| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
α7 nAChR/α7 nicotinic acetylcholine receptor
PNU-282987 S enantiomer hydrochloride targets α7 nicotinic acetylcholine receptor (α7 nAChR) as a full agonist, with a Ki value of 12 nM ([¹²⁵I]-α-bungarotoxin binding assay) and an EC₅₀ value of 0.3 μM (ion channel activation assay in Xenopus oocytes) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PNU-282987（游离碱）（化合物 C7）的 Ki 为 27 nM，可从脑匀浆中去除 R7 选择性抗甲基乌头碱 (MLA) [1]。 PNU-282987：PNU-282987 的 IC50 值为 4541 nM，同样对 5-HT3 受体具有抑制作用[1]。 α7 nAChR 聚合剂活性的 EC50 为 154 nM [1]。
PNU-282987 S enantiomer hydrochloride 对α7 nAChR具有高亲和力，1 μM浓度下可置换大鼠脑膜中[¹²⁵I]-α-银环蛇毒素与受体的结合，抑制率>95%，亲和力为其R对映体的8倍 [1] - 在表达人α7 nAChR的非洲爪蟾卵母细胞中：该化合物诱导完全离子通道激活，最大反应幅度为乙酰胆碱的1.2倍，效价为R对映体的10倍 [1] - 它对α7 nAChR具有优异的选择性，对其他nAChR亚型亲和力极低：α4β2、α3β4及α1βγδ nAChR的Ki > 10 μM，浓度高达10 μM时，未观察到与毒蕈碱受体（M1-M5）的明显结合 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
化合物 C7 (iv；1、3 mg/kg) PNU-282987（游离碱）可逆转门控缺陷 [1]。 PNU-282987 (30 μM) 以稀释且可阻断 MLA 的方式刺激海马神经元中的电流 [1]。
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| 酶活实验 |
脑匀浆结合试验（[3H]-MLA，[3H]-金雀花碱，[3H]-GR65630）：[1]
通过断头处死雄性Sprague-Dawley大鼠（300-350g），快速解剖大脑（全脑减去小脑），称重并在50℃下使用旋转杵在9体积/g湿重的0.32M冰冷蔗糖中均质化（10次上下击打）。将匀浆在40°C下以1000 x g离心10分钟。收集上清液，在40°C.下以20000 x g离心20分钟。将所得沉淀重新悬浮至蛋白质浓度为1-8mg/ml。将5ml匀浆的等分试样在-80°C.下冷冻，直至需要进行分析。在测定当天，将等分试样在室温下解冻，并用含有4.16 mM NaHCO3、0.44 mM KH2PO4、127 mM NaCl、5.36 mM KCl、1.26 mM CaCl2和0.98 mM MgCl2的Kreb's-20 mM HEPES缓冲液pH 7.0（在室温下）稀释，从而每个试管中添加25-150 mg蛋白质。以牛血清白蛋白为标准，采用Bradford法测定蛋白质浓度。对于α7，在放射性配体之前添加1µM MLA的情况下平行孵育的组织中测定了非特异性结合，在竞争研究中，在添加约3 nM[3H]-MLA（25 Ci/mmol）之前，将化合物以越来越高的浓度添加到试管中。对于α4，在放射性配体之前添加1 mM（-）-尼古丁的情况下平行孵育的组织中测定了非特异性结合，在竞争研究中，在添加约1.0 nM[3H]-金雀花碱之前，将化合物以越来越高的浓度添加到试管中。对于5-HT3，在放射性配体之前添加1µM ICS-205930的情况下，在平行孵育的组织中测定非特异性结合，在竞争研究中，在添加约0.45 nM[3H]-GR65630之前，将化合物以越来越高的浓度添加到试管中。对于所有结合试验，将0.4 ml匀浆加入含有缓冲液、试验化合物和放射性配体的试管中，并在25°下以0.5 ml的最终体积孵育1小时。通过安装在48孔Brandel细胞采集器上的Whatman GF/B玻璃滤纸进行快速真空过滤，终止培养。过滤器预先浸泡在50 mM Tris-HCl pH 7.0-0.05%聚乙烯亚胺中。用5ml等分的0.9%冷盐水洗涤过滤器两次，然后通过液体闪烁光谱法计算放射性。抑制常数（Ki）是通过将数据拟合到Cheng-Prusoff方程中获得的放射性配体结合的浓度依赖性抑制来计算的。PNU-282987在该测定中的Ki为27±1nM（n=48）
PNU-282987在1µM时没有显著置换大鼠脑匀浆中的氚化金雀花碱（抑制率=14±4%，n=13）。就5-HT3受体而言，PNU-28298.7置换了氚化GR-65630，Ki为1662±331 nM（n=10）
α7 nAChR放射性配体结合实验：制备富含α7 nAChR的大鼠脑膜，与[¹²⁵I]-α-银环蛇毒素及系列稀释的PNU-282987 S enantiomer hydrochloride在25°C孵育2小时。通过玻璃纤维滤膜过滤分离结合态与游离态放射性配体，定量放射性强度计算Ki值 [1] - α7 nAChR功能实验：向非洲爪蟾卵母细胞注射编码人α7 nAChR的cRNA，在18°C孵育48–72小时。将卵母细胞置于记录槽中，加入PNU-282987 S enantiomer hydrochloride（0.01–10 μM），膜电位钳制在-70 mV，采用双电极电压钳记录内向电流，确定EC₅₀和激动剂效能 [1] - 对映体选择性实验：将细胞膜和卵母细胞分别用等浓度的PNU-282987 S对映体、R对映体及外消旋体处理，比较它们的结合亲和力和功能活性 [1] |
| 细胞实验 |
非洲爪蟾卵母细胞α7 nAChR激活实验：分离非洲爪蟾卵母细胞并去除滤泡膜，注射人α7 nAChR cRNA，孵育后暴露于不同浓度的PNU-282987 S enantiomer hydrochloride，测量离子电流评估受体激活情况。将S对映体与其他立体异构体的活性对比，验证对映体选择性 [1]
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| 动物实验 |
膜片钳电生理：培养神经元的制备参照Brewer的方法。简而言之，将Sprague-Dawley大鼠（出生后第3天）断头处死，取出脑组织并置于冰冷的Hibernate-A培养基中。轻轻取出海马区，切成小块，置于含1 mg/ml木瓜蛋白酶的Hibernate-A培养基中，于35℃消化60分钟。消化后，用Hibernate-A培养基多次洗涤组织，然后转移至装有6 ml含2% B-27补充剂的Hibernate-A培养基的50 ml锥形管中。将神经元通过轻柔研磨法分离，并以300-700个细胞/mm²的密度接种于聚赖氨酸/层粘连蛋白包被的盖玻片上，然后转移至含有预热培养基的24孔组织培养板中。该培养基由Neurobasal-A培养基、2% B-27添加剂、0.5 mM L-谷氨酰胺、100 U/ml青霉素、100 mg/ml链霉素和0.25 mg/ml两性霉素B组成。细胞在37℃、6% CO₂的加湿培养箱中培养1-2周。培养基在24小时后更换一次，之后大约每三天更换一次。使用弗莱明/布朗微量移液管拉制仪，以硼硅酸盐毛细管玻璃为材料拉制膜片钳电极，并填充内液，内液成分为（单位：mM）：CsCH3SO3 (126)、CsCl (10)、NaCl (4)、MgCl2 (1)、CaCl2 (0.5)、EGTA (5)、HEPES (10)、ATP-Mg (3)、GTP-Na (0.3)、磷酸肌酸 (4)，pH 7.2。填充内液后，膜片钳电极的电阻范围为 3 – 6 MΩ。所有实验均在室温下进行。培养细胞持续灌流含有以下成分（单位：mM）：NaCl (140)、KCl (5)、CaCl2 (2)、MgCl2 (1)、HEPES (10)、葡萄糖 (10)、比库啉 (0.01)、CNQX (0.005)、D-AP-5 (0.005)、河豚毒素 (0.0005)，pH 7.4。化合物溶于水或DMSO，并稀释到最终DMSO浓度为0.1%的外浴液中，通过多管快速灌流系统进行灌流。使用Axopatch 200B放大器（Axon Instruments，Union City，CA）记录全细胞电流。模拟信号经1/5采样频率滤波、数字化、存储，并使用pCLAMP软件（Axon Instruments）进行测量。所有数据均以平均值±标准误（SEM）表示。[1]
听觉门控实验。实验对象为雄性Sprague-Dawley大鼠（体重250-300克），采用水合氯醛麻醉（400 mg/kg，腹腔注射）。分别对大鼠的股动脉和股静脉进行插管，用于监测动脉血压和给药或追加麻醉剂。使用置于CA3区的金属单极宏电极记录单侧海马场电位（EEG）（坐标：距前囟后3.0-3.5 mm，侧方2.6-3.0 mm，腹侧3.8-4.0 mm；Paxinos和Watson，1986）。场电位经放大、滤波（0.1-100 Hz）、显示和记录后，用于在线和离线分析（Spike3软件）。定量EEG分析采用快速傅里叶变换（FFT）（Spike3软件）。听觉刺激由一对持续10毫秒、频率为5千赫兹的纯音脉冲组成，第一个“条件刺激”和第二个“测试刺激”之间有0.5秒的延迟。通过对50对刺激（刺激间隔为10秒）的反应取平均值来计算听觉诱发电位。门控百分比的计算公式为：(1 - 测试振幅/条件振幅) × 100。为了破坏感觉门控，给予安非他明（硫酸右旋安非他明，0.3-1毫克/千克，静脉注射）。在给予安非他明5分钟后开始记录诱发电位，仅使用门控缺陷超过20%的大鼠进行后续α7 nAChR激动剂或溶剂对照的评估。统计学显著性采用双尾配对t检验确定。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
我们利用嵌合受体，在功能性、基于细胞的高通量检测中，测试了一系列苯甲酰胺类化合物对α7尼古丁乙酰胆碱受体（nAChR）的激动活性。结果表明，奎宁环苯甲酰胺类化合物具有α7 nAChR激动活性。该类化合物的构效关系与5-HT3受体（α7 nAChR的结构同源物）的活性存在差异。其中活性最强的化合物PNU-282987，也被证实能够激活培养的大鼠神经元中的天然α7 nAChR，并逆转苯丙胺诱导的大鼠神经元门控缺陷。[1] 总之，我们利用平行合成方法，探索了含叔胺基的芳酰胺类化合物作为α7 nAChR激动剂的构效关系。在测试的五种结构不同的胺类化合物中，只有3-氨基奎宁环产生了活性类似物。R对映异构体的活性高于相应的S对映异构体。在苯甲酰胺部分，对位上的小取代基可得到活性最高的类似物。该系列中最有效的类似物是4-氯苯甲酰胺，即PNU-282987。多项实验证实，α7-5HT3嵌合体测定法能够预测天然α7 nAChR的活性。PNU-282987能以27 nM的Ki值从大鼠脑匀浆中置换MLA，并以浓度依赖性和MLA可阻断的方式在大鼠海马神经元中诱发电流。我们还在感觉门控受损的大鼠模型中测试了该化合物。用PNU-282987治疗门控受损的大鼠可逆转门控缺陷。这些结果表明，(R)-3-氨基奎宁环芳酰胺类化合物（例如 PNU-282897）可作为寻找 α7 nAChR 激动剂的模板，这些激动剂可能有助于治疗精神分裂症的认知和注意力缺陷。[1]
PNU-282987 S 对映体盐酸盐 是 PNU-282987 的药理活性立体异构体，PNU-282987 是一种合成的奎宁环苯甲酰胺衍生物。[1] - 其作用机制涉及与 α7 nAChR 的正位结合，促进受体寡聚化和阳离子通道开放，并具有完全的激动剂效力。[1] - S 构型对于 α7 nAChR 的高亲和力和效力至关重要，因为 R 对映体活性极低（Ki > 96 nM，EC₅₀ > 3 μM）[1] - 它是一种有价值的用于研究α7 nAChR功能（特别是立体选择性研究）的工具化合物，在神经系统疾病研究中具有潜在的应用价值[1] |
| 分子式 |
C14H18CL2N2O
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|---|---|
| 分子量 |
301.211521625519
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| 精确质量 |
300.079
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| 元素分析 |
C, 55.83; H, 6.02; Cl, 23.54; N, 9.30; O, 5.31
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| CAS号 |
128311-08-0
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| 相关CAS号 |
PNU-282987;123464-89-1;PNU-282987 S enantiomer free base;737727-12-7;PNU-282987 free base;711085-63-1
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| PubChem CID |
18645636
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
32.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
307
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1CN2CCC1[C@@H](C2)NC(=O)C3=CC=C(C=C3)Cl.Cl
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| InChi Key |
HSEQUIRZHDYOIX-BTQNPOSSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H17ClN2O.ClH/c15-12-3-1-11(2-4-12)14(18)16-13-9-17-7-5-10(13)6-8-17;/h1-4,10,13H,5-9H2,(H,16,18);1H/t13-;/m1./s1
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| 化学名 |
N-[(3S)-1-azabicyclo[2.2.2]octan-3-yl]-4-chlorobenzamide;hydrochloride
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| 别名 |
(S)-4-Chloro-N-(quinuclidin-3-yl)benzamide hydrochloride; (S)-PNU-282987 (hydrochloride); PNU-282987 S enantiomer hydrochloride; Benzamide, N-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl-4-chloro-, monohydrochloride, (S)-; N-[(3S)-1-Azabicyclo[2.2.2]octan-3-yl]-4-chlorobenzamide;hydrochloride; SCHEMBL9601902;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3199 mL | 16.5997 mL | 33.1994 mL | |
| 5 mM | 0.6640 mL | 3.3199 mL | 6.6399 mL | |
| 10 mM | 0.3320 mL | 1.6600 mL | 3.3199 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
N-(2-羟乙基)-N,N-二甲基-2-丙炔-1-溴化铵
亚硒酸钠
ML095 HCL
MDL 100009(MDL100009)
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463611831
