FLT3 (IC50 = 1 nM); c-Kit (IC50 = 2 nM); FGFR1 (IC50 = 8 nM); FGFR3 (IC50 = 9 nM); VEGFR1 (IC50 = 1 nM); VEGFR3 (IC50 = 8 nM); VEGFR2 (IC50 = 13 nM); PDGFRα (IC50 = 27 nM); PDGFRβ (IC50 = 210 nM)

体外活性：Dovitinib 有效抑制 FGF 刺激的 WT 和表达 F384L-FGFR3 的 B9 细胞的生长，IC50 为 25 nM。此外，Dovitinib 还可抑制表达 FGFR3 各种激活突变体的 B9 细胞的增殖。有趣的是，不同 FGFR3 突变对 Dovitinib 的敏感性观察到的差异很小，每种突变的 IC50 范围为 70 至 90 nM。仅含有载体的 IL-6 依赖性 B9 细胞（B9-MINV 细胞对浓度高达 1 μM 的 Dovitinib 的抑制活性具有抗性。Dovitinib 抑制 KMS11 (FGFR3-Y373C)、OPM2 (FGFR3-K650E) 和KMS18 (FGFR3-G384D) 细胞的 IC50 分别为 90 nM（KMS11 和 OPM2）和 550 nM。Dovitinib 抑制 FGF 介导的 ERK1/2 磷酸化，并在表达 FGFR3 的原代 MM 细胞中诱导细胞毒性。BMSC 确实赋予适度的细胞毒性。用 500 nM Dovitinib 处理并在基质上培养的细胞具有 44.6% 的耐药性，而没有 BMSC 生长的细胞则具有 71.6% 的生长抑制。Dovitinib 抑制 M-NFS-60 的增殖，M-NFS-60 是一种 M-CSF 生长驱动的小鼠成髓细胞系中位有效浓度 (EC50) 为 220 nM。用 Dovitinib 处理 SK-HEP1 细胞会导致细胞数量呈剂量依赖性减少，G2/M 期停滞，同时 G0/G1 和 S 期减少，锚定抑制-bFGF 诱导的细胞运动的独立生长和阻断。 Dovitinib 在 SK-HEP1 细胞中的 IC50 约为 1.7 μM。 Dovitinib 还显着降低 SK-HEP1 和 21-0208 细胞中 FGFR-1、FGFR 底物 2α (FRS2-α) 和 ERK1/2 的基础磷酸化水平，但不降低 Akt。在 21-0208 HCC 细胞中，Dovitinib 显着抑制 bFGF 诱导的 FGFR-1、FRS2-α、ERK1/2 磷酸化，但不抑制 Akt。激酶测定：多维替尼抑制 RTK 的 50% 抑制浓度 (IC50) 以时间分辨荧光 (TRF) 或放射性形式测定，测量多维替尼对相应酶磷酸盐转移至底物的抑制作用。 FGFR3、FGFR1、PDGFRβ 和 VEGFR1-3 的激酶结构域在 50 mM HEPES（N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸）、pH 7.0、2 mM MgCl2、10 mM MnCl2、1 mM NaF、 1 mM 二硫苏糖醇 (DTT)、1 mg/mL 牛血清白蛋白 (BSA)、0.25 μM 生物素化肽底物 (GGGGQDGKDYIVLPI) 和 1 至 30 μM 三磷酸腺苷 (ATP)，具体取决于相应酶的 Km。 ATP 浓度等于或略低于 Km。对于 c-KIT 和 FLT3 反应，在存在 0.25 至 1 μM 生物素化肽底物 (GGLFDDPSYVNVQNL) 的情况下，使用 0.2 至 8 μM ATP 将 pH 升至 7.5。反应在室温下孵育 1 至 4 小时，磷酸化肽被捕获在含有终止反应缓冲液（25 mM EDTA [乙二胺四乙酸]、50 mM HEPES，pH 7.5）的链霉亲和素包被的微量滴定板上。使用铕标记的抗磷酸酪氨酸抗体 PT66 通过 DELFIA TRF 系统测量磷酸化肽。使用 XL-Fit 数据分析软件 4.1 版 (IDBS) 的非线性回归计算 Dovitinib 的 IC50 浓度。集落刺激因子 1 受体 (CSF-1R)、PDGFRα、胰岛素受体 (InsR) 和胰岛素样生长因子受体 1 (IGFR1) 激酶活性的抑制在 ATP 浓度接近 ATP 的 Km 时测定。细胞测定：通过 3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四唑 (MTT) 染料吸光度评估细胞活力。将细胞以每孔 5 × 103（B9 细胞）或 2 × 104（MM 细胞系）细胞的密度接种在 96 孔板中。将细胞与 30 ng/mL aFGF 和 100 μg/mL 肝素或 1% IL-6（如指定）一起孵育，并增加 Dovitinib 浓度。对于每个浓度的 Dovitinib，添加 10 μL 等份的药物或在培养基中稀释的 DMSO。对于药物组合研究，细胞与 0.5 μM 地塞米松、100 nM Dovitinib 或同时与两者一起孵育（如有指示）。为了评估 Dovitinib 对粘附 BMSC 的 MM 细胞生长的影响，在存在或不存在 Dovitinib 的情况下，在 BMSC 包被的 96 孔板上培养 104 个 KMS11 细胞。将板孵育 48 至 96 小时。为了评估巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF) 介导的生长，将 5 × 103 M-NFS-60 细胞/孔与含有 10 ng/mL M-CSF 且不含粒细胞-巨噬细胞集落的 Dovitinib 连续稀释液一起孵育。刺激因子（GM-CSF）。 72 小时后，使用 Cell Titer-Glo Assay 测定细胞活力。每个实验条件一式三份进行。

Dovitinib 在体内诱导细胞抑制和细胞毒性反应，导致表达 FGFR3 的肿瘤消退。 Dovitinib 对肿瘤异种移植物中表达的靶受体酪氨酸激酶 (RTK) 显示剂量和暴露依赖性抑制。 Dovitinib 可有效抑制六种 HCC 细胞系的肿瘤生长。血管生成的抑制与 FGFR/PDGFRβ/VEGFR2 信号通路的失活相关。在原位模型中，Dovitinib 可有效抑制原发性肿瘤生长和肺转移，并显着延长小鼠的生存期。 Dovitinib 的给药可显着抑制肿瘤生长和肿瘤消退，包括已形成的大肿瘤 (500-1,000 mm3)。

在时间分辨荧光 (TRF) 或放射性形式中，计算多韦替尼抑制 RTK 的 50% 抑制浓度 (IC50) 值，测量多韦替尼引起的相应酶对磷酸盐转移至底物的抑制。 FGFR3、FGFR1、PDGFRβ 和 VEGFR1-3 激酶结构域的测定条件为 50 mM HEPES（N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸）、pH 7.0、2 mM MgCl2、10 mM MnCl2、1 mM NaF、1 mM 二硫苏糖醇 (DTT)、1 mg/mL 牛血清白蛋白 (BSA)、0.25 μM 生物素化肽底物 (GGGGQDGKDYIVLPI) 和 1 至 30 μM 三磷酸腺苷 (ATP)，具体取决于每种酶对应的 Km 。 ATP 的浓度等于或略低于 Km。对于 c-KIT 和 FLT3 反应，pH 值增加至 7.5，并添加 0.2 至 8 μM ATP 以及 0.25 至 1 μM 生物素化肽底物 (GGLFDDPSYVNVQNL)。反应在室温下孵育一到四小时后，磷酸化肽被捕获在含有终止反应缓冲液（25 mM EDTA [乙二胺四乙酸]，50 mM HEPES，pH 7.5）的链霉亲和素包被的微量滴定板上。 DELFIA TRF 系统使用铕标记的抗磷酸酪氨酸抗体 (PT66) 测量磷酸化肽。使用XL-Fit数据分析软件4.1版(IDBS)，使用非线性回归计算多维替尼的IC50浓度。当 ATP 浓度接近 ATP Km 时，胰岛素受体 (InsR)、PDGFRα、集落刺激因子 1 受体 (CSF-1R) 和胰岛素样生长因子受体 1 (IGFR1) 的激酶活性受到抑制。

3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四唑(MTT)染料吸光度代表细胞活力。每孔 5 × 103（B9 细胞）或 2 × 104（MM 细胞系）细胞的密度用于在 96 孔板中接种细胞。为了培养细胞，根据需要添加不同浓度的 Dovitinib 以及 30 ng/mL aFGF、100 μg/mL 肝素或 1% IL-6。对于每个浓度的多韦替尼，添加在培养基中稀释的 10 μL 药物或 DMSO 等分试样。药物组合研究涉及将细胞与 100 nM Dovitinib 或 0.5 μM 地塞米松一起孵育，或在必要时同时与两者一起孵育。为了评估Dovitinib对粘附于BMSC的MM细胞生长的影响，在存在或不存在Dovitinib的情况下在涂有BMSC的96孔板上培养104个KMS11细胞。板的孵育时间为 48-96 小时。按顺序将 5 × 10³ M-NFS-60 细胞/孔与含有 10 ng/mL M-CSF 且不含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) 的 Dovitinib 连续稀释液一起培养评估 M-CSF 介导的巨噬细胞集落生长的生长。使用 Cell Titer-Glo Assay，72 小时后评估细胞活力。每个实验条件都运行三次。

[1]. Blood . 2005 Apr 1;105(7):2941-8.

[2]. J Hepatol . 2012 Mar;56(3):595-601.

[3]. Clin Cancer Res . 2005 May 15;11(10):3633-41.

C24H27FN6O4

482.51

500.21834621

C, 59.74; H, 5.64; F, 3.94; N, 17.42; O, 13.26

915769-50-5

Dovitinib lactate;692737-80-7;Dovitinib;405169-16-6;Dovitinib dilactic acid;852433-84-2

white solid powder

CC(C(=O)O)O.CN1CCN(CC1)C2=CC3=C(C=C2)N=C(N3)C4=C(C5=C(C=CC=C5F)NC4=O)N.O

QDPVYZNVVQQULH-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C21H21FN6O.C3H6O3.H2O/c1-27-7-9-28(10-8-27)12-5-6-14-16(11-12)25-20(24-14)18-19(23)17-13(22)3-2-4-15(17)26-21(18)29;1-2(4)3(5)6;/h2-6,11H,7-10H2,1H3,(H,24,25)(H3,23,26,29);2,4H,1H3,(H,5,6);1H2

4-amino-5-fluoro-3-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-quinolin-2-one;2-hydroxypropanoic acid;hydrate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。