啉-脲衍生物 KRN951 是一种新型 VEGFR 酪氨酸激酶抑制剂，具有抗肿瘤血管生成和抗肿瘤生长活性。 KRN951 能有效抑制 VEGF 诱导的内皮细胞中 VEGFR-2 的磷酸化，其 IC50 值低于纳摩尔级（IC50 = 0.16 nmol/L）。它还能抑制配体诱导的血小板衍生生长因子受体 β (PDGFR-β) 和 c-Kit 的磷酸化（IC50 值分别为 1.72 和 1.63 nmol/L）。KRN951 可阻断 VEGF 依赖的丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 激活和内皮细胞增殖，但对 VEGF 非依赖的 MAPK 激活和内皮细胞增殖无影响。此外，它还能抑制 VEGF 介导的人脐静脉内皮细胞迁移。在无胸腺大鼠中口服 KRN951 后，肿瘤内皮细胞的微血管密度降低，VEGFR-2 磷酸化水平也降低。该药物还在多种人类肿瘤异种移植模型中展现出抗肿瘤活性，包括肺癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胰腺癌和前列腺癌。此外，动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）分析显示，肿瘤血管通透性的显著降低与KRN951的抗肿瘤活性密切相关。这些发现表明，KRN951是一种具有抗血管生成和抗肿瘤活性的强效药物，并且DCE-MRI可用于在临床环境中检测KRN951的早期疗效。KRN951目前正处于治疗晚期癌症患者的I期临床试验阶段。[1] 我们使用大鼠结肠癌RCN-9同源模型评估了KRN951（一种新型血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂）的抗肿瘤疗效。在该模型中，将肿瘤细胞移植到F344大鼠的腹腔内。移植后第4天开始给予KRN951治疗，可显著抑制肿瘤诱导的血管生成、肠系膜窗内肿瘤结节的形成以及恶性腹水的积聚。此外，在第14天（此时血管生成和恶性腹水已基本形成）开始给予KRN951治疗，可使异常新生血管消退，并在研究结束时使恶性腹水显著消失。对肠系膜窗血管结构的定量分析表明，KRN951不仅能抑制肿瘤诱导的新生血管，还能使其恢复正常。与载体对照组相比，每日持续给予KRN951可显著延长早期和晚期肿瘤大鼠的生存期。我们目前的研究结果表明，KRN951通过抑制肿瘤血管生成、腹水形成和肿瘤扩散，抑制腹腔内结肠癌的进展并延长患者的生存期。此外，这些研究清楚地表明，KRN951 对已形成的腹部肿瘤具有治疗作用，包括肿瘤消退和肿瘤血管生成正常化。因此，我们的研究结果表明，KRN951 具有作为未来治疗腹膜癌伴腹水药物的巨大潜力。[2]
盐酸替沃扎尼水合物（CAS：682745-41-1）是一种选择性口服活性 VEGFR 抑制剂。它也被称为 AV-951 盐酸盐水合物，商品名为 Fotivda。它对 VEGFR-1、-2 和 -3 的抑制 IC50 值分别为 30 nM、6.5 nM 和 15 nM。它适用于治疗晚期肾细胞癌 (RCC)。临床前和临床研究均显示其具有抗血管生成和抗肿瘤活性。

C22H22CL2N4O6

509.339283466339

508.092

682745-41-1

Tivozanib;475108-18-0; 682745-40-0 (hydrate); 682745-41-1 (HCl hydrate)

11547978

White to off-white solid powder

5.811

123.69

4

8

6

34

631

0

RQXMKRRBJITKRN-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C22H19ClN4O5.ClH.H2O/c1-12-8-21(27-32-12)26-22(28)25-16-5-4-13(9-15(16)23)31-18-6-7-24-17-11-20(30-3)19(29-2)10-14(17)18;;/h4-11H,1-3H3,(H2,25,26,27,28);1H;1H2

1-[2-chloro-4-(6,7-dimethoxyquinolin-4-yl)oxyphenyl]-3-(5-methyl-1,2-oxazol-3-yl)urea;hydrate;hydrochloride

TIVOZANIB HYDROCHLORIDE; 682745-41-1; Tivozanib HCl hydrate; Tivozanib hydrochloride hydrate; UNII-8A9H4VK35Z; fotivda; 8A9H4VK35Z; Tivozanib hydrochloride [USAN];

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~250 mg/mL (~490.83 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。